Abstract
Cervicitis is een veel voorkomende seksueel overdraagbare aandoening. In de afgelopen jaren heeft het misbruik van antibiotica bij de behandeling van cervicitis geleid tot het ontstaan van antibioticaresistente bacteriën; alternatieve strategieën zijn nodig om te worden ontwikkeld. In dit onderzoek onderzochten we de effecten van feilin Vaginale Gel (FVG), een Chinese kruidenformule, op de behandeling van cervicitis. Twee cervicitismodellen werden geoptimaliseerd met behulp van BALB/C muis; een in vitro model werd vastgesteld in HeLa cellen. In Chlamydia trachomatis-geïnduceerde cervicitis model, het hoge niveau van bacteriële belastingen, de ontsteking in weefsel, en de cytokines in serum kunnen worden waargenomen. Met de toediening van FVG kan de bacteriële belasting in cervicaal slijm en baarmoederhals weefsel aanzienlijk worden geremd in dosisafhankelijke manieren. Het pathologische letsel van baarmoederhals en vagina, evenals de niveaus van IL-2, IL-17 en MCP-1 in serum, kunnen door FVG worden beperkt. FVG verminderde het aantal inclusie geïnduceerd door C. trachomatis in HeLa-cellen. Daarnaast kan de histologische schade in Escherichia coli en Staphylococcus aureus-geïnduceerde cervicitis model worden verminderd door FVG. Deze resultaten suggereren dat FVG cervicitis kan behandelen door de remming van pathogenen en de regulatie van de immuunrespons van de gastheer. FVG kan bijdragen als een alternatief middel voor de behandeling van cervicitis.
1. Inleiding
Cervicitis is een veel voorkomende seksueel overdraagbare aandoening met een inflammatoire aandoening van de baarmoederhals . De infectie van de baarmoederhals begint bij de lagere geslachtsorganen (vagina) en ontwikkelt zich vervolgens tot de ontstekingsziekte in het bekken met opgaande infectie van de bovenste geslachtsorganen (baarmoeder en eileiders) en peritoneale holte . Cervicitis kwam vaak voor als een asymptomatische infectie. Abnormale cervicale of vaginale mucopurulente afscheiding en cervicale ectopie kunnen bij sommige patiënten de tekenen en symptomen van cervicitis zijn . Ernstige cervicitis kan echter leiden tot verdere onvruchtbaarheid en buitenbaarmoederlijke zwangerschap. Cervicitis wordt beschouwd als geassocieerd met de overdracht van HIV-infectie en de ontwikkeling van cervicale carcinomen .
Cervicitis kan worden geïnduceerd door verschillende pathogenen zoals Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorroe, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas, Herpes simplex virus, cytomegalovirus en adenovirus . C. trachomatis infectie wordt gemeld als de meest voorkomende oorzaak van cervicitis. Meer dan 10% van de vrouwen met cervicitis wordt gediagnosticeerd te zijn besmet met C. trachomatis en het aantal van deze infecties blijft toenemen in de afgelopen decennia . C. trachomatis is gramnegatieve obligate intracellulaire bacterie. Twee vormen van C. trachomatis kunnen in zijn ontwikkelingscyclus worden gevonden. Gehechtheid van elementaire lichamen (EBs) aan gastheercellen bemiddelt de invasie van C. trachomatis. Binnen de gastheercellen, vormt C. trachomatis de netlichamen (RBs) en dan repliceert RBs binnen het cytoplasmic vacuole en tenslotte vormt de opneming .
Chlamydia kan zonder symptoom lange tijd in de baarmoederhals aanhouden. De infectie kan spontaan verdwijnen zonder behandeling of cervicitis veroorzaken. De klaring van C. trachomatis vereist de reacties van th1 immuniteit . De reacties van adaptieve immuniteit kunnen echter een tweesnijdende aard hebben en weefselschade veroorzaken. De behandeling van C. trachomatis infectie is gebaseerd op de behandeling van de patiënten en hun seksuele partners met macroliden. Het misbruik van antibiotica en vals-positieve diagnose kan bijdragen tot de opkomst van antibiotica-resistente organismen. De antibiotica-resistente bacteriën, aan de andere kant, leiden tot het falen van de behandeling . Na behandeling met het antibioticum, 10% -20% van de patiënten zal lijden aan herinfectie binnen een jaar, wat kan te wijten zijn aan de afwezigheid van beschermende immuniteit tegen Chlamydia . Gezien deze omstandigheden moeten alternatieve strategieën worden ontwikkeld.
