Transkripsjonsfaktor-mediert kreftcelle omprogrammering: en pioner

siden behandling mot kreft tilbakefall, metastase og motstand forblir utfordrende i klinikker, har implementeringen av kreftgenterapi forblitt et blomstrende og krevende alternativ som kan overvinne slike vanskeligheter . Det er velkjent at godartede celler kan bli kreftceller etter en ondartet overgang, men om kreftceller kan være genetisk og epigenetisk reversert tilbake til en godartet fenotype, er fortsatt uklart . Transkripsjon faktor-mediert omprogrammering har nylig dukket opp som en in vitro tilnærming for å aktivere kreftceller til å hente godartede funksjoner.som tidligere diskutert, har iPSC-teknologi, som en sofistikert omprogrammeringstilnærming, ikke bare blitt utnyttet for å indusere en somatisk overgang fra terminalt differensierte somatiske celler til pluripotency, men har også blitt brukt til å generere CSCs for onkogen karakterisering . I tillegg har iPSC-teknologi også blitt hyppig brukt til å indusere omprogrammering fra kreftceller til pluripotente celler med godartet fenotype. I 2009 Ble Utikal et al. omprogrammerte humane melanocytter og mus melanomcellelinje til iPSCs med en godartet fenotype ved innføring Av Yamanaka-faktorer med effektivitet fra 0,05% til 0,1%. R545 melanomcellelinjeavledede iPSCs viste endogent uttrykk For Oct4, Klf4 og c-Myc, demetylering Av Oct-4 OG NANOG-promotorer og tap av in vivo tumorigenicitet. Ved seponering av doksycyklin-induserbar lentiviral ekspresjon Av Yamanaka-faktorer ved seponering av doksycyklin, hadde musekimærer avledet fra de omprogrammerte melanomcellene opprettholdt benignitet og dannet ikke synlig tumor ved 5 måneders alder, noe som indikerer at de omprogrammerte cellene gjennomgikk normal differensieringsprosess for å produsere godartede celler in vivo.I 2010 Ble Miyoshi et al. fant at ekspresjonen av pluripotensassosierte gener, SOM NANOG, scenespesifikt embryonalt antigen-4 (SSEA-4), TRA-1-60 og TRA–1-81 ble forhøyet etter innføring Av Yamanaka-faktorer i bukspyttkjertel, lever og kolorektale kreftceller. Omprogrammering av reversert DNA og histonmetylering i spesifikke promotorregioner for å re-uttrykke pluripotensassosierte gener slik at de omprogrammerte kreftcellene var i stand til å utvikle mønstre som ligner på ektoderm, mesoderm og endoderm. Dessuten hadde de pluripotente kreftcellene høyere følsomhet overfor kjemoterapeutisk middel 5-fluorouracil (5-Fu), noe som førte til en potensiell klinisk betydning for å oppheve ervervet kjemo – / radioresistens via kreftcellerprogrammering. I tillegg var de omprogrammerte kreftcellene i stand til å skille seg i forskjellige linjer, inkludert epitel -, mesenkymale og nevronceller (kollektivt referert til som postpluripotente kreftceller). Post-pluripotente kreftceller var mindre maligne sammenlignet med foreldrekreftceller in vitro og var fri for tumorigent potensial basert på tumordannelsesanalyse hos NOD / SCID-mus. Imidlertid forblir omprogrammeringseffektiviteten fra kreftceller til pluripotente kreftceller lav, noe som tyder på at bare et mindretall av tumorceller kunne omprogrammeres til pluripotente kreftceller. Senere studier viste også at andre kombinatoriske transkripsjonsfaktorer, Som Lin-28 homolog (LIN28), Oct-4, SOX2 OG NANOG, også var i stand til å omprogrammere lungeadenokarsinom og gastrointestinal kreft i iPSCs med lindret tumorigenicitet og metastatisk potensial . Transkripsjonsfaktor-mediert omprogrammering kan videre styres av en rekke