cDNA Cloning

Reverse transcriptie van RNA naar complementair DNA (cDNA) is de eerste stap in vele moleculaire biologie workflows, waaronder genexpressie studies met behulp van real-time PCR, gen cloning en in de creatie van cDNA bibliotheken.

een cDNA-bibliotheek is een verzameling gekloonde DNA-sequenties die complementair zijn aan het mRNA dat uit een bepaalde cel of weefsel is geëxtraheerd. De bibliotheek vertegenwoordigt slechts de getranscribeerde opeenvolgingen binnen een specifieke steekproef en kan een schat aan informatie over de identiteit en de functionaliteit van specifieke genen verstrekken. cDNA de bibliotheken verstrekken ook inzicht in de overvloed van RNA in een steekproef wordt geproduceerd omdat meer een mRNA wordt uitgedrukt, zal meer cDNA worden geproduceerd.

bij het construeren van cDNA-bibliotheken is het essentieel dat de cDNA-klonen representatief zijn voor de oorspronkelijke RNA-populatie, zowel in termen van hun volledige lengte als relatieve abundantie. Dit betekent dat de keuze van omgekeerde transcriptase die in deze stap wordt gebruikt van cruciaal belang is. Wanneer het klonen van cDNAs en het creëren van cDNA bibliotheken adviseren wij onze ultrascript en UltraScript 2.0 waaier van producten. Deze zeer actieve en thermostabiele enzymen zijn in staat meer cDNA-product van volledige lengte te synthetiseren, zelfs met beperkte hoeveelheden RNA, RNA uitgedrukt in lage niveaus of met een hoge graad van secundaire structuur.