traditionele Chinese geneeskunde (TCM) heeft een lange geschiedenis in de behandeling van gynaecologische ziekten . Feilin Vaginale Gel (FVG) is ontwikkeld uit een klinisch gebruikte Chinese medicijnformule die wordt gebruikt om de mucopurulente cervicitis te behandelen. FVG bestaat uit de volgende kruidengeneesmiddelen: Gentianae radix et rhizoma, Stemonae radix, fraxini cortex, Paeoniae radix rubra, Dictamni cortex, en Glycyrrhizae radix et rhizome. Volgens de theorie van TCM: FVG kan worden gebruikt om de accumulatie van vocht en toxische materialen veroorzaakte abnormale vaginale afscheiding, zoals overvloedig, fetid en geelachtige leukorroe, jeuk, en pijn rond de externe genitaliën te behandelen . De extractie, bereiding en kwaliteitscontrole van FVG werden bestudeerd. De concentraties van gentiopicroside en paeoniflorine in FVG werden geanalyseerd op respectievelijk ongeveer 5,90 mg/g en 8,96 mg/g .
in deze studie hebben we de hypothese getest dat FVG cervicitis effectief kan behandelen. Er werden cervicitismodellen bij muizen vastgesteld om de behandeling van FVG te evalueren. In het C. trachomatis geïnfecteerde muismodel werden de bacteriële belasting, het pathologische letsel en de niveaus van MCP-1, IL-2 en IL-17 in serum geëvalueerd. De insluitsels in HeLa-cellen veroorzaakt door C. trachomatis werden in vitro opgesomd. Bovendien werd de behandeling van FVG na besmetting met het mengsel van Escherichia coli en Staphylococcus aureus geëvalueerd door middel van histologisch onderzoek van de baarmoederhals.
2. Materialen en methoden
2.1. Bereiding van FVG
de zes kruidengeneesmiddelen werden driemaal geëxtraheerd met kokend water en neergeslagen met alcohol tot 70% (v/v) ethanol. De bovenstaande vloeistof werd met de rotatieverdamper geconcentreerd tot een relatieve dichtheid van 1,30-1,35 (50°C) om de Feilin-extractie (FE, 5,62 g/g) te verkrijgen. De gelbasis was het mengsel van carbopol 941 en xanthaangom. De extractie werd gemengd met de gelbasis om FVG te krijgen. De geneesmiddelbelasting van FVG was 2,5 g/ g, 1,25 g/g en 0,625 g/g.
2,2. Bacteriestammen en gastheercel
Chlamydia trachomatis mouse pneumonitis stam Nigg II (ATCC® VR-123™), Escherichia coli (ATCC® 25922™), en Staphylococcus aureus (ATCC® 25923™) werden verkregen uit de American Type Culture Collection. E. coli en S. aureus werden gekweekt in voedingsbouillon. Menselijke baarmoederhals epitheliale cellijn HeLa (ATCC® CCL-2™) werd gekocht van de Kweekcollectie van de Chinese Academie van Medische Wetenschappen en gekweekt in RPMI 1640 medium met 10% FBS bij 37°C in aanwezigheid van 5% CO2. C. trachomatis N werd gekweekt in HeLa-cellen. Vóór de infectie werden geïnfecteerde HeLa-cellen (105 cellen/mL) verstoord en gecentrifugeerd. Het supernatant werd verzameld om gezuiverde elementaire lichamen (EBs) te krijgen, die kunnen worden gebruikt om muizen en HeLa cellen direct te infecteren.
2.3. Dierinfecties en behandeling
120 vrouwelijke BALB/c muizen (18-20 g) werden gekocht bij Charles River Laboratories China (Beijing, China). Dieren werden gehuisvest in een bsl2 barrière dier faciliteit. Alle dierlijke experimentele procedures hier beschreven waren door de toestemming van Institute Of China Academy of Chinese Medical Sciences, Chinese Materia Medica, Ethic Committee. Het referentienummer van de ethische goedkeuring is 20162019.