differensieringsassosierte faktorer for å danne funksjonelle celler av forskjellige linjer . Selv om en slik omprogrammering er mulig og etisk akseptabel for å reaktivere den post-epigenetiske tilstanden til kreftceller tilbake til en godartet pluripotent tilstand, forblir effektiviteten og sikkerheten til kreftcellerprogrammering mediert av transkripsjonsfaktorer en utfordrende oppgave som skal løses før den blir en lovende terapi for kreft .Kombinatoriske pluripotensassosierte transkripsjonsfaktorer har vist påvist evne til å omprogrammere kreftceller til uiPSCs med potensial til å differensiere ytterligere til normale celler. I tillegg har forskere nylig funnet ut at avstamningsspesifikke faktorer direkte kan omprogrammere kreftceller til funksjonelle somatiske celler ved å omgå pluripotentstadiet, noe som kan redusere risikoen for ondartet transformasjon av induserte pluripotente kreftceller .Breakpoint cluster region (BCR)-Abelson murine leukemi viral oncogen homolog 1 (ABL1)+ forløper b-celle akutt lymfoblastisk leukemi (B-ALL) er preget av blokkering Av b-celledifferensiering. Derfor har omprogrammering AV BCR – ABL1 + B-ALL i de ikke-leukemiske cellene blitt ansett som en utmerket strategi for å overvinne differensieringsblokaden . EN tidligere studie har vist AT CCAAT / enhancer-bindende protein alfa (C / EBPa), en transkripsjonsfaktor assosiert MED UTVIKLINGEN AV ALL, kan indusere en cellulær overgang fra murine b-stamceller til makrofager med omtrent 100% effektivitet . Dette tidligere arbeidet har ført til vurderingen av Om C / EBPa også kan brukes til å omprogrammere kreft Med B-cellelinjer til funksjonelle makrofager. I 2013, Rapino et al. vellykket omprogrammert humant lymfom og leukemi b cellelinjer til makrofaglignende celler ved innføring Av C / EBPa. Ifølge analysen av mer enn 20 humane lymfom-og leukemi b-cellelinjer, kan 80% av cellene delvis eller helt omprogrammeres til makrofaglignende celler. De omprogrammerte lymfoblastiske leukemi b-cellene viste mindre tumorigenisitet in vitro, med oppregulering av makrofagassosierte markører og nedregulering Av B-cellassassosierte markører. Eksperimenter i murine modeller bekreftet også at ingen svulst ble dannet etter injeksjon Av c / EBPa-infiserte lymfoide leukemiceller i immundefekte mus. Selv om flertallet av de analyserte lymfom-og leukemicellelinjene gjennomgikk omprogrammering i det minste delvis eller forbigående, opprettholdt bare to cellelinjer med et høyere endogent uttrykk For C/EBPa effektivt den cellulære overgangen til makrofaglignende celler, noe som indikerer suksessraten for kreftcellerprogrammering, sterkt avhengig av det endogene uttrykket Av C/EBPa .Tidligere studier har fokusert på å introdusere en enkelt nukleær transkripsjonsfaktor for å lindre tumorigeniciteten av ikke bare B-celle-assosierte maligniteter, men også hepatocellulært karsinom (HCC) . For å kunne omprogrammere kreftceller til celler med normale funksjoner, er det nødvendig for ulike nukleare transkripsjonsfaktorer å samarbeide . Hvorvidt det er en spesifikk formel for transkripsjonsfaktorer som effektivt kan indusere kreftovergang fra malignitet til benignitet med høy effektivitet og sikkerhet, er fortsatt unnvikende. Nylige fremskritt i enkeltcelle RNA-sekvensering har gjort det mulig for etterforskere å oppnå mer omfattende profilering i forskjellige kreftceller, og et økende antall transkripsjonsfaktorkandidater har blitt identifisert og karakterisert for å forbedre effektiviteten av kreftcellerprogrammering .

