Achtergrond & doelstellingen: coeliakie kan worden behandeld en mogelijk genezen door de T-celtolerantie voor gliadin te herstellen. We onderzochten de veiligheid en werkzaamheid van negatief geladen 500 nm poly(lactide-co-glycolide) nanodeeltjes encapsulating gliadineproteïne (TIMP-GLIA) in 3 muismodellen van coeliakie. Het begrijpen van deze nanoparticles door antigeen-presenterende cellen werd getoond om immune tolerantie in andere dierlijke modellen van auto-immune ziekte te veroorzaken.
methoden: we hebben studies uitgevoerd met c57bl/ 6; RAG1 -/ – (C57BL / 6); en HLA-DQ8, hucd4 transgene Ab0 NOD muizen. Muizen kregen 1 of 2 staartaderinjecties van TIMP-GLIA of controle nanodeeltjes. Sommige muizen kregen intradermale injecties met gliadin in volledige adjuvans van Freund (immunisatie) of Van oplosbaar gliadin of ovalbumine (ooruitdaging). RAG – / – muizen kregen intraperitoneale injecties met CD4 + CD62L-CD44hi T-cellen van gliadin-geïmmuniseerde c57bl / 6 muizen en werden gevoed met een op Ain-76A gebaseerd dieet met tarwegluten (orale uitdaging) of zonder gluten. Milt of lymfeklier cellen werden geanalyseerd in proliferatie en cytokine secretie assays of door stroom cytometrie, RNA sequencing, of real-time kwantitatieve polymerasekettingreactie. Serummonsters werden geanalyseerd door gliadin antilichaam enzyme-linked immunosorbent assay, en darmweefsels werden geanalyseerd door histologie. De menselijke mononucleaire cellen van het perifere bloed, of onrijpe dendritische cellen afgeleid van menselijke mononucleaire cellen van het perifere bloed, werden gekweekt in medium dat TIMP-GLIA, anti-CD3 antilichaam, of lipopolysaccharide (controles) bevat en geanalyseerd in proliferatie en cytokine secretie assays of door cytometrie stroom. Volbloed of plasma van gezonde vrijwilligers werd geïncubeerd met TIMP-GLIA, en hemolyse, bloedplaatjesactivering en aggregatie, en complementactivering of coagulatie werden geanalyseerd.
resultaten: TIMP-GLIA verhoogde de maturatiemarkers op gekweekte humane dendritische cellen niet en induceerde geen activering van T-cellen bij patiënten met actieve of behandelde coeliakie. In de vertraagd-type overgevoeligheid (model 1), de HLA-DQ8 transgene (model 2), en de gliadine-geheugen T-cel-enteropathie (model 3) modellen van de ziekte van de buikholte, intraveneuze injecties van TIMP-GLIACELLEN aanzienlijk gedaald gliadine-specifieke T-cel proliferatie (in model 1 en 2), inflammatoire cytokine secretie (in de modellen 1, 2 en 3), circuleren gliadine-specifieke IgG/IgG2c (in model 1 en 2), oor zwelling (in model 1), gluten-afhankelijke enteropathie (in model 3), en gewichtsverlies (in model 3). In model 1 bleken de effecten dosisafhankelijk te zijn. Splenocyten van HLA-DQ8 transgene muizen gegeven TIMP-GLIA nanoparticles, maar niet controle nanoparticles, hadden verhoogde niveaus van FOXP3 en genexpressie handtekeningen geassocieerd met tolerantie inductie.
conclusies: bij muizen met gliadinegevoeligheid induceerde injectie van TIMP-GLIA nanodeeltjes geen respons op gliadine en verminderde markers van ontsteking en enteropathie. Deze strategie kan worden ontwikkeld voor de behandeling van coeliakie.