het baarmoederhals weefsel van BALB/c muizen was verwond met een gebogen naald onder verdoving. Muizen werden vervolgens geïnoculeerd met 50 µL C. trachomatis N of het mengsel van E. coli en S. aureus (109 CFU/mL). De muizen werden eenmaal per dag geïnfecteerd en gedurende drie dagen herhaald. 24 uur na de laatste infectie werd de FVG toegediend in de muisvagina met behulp van een pipet (het volume van de FVG werd zorgvuldig onder controle gehouden) met een dosis van 2,2 g/kg, 1,1 g/kg en 0,55 g/kg gedurende 12 dagen. Policresulen zetpillen (PS), als positieve controle, werd gemengd met gelbasis en toegediend in een dosis van 16,5 mg/kg gedurende 12 dagen. De controlegroep en de modelgroep kregen een gelijk volume gelbasis. Op de,, en dag van de behandeling, werd het baarmoederhalsslijm verzameld met het uitstrijkje. Op dag 15, werden muizen verdoofd, bloedmonsters werden genomen van aorta ventralis en het serum werd gescheiden. Muizen werden vervolgens gedood door cervicale dislocatie onder verdoving en de baarmoederhals en vagina werden verwijderd. Het schema van de experimentele tijd werd weergegeven in Figuur 1.
2.4. ELISA analyse van C. trachomatis N, IL-2, IL-17 en MCP-1
de swabs met cervicale slijm werden gedispergeerd met een gelijk volume PBS, het niveau van C. trachomatis N in PBS werd geanalyseerd met een enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit (Meilian, Shanghai, China) volgens de instructies van de fabrikant (voeg 50 µL monster en 50 µL van de detectie antilichaam aan elke well en incubeer bij 37°C gedurende 1 uur; wassen van de putten, voeg 100 µL van de HRP toegevoegd aan elke well en incubeer bij 37°C gedurende 0,5 uur; wassen van de putten, voeg 50 µL van chromogenic substraten aan elke well, en incubeer bij 37°C gedurende 0,5 uur; voeg 50 µL van de stop-oplossing voor elk goed; lees de absorptie van elke goed bij 450 nm). De niveaus van IL-2, IL-17 en MCP-1in serum werden bepaald door ELISA kit (Meilian, Shanghai, China) volgens de instructies van de fabrikant zoals hierboven beschreven.
2.5. RT-PCR analyse van C. trachomatis n
totaal RNA werd geëxtraheerd uit de baarmoederhals met behulp van TRIzol (Invitrogen, Californië, USA); de expressie van doelgenen werd geanalyseerd met behulp van één stap SYBR Prime Script RT-PCR Kit II (TaKaRa, Beijing, China) met Piko Real 96 (Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, USA). De primers werden als volgt gebruikt: 16S rRNA forward primer, 5 ‘- ACC CGT TGG ATT TGA GCG TA-3’; 16S rRNA reverse primer, 5 ‘- GTT GAG CCC CGA GAT TTG AC-3′; GAPDH forward primer, 5′-GCT GAG TAT GTC GTG GAG T-3′; GAPDH reverse primer, 5′-GTT CAC ACC CAT CAC AAA C-3’. De relatieve expressie van het C. trachomatis n-gen en het muizengen werd berekend volgens de methode.
2.6. Histologisch onderzoek
de weefsels van muizen werden gefixeerd met 10% formaldehyde, vervolgens ingebed in paraffine en in plakjes gesneden voor hematoxyline en eosine kleuring. De secties werden visueel geëvalueerd door Dmlb (Leica Camera AG, Wetzlar, Duitsland); uit elk monster werden twee secties voorbereid. De volgende criteria werden toegepast om de pathologische veranderingen te beoordelen.
“-” Cervix-en vagina-epitheel vertonen geen hyperplasie en geen ontsteking en weefsels zijn normaal.
“+” Cervix en vagina-epitheel hebben lichte hyperplasie; bindweefsel heeft lichte segmentale ontsteking.
“++” baarmoederhals en vagina-epitheel hebben hyperplasie; bindweefsel werd geïnfiltreerd door ontstekingscellen.
“+++” Cervix en vagina-epitheel hebben significante hyperplasie en waren infiltratie van ontstekingscellen; bindweefsel werd omgeven door diffuse ontsteking en vasculaire congestie.