I 2014 Ble Huang et al. funnet at en kombinasjon av transkripsjonsfaktorer inkludert hepatocytt kjernefaktor 1 alfa (HNF1A), hepatocytt kjernefaktor 3 alfa (HNF3A) og forkhead box protein A3 (FOXA3) spilte en betydelig rolle i omprogrammering av humane fibroblaster i hepatocyttlignende celler. Så i 2019, Cheng et al. vist at kombinasjonen AV HNF1A, HNF4A og FOXA3 også kan indusere direkte omprogrammering AV HCC i hepatocyttlignende celler med normale funksjoner, inkludert albuminsekresjon, glykogensyntese, lipoproteinopptak med lav tetthet samt metabolismekontroll og avgiftning. I denne studien ble adenovirus brukt til å synergistisk introdusere HNF1A, HNF4A og FOXA3 i HCCLM3 og Huh7 cellelinjer. Basert på dens iboende hepatotropisme, sammenlignet med iPSC-omprogrammering, induserte adenovirusmediert infeksjon omtrent 100% HCC-celler for å uttrykke de valgte transkripsjonsfaktorene som signifikant forbedret infeksjon og omprogrammeringseffektivitet. De kombinatoriske transkripsjonsfaktorene induserte der-ekspresjon av hepatocyttassosierte gener og morfologiske endringer i BÅDE HCCLM3 Og Huh7 cellelinjer, noe som indikerer en samtidig effekt AV HNF1A, HNF4A og FOXA3 ved HCC-omprogrammering. Omprogrammerte hepatocytter viste gradvis økning av hepatocyttfunksjoner og tap av in vitro tumorigeniske egenskaper. For eksempel viste de omprogrammerte hepatocyttene FRA HCCLM3-cellelinjer en signifikant økning av albumin (ALB) – uttrykk og reduksjon av alfa-fetoprotein (AFP) – uttrykk. Resultatene fra kolonidannende analyse, migrasjonsanalyse og sfæroidformasjonsanalyse indikerte også at proliferasjons-og migrasjonsevnen, samt antall Lever-CSCs, ble redusert. Resultatene av cDNA microarray bekreftet at de omprogrammerte hepatocyttlignende cellene var genetisk lik primære humane hepatocytter. Murine modeller viste også at de omprogrammerte hepatocyttlignende cellene vesentlig mistet in vivo tumorigenicitet og var i stand til å rekonstruere leverstrukturen under regenerering. Videre ble epitelcelleadhesjonsmolekylet (EpCAM) + subpopulasjon i de omprogrammerte hepatocyttlignende cellene signifikant redusert, noe som tyder på at kreftcellerprogrammering via HNF1A, HNF4A og FOXA3 effektivt kunne eliminere CSCs for å forhindre tilbakefall av kreft, tilbakefall og motstand i HCC.

Transkripsjonsfaktor-mediert omprogrammering er basert på genetiske og epigenetiske modifikasjoner via spesifikk genlevering . Siden Yamanaka et al. vellykket utnyttet transkripsjonsfaktorene for å omprogrammere mus og humane fibroblaster i iPSCs, har omprogrammeringsteknikken blitt videreutviklet i utviklingen av potensielle kreftbehandlinger . Likevel forble kontroversen om transkripsjonsfaktor-mediert kreftcellerprogrammering . Flere studier har vist at omprogrammering fra kreftceller til pluripotente celler ikke alltid fører til positive effekter. For eksempel, på grunn av tilstedeværelsen av onkogener som c-Myc, KLF4 og SOX2, har pluripotente kreftceller sikkerhetsproblemer i onkogenese på grunn av avvikende differensiering . Videre har transkripsjonsfaktor-mediert kreftcellerprogrammering tilleggsbegrensninger når det gjelder kostnad, introduksjonseffektivitet og in vivo levering, noe som har hindret potensialet i klinisk oversettelse . Kreftinitiering og progresjon er primært relatert til genetiske mutasjoner og kompliserte epigenetiske vekslinger, inkludert mikrorna-regulering, DNA-metylering, histonmodifikasjoner og kromosomremodellering . Transkripsjonsfaktor-mediert kreftcellerprogrammering er sterkt involvert i disse komplekse molekylære nettverkene, og den underliggