Correlatie van IFNy, CD107 en CD137 op eencellig niveau kan worden gebruikt om de T-celrespons bij patiënten na immunotherapie te controleren.

aangezien immunotherapieën steeds belangrijker worden bij de behandeling van verschillende kankers, wordt het monitoren van de immuunrespons om de werkzaamheid van de therapie weer te geven ook steeds belangrijker. Eerder correleerde tumor antigeen-specifieke humorale responsen bij patiënten die vaccins kregen voor laaggradig folliculair lymfoom (FL) met klinische resultaten, waaronder tumorregressie, moleculaire remissie, progressievrije overleving (PFS) en totale overleving (OS). Daarentegen zijn de immuunresponsen van de T-cel moeilijk te valideren geweest. De analyses van de celproliferatie van T, meestal, meten de celreacties van CD4 T; terwijl, de cellen van CD8 T de belangrijke die effectoren kunnen zijn door immunotherapieën worden geproduceerd. Nochtans, analyses ontworpen om CD8 T cellen te meten, d.w.z. de analyses van CTL van de chromiumversie, en IFN-γ ELISPOT en intracellular cytometry analyses van de stroom, zijn moeilijk reproduceerbaar te maken. Om deze kwestie aan te pakken, werd PBL verkregen van FL patiënten, cryopreserved, en ontdooid, dan gebruikt om een gestandaardiseerde methode voor opsporing van intracellular IFN-γ Door cytometry stroom te ontwerpen. De gecombineerde stimulus van oplosbare anti-CD3 en anti-CD28 antilichamen biedt een robuuste stimulatie, typisch ongeveer 5% van normale PBL CD8+ T cellen reageren. Door gebruik te maken van een panel van bestraalde B – cellymfoom cellijnen als stimulatoren, hebben we aangetoond dat gemiddeld 1-2% van deze T-cellen in staat was om een respons in deze test op te zetten. Verrassend genoeg reageerden CD8+ PBL T-cellen van verschillende patiënten met FL meer op gecombineerde anti-CD3-en anti – CD28 – stimulatie en op allo-stimulatie, respectievelijk 15-22% en 2-6%. Deze respons ging gepaard met oppervlakteexpressie van CD107, een surrogaatmarker voor CTL-degranulatie, in dezelfde populatie cellen, zoals aangetoond door cytometrie met multi-color flow. Zowel de IFN-γ als de CD107 responsen werden geremd door een anti-klasse I antilichaam, W6/32, wat wijst op een klasse I beperkte t-celreceptor-gemedieerde respons. Bovendien, op latere tijdstippen, deze T cellen ook up-geregeld CD137 op hun oppervlak. Deze activeringsmolecule wordt upregulated op CD8 T cellen in reactie op specifieke antigeenherkenning en verstrekt een anti-apoptotic signaal aan de cellen. Concluderend kan de immuuncompetentie van CD8 T-cellen geïsoleerd van FL-patiënten worden beoordeeld door middel van allo-stimulatie door een panel van B-cellymfoomcellijnen. Belangrijker, kan de correlatie door cytometry stroom van 3 onafhankelijke indicatoren van reactie (IFN-γ, CD107 en CD137) binnen enige bevolking van cellen aan zowel allo-stimulatie als aan het specifieke doel, tot beter begrip van de rol van de cellen van T in de immune reactie leiden. Uiteindelijk zullen deze reacties moeten worden gevalideerd met patiëntresultaten in klinische studies van vaccins in lymfoom.

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.