2.7. Gastheercelinfectie en Inclusievlek
HeLa-cellen werden gezaaid in 6-putplaten met een dichtheid van 2 × 105 cellen/put en gedurende 48 uur gekweekt. vervolgens werden de cellen geïncubeerd met C. trachomatis n EBS bevatte medium. De plaat werd gecentrifugeerd bij 32°C gedurende 1 uur en continu gekweekt bij 37°C in aanwezigheid van 5% CO2 gedurende 2 uur. het medium van geïnfecteerde cellen werd vervangen door FE (500, 250 en 125 µg/mL) bevat medium en geïncubeerd gedurende nog eens 48 uur. Daarna werden de cellen gewassen met PBS, gefixeerd met methanol en gekleurd met Giemsa. De insluitsels in HeLa cellen werden gevangen door Ix71 (Olympus, Tokyo, Japan) en opgesomd.
2.8. Statistische analyse
statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van GraphPad Prism v. 6 (GraphPad Software, California, USA). Alle gegevens werden normaal verspreid (Kolmogorov-Smirnov test). Het inclusieaantal en de histologische scores werden geanalyseerd met de Mann-Whitney u-test; andere werden geanalyseerd met de ongepaarde t-test. Een waarde van p < 0,05 werd als significant beschouwd.
3. Resultaten
3.1. FVG remt de concentratie van C. trachomatis N in cervicaal slijm
EBs van C. trachomatis kiemen en vormen de RBs na het binnendringen van de gastheercellen. De RBs beginnen te vermenigvuldigen na 7-21 dagen. Enzyme immunoassay is een veelgebruikte noncultuurmethode om de chlamydiale infectie te diagnosticeren . We analyseerden het niveau van C. trachomatis N in cervicale slijm om de ernst van muizen infectie te evalueren.
in het vroege stadium van C. trachomatis n infectie werd geen significante verandering van de bacteriële belasting waargenomen. 10 dagen na de eerste infectie, de toename van C. trachomatis N bij muizen kon worden getest. Op die dag was het niveau van de bacteriële belasting significant hoger dan de controlegroep (Figuur 2(a)). Met de opeenvolgende behandeling van FVG (2,2, 1,1, 0,55 g/kg) kon het niveau van C. trachomatis N in muizen cervicaal slijm sterk worden geremd op dosisafhankelijke manieren(figuren 2(c) en 2 (d)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d)
3.2. FVG remt de belasting van C. trachomatis N in Cervix
bij de diagnose van chlamydiale infectie is de nucleïnezuuramplificatietechniek, waaronder de polymerasekettingreactie (PCR), gevoeliger en specifieker dan de enzymimmunoassay . Daarom hebben we de belasting van C. trachomatis N bij muizen cervix verder getest met de RT-PCR methode. Op dag 15 was de expressie van 16S rRNA van C. trachomatis N bij muizen significant hoger dan in de controlegroep (Figuur 3). Behandeling van FVG (2,2, 1,1 g / kg) gedurende 12 dagen kan de belasting van C. trachomatis N in de baarmoederhals sterk remmen (Figuur 3).
3.3. FVG vermindert de C. trachomatis n-geïnduceerde Cervicitis en Vaginitis
de infectie van C. trachomatis bij muizen is een geschikt model voor het bestuderen van infecties van de geslachtsorganen. De infectie niet in slaagt om ernstige bovenste tractus genitale pathologie veroorzaken . De pathologie van baarmoederhals en vagina werd geanalyseerd om de ernst van C. trachomatis n infectie te karakteriseren.
zoals in Figuur 4 wordt getoond, waren in de controlegroep de epitheelcellen en het bindweefsel van de baarmoederhals normaal, er werd geen hyperplasie of ontsteking waargenomen. In de modelgroep, cervix epitheliale lagen hebben hyperplasie en de ontstekingscellen werden geïnfiltreerd in het epitheel en bindweefsel. Na de behandeling van FVG (1,1 g/kg) kon het pathologische letsel aan de baarmoederhals significant worden verminderd (Figuur 4).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
zoals blijkt uit Figuur 5 was in de controlegroep het vaginale epitheel normaal, er werd geen hyperplasie of ontsteking waargenomen. In de modelgroep, vaginale epitheel lagen hebben hyperplasie en de inflammatoire cellen werden geïnfiltreerd in het epitheel weefsel. Na de behandeling van FVG (2,2, 1,1 g/kg) kan het letsel aan de vagina aanzienlijk worden verminderd (Figuur 5).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
3.4. FVG vermindert de Serumcytokinerespons van C. trachomatis n infectie
de cytokines kunnen na de infectie met C. trachomatis door de epitheliale cellen en immuuncellen vrijkomen, waarvan de meeste afkomstig zijn van Th1-cellen. Deze cytokines dragen bij aan de immuunreacties, maar veroorzaken de pathologische schade . De cytokinespiegels in serum werden getest om de resultaten van het histologisch onderzoek te ondersteunen. Op de dag, de niveaus van IL-2, IL-17, en MCP-1 werden aanzienlijk upregulated (Figuur 6). Drie doses FVG konden de afgifte van IL-17 en MCP-1 effectief remmen. De productie van IL-2 kon door FVG bij lage doses (1,1 en 0,55 g/kg) worden verlaagd.
(a)
b)
(c)
(a)
(b)
(c)
3.5. FVG vermindert de N-geïnduceerde Inclusietelling van C. trachomatis in Vitro
de proliferatie van C. trachomatis vindt plaats in de gastheercellen met de vorming van RBs. Inclusie kan worden gevormd ongeveer 12 uur na infectie, die aantallen RBs bevat . De in vitro remming van FVG op de infectie van C. trachomatis N werd geëvalueerd met het aantal inclusie. Nadat HeLa-cellen gedurende 48 uur werden geïncubeerd met C. trachomatis N, konden insluitsels worden waargenomen met de Giemsa-vlek. Na behandeling met FVG (FE) werd het aantal inclusie op dosisafhankelijke wijze significant verlaagd (Figuur 7).
3.6. FVG vermindert de pathologische schade aan de baarmoederhals veroorzaakt door E. coli en S. aureus
, hoewel C. trachomatis wordt gerapporteerd om de gemeenschappelijkste ziekteverwekker van cervicitis te zijn, anaëroben zoals E. coli, S. aureus, en Klebsiella pneumoniae kunnen in de cervicitispatiënten worden geïsoleerd . Een rat cervicitis model geïnfecteerd door het mengsel van E. coli, S. aureus, en N. gonorroe was vastgesteld in ons vorige werk . In het huidige onderzoek werd een muismodel dat geïnfecteerd was door het mengsel van E. coli en S. aureus geoptimaliseerd. 14 dagen na de eerste infectie bleek de baarmoederhals ernstig geïnfecteerd te zijn.
in de controlegroep was het cervicale epitheel normaal en werd geen hyperplasie of ontsteking waargenomen. In de modelgroep, binnenste lagen van cervicale epitheel hebben hyperplasie, en de ontstekingscellen (neutrofiel en eosinofiel) werden ernstig geïnfiltreerd in het epitheel weefsel. Na de behandeling van FVG (2,2 en 1,1 g/kg) kon de ontsteking van de baarmoederhals significant worden geremd (Figuur 8).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
4. Discussie
de diagnose van cervicitis is moeilijk vanwege het ontbreken van het voor de hand liggende symptoom. Bij sommige patiënten konden abnormale mucopurulente afscheiding en cervicale ectopie worden waargenomen . Veel zoogdiermodellen van cervicitis waren in de laatste decennia vastgesteld. Makaken, ratten, en muizen kunnen worden gebruikt om de cervicitis model vast te stellen. Zowel bacteriën (C. trachomatis) als chemische verbindingen (fenol, azijnzuur) kunnen worden gebruikt om cervicitis te induceren . In dit onderzoek werden twee muismodellen geoptimaliseerd. Na infectie met C. trachomatis N, de bacteriële belasting van C. trachomatis N in cervicale slijm werd continu verhoogd in de tijd. De C. trachomatis n infectie kan leiden tot de upregulation van cytokines in serum en de ontsteking in de weefsels van vagina en baarmoederhals. Na infectie met het mengsel van E. coli en S. aureus, kon de verwonding van cervix in pathologische diagnose worden ontdekt.
klinisch waren antibiotica de eerste keuze om cervicitis te behandelen volgens verschillende pathogenen. Maar de opkomst van antibioticaresistente zoals de quinolone-resistente C. trachomatis en N. gonorroe, methicilline-resistente S. goudhoudende, en vancomycine-resistente E. coli wordt een ernstig probleem wereldwijd toe te schrijven aan het misbruik van antibiotica . De TCM kan bijdragen aan alternatieve strategieën voor de behandeling van cervicitis. De effecten van FVG op cervicitis werden in dit onderzoek getest.
