overzicht

ijzer speelt een vitale rol in de meeste organismen vanwege zijn vermogen om elektronenoverdracht te katalyseren, een essentieel onderdeel van metabole reacties in de mitochondriën tijdens de productie van energie. Bovendien, in zoogdieren ijzer is een belangrijke component van hemoglobine, waardoor het vervoer van zuurstof naar weefsels via rode bloedcellen. Vrij ijzer is potentieel giftig vanwege zijn vermogen om de vorming van schadelijke vrije radicalen te katalyseren. Om deze reden, wordt ijzer gewoonlijk gebonden aan proteã nen als deel van heme groepen of ijzer-zwavel centra voor functionele activiteit. Niet-functioneel ijzer is gebonden aan dragereiwitten of opslagproteã nen, maar kan losjes aan andere proteã nen in een labiele vorm in bijlage zijn. De zorgvuldige controle van de ijzerdistributie bij mensen regelt niet alleen de beschikbaarheid en toxiciteit, maar speelt ook een rol in de immuunrespons. Tijdens infectie houdt het lichaam beschikbaar ijzer vast om het gebruik ervan te voorkomen door bacteriën binnen te dringen, waardoor hun vermogen om te groeien en te vermenigvuldigen aanzienlijk wordt beperkt.

een van de belangrijkste regelaars van ijzertransport in cellen is CD71, ook bekend als transferrinereceptor 1. Figuur 1 geeft een samenvatting van zijn rol in het transporteren van ijzer uit weefselvloeistof of plasma in de cel. “Vrij” ijzer, in de vorm van Fe(III) bindt aan transferrin, dat zelf een ligand voor membraangebonden CD71 wordt. Het Fe(III)-transferin-CD71 complex wordt dan endocytosed in een endosoom dat door de actie van ionenpompen wordt aangezuurd. Binnen de zure omgeving valt het complex uiteen in zijn samenstellende delen. CD71 en transferrine worden terug naar de oppervlakte gerecycleerd, terwijl Fe(III) wordt gereduceerd tot Fe(II) door de activiteit van de METALLOPROTEASE STEAP3. Fe (II) kan dan uit het endosoom worden geëxporteerd door het eiwit DMT1 (divalent metal transporter 1). Binnen het cytoplasma kan de Fe (II) associëren met ferritine en worden opgeslagen voor toekomstig gebruik; verwerkt in de mitochondria voor de synthese van heme groepen en Fe-s samenstellingen; of vrijgegeven terug in de extracellulaire omgeving door de actie van ferroportin. De versie van Fe (II) door ferroportin wordt negatief gecontroleerd door het hormoon hepcidin van de lever, bijvoorbeeld tijdens ontsteking om ijzerbeschikbaarheid aan ziekteverwekkers te beperken. Het vrijgegeven FE(II) ijzer kan dan terug in de FE (III) vorm door plasmaproteïnen zoals ceruloplasmine worden omgezet.

Fig. 1. De rol van transferrinereceptor 1 in ijzertransport naar cellen.

onderzoek naar Ijzertransport

Bio-Rad verkoopt een reeks antilichamen tegen eiwitten die betrokken zijn bij ijzerhomeostase.

Target	Human	Mouse	Rat
CD71/TfR1	MCA1148, MCA2775, VMA00037	MCA1033, MCA2474	MCA155
Transferrin	9100-0004, 9100-1055, AHP081, AHP1757, AHP858, VMA00578, VPA00797	AHP081	9100-1055, AHP081
Ferritin	4420-4804, 4420-3010, 4420-3904GA, 4420-4804, AHP2179, OBT1639
Ceruloplasmin
Proerythroblasts / Erythrocytes	MCA506G	MCA6044G

Flow Cytometry Analysis of Key Iron Transport Marker CD71

Rat Anti-Mouse CD71 Antibody, clone 8D3 recognizes mouse CD71, a 763 amino acid ~95 kDa single pass type II de celoppervlakte van de transmembraanglycoproteïne, ook bekend als de transferrinereceptor. CD71 wordt uitgedrukt op cellen uit de erytroïde lijn maar ontbreekt uit de meerderheid van rijpe erytrocyten. De kloon 8D3 herkent inheemse, oplosbare en gedenatureerde vormen van muriene CD71. De Binding van het 8D3-antilichaam aan CD71 interfereert niet met de opname van ijzer in cellen. Rat Anti-muis ter-119/erytroïde cellen antilichaam, kloon TER-119 herkent TER-119 ook bekend als Ly-76. De ter-119 kloon detecteert een 52 kDa eiwit dat wordt geassocieerd met celoppervlak uitgedrukt glycophorine A. TER-119 is een erythroid-specifiek antigeen dat van het vroege proerytroblast tot het rijpe erytrocytenstadium wordt uitgedrukt. Dit antigeen wordt ook in mindere mate uitgedrukt op 20-25% van de beenmergcellen en 2-3% van de miltcellen. Deze belangrijke tellers zijn gebruikt samen in cytometry stroom (Figuur 2) om CD71 te tonen die voor de invoer van FE wordt vereist om hemoglobine in positieve proerytroblasten ter-119 samen te stellen.

Fig. 2. Cytometry analyse van de stroom van de tellers CD71 en TER-119 van het muistronvervoer. A, RPE geconjugeerde Rat Anti-muis ter-119 (MCA6044PE) antilichaam en FITC geconjugeerde Rat IgG2a isotype controle (MCA1212F). B, RPE geconjugeerde Rat Anti-muis ter-119 (MCA6044PE) antilichaam en FITC geconjugeerde Rat Anti-muis CD71 (MCA2474F) antilichaam. Alle experimenten met beenmerg van muizen. Gegevens verkregen op de Ze5™ Cell Analyzer.