FVG is een vaginale gel waarvan de gelbasis bestaat uit een mengsel van carbopol 941 en xanthaangom . In de afgelopen jaren zijn veel commerciële vaginale gelpreparaten van Chinese kruidenformule gebruikt om cervicitis te behandelen . De vaginale druglevering is een traditionele mucosale drugleveringsroute, die voor de behandeling van zowel lokale als systemische ziekten kan worden gebruikt . Traditionele preparaten, zoals zetpillen, gels, tabletten, vaginale films, irrigaties en pessaria kunnen worden gebruikt als vaginale formuleringen . Als één van de wijdst gebruikte systemen van de druglevering, zijn vaginale gels gebruikt voor de voorbereiding van microbiciden, contraceptiva, arbeidsinductoren, en geslachtshormonen. Het vergelijken met andere systemen van de druglevering, is de vaginale gel veiliger en heeft hogere biologische beschikbaarheid .
alle zes kruidengeneesmiddelen in FVG kunnen worden gebruikt bij de behandeling van gynaecologische aandoeningen bij TCM . Volgens de theorie van TCM is de Gentianae radix et wortelstok in deze formule het “monarchdrug” of “hoofddrug”, de Stemonae radix en Fraxini cortex zijn de “ministeriële drug” of “assistent drug”, de Paeoniae radix rubra en Dictamni cortex zijn de “adjuvante drug”, en de Glycyrrhizae radix et wortelstok is de “leidende drug”. De Gentianae radix et wortelstok kan het meest bijdragen aan de effecten van FVG. Iridoiden en totale glucosiden van pioenroos worden voornamelijk geïsoleerd uit respectievelijk Gentianae radix et rhizoma en Paeoniae radix rubra. Deze verbindingen vertonen significante ontstekingsremmende effecten . Alkaloïden en limonoïden dragen bij aan de antibacteriële activiteit van de Dictamni cortex . De coumarinen in de fraxini cortex en de flavonen in Glycyrrhizae radix et wortelstok vertonen antibacteriële en ontstekingsremmende effecten . De alkaloïden dragen bij aan de insecticide activiteit van Stemonae radix . Deze bioactieve verbindingen van deze kruidengeneesmiddelen kunnen de behandeling van FVG op cervicitis ondersteunen.
IL-17 wordt geproduceerd door Th17-cellen. Klinisch is de concentratie van IL-17 in genitale secreties van met C. trachomatis geïnfecteerde patiënten significant hoger dan die van niet-geïnfecteerde vrouwen . Het hoge niveau van IL-17 in het muis cervicitis model was in overeenstemming met het klinische resultaat. De niveaus van IL-2 en MCP-1 worden geassocieerd met de reacties van Th1. IL-2 wordt uitgescheiden uit Th1-cellen en stimuleert de aanmaak van cytokines. Er is een omgekeerde correlatie tussen het niveau van MCP-1 en de th1 responsen. De remming van MCP-1 kan de productie van IFN-γ verhogen . De FVG kon de concentraties van IL-2, IL-17 en MCP-1 verlagen. Deze resultaten suggereerden dat FVG de cervicitis zou kunnen remmen door de regulering van de immuunresponsen van de gastheer.
vroeg in de C. trachomatis infectiecyclus stelt het type III secretiesysteem EBs in staat de gastheercellen binnen te dringen . De internalisering van C. trachomatis wordt gevolgd door de ontwikkeling van RBs en inclusies. De inhibitor van type III secretiesysteem kon de vorming van insluitsels blokkeren . Het in vitro onderzoek toonde aan dat FVG het aantal inclusie in HeLa-cellen kan remmen.
tot slot hebben we met succes twee cervicitismodellen bij muizen vastgesteld met de infectie van C. trachomatis N, S. aureus en E. coli. We hebben bewezen dat FVG de cervicitis aanzienlijk kan remmen. FVG kon de bacteriële lading downreguleren, het pathologische letsel verzachten en het aantal inclusie verminderen. De effecten van FVG werden geassocieerd met de remming van pathogenen en de regulatie van de immuunrespons van de gastheer. Dit onderzoek levert bewijs dat FVG kan worden gebruikt als een nieuwe alternatieve agent die het probleem van antibioticaresistente tijdens de behandeling van cervicitis verlicht.
beschikbaarheid van gegevens
de gegevens die worden gebruikt ter ondersteuning van de bevindingen van deze studie zijn opgenomen in het artikel.
belangenconflicten
De auteurs hebben geen belangenconflicten met betrekking tot dit werk.
bijdragen van auteurs
Xin Mao en Ronghua Zhao droegen eveneens bij aan dit werk.
bevestigingen
deze studie werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (nrs. 81773977 en 81774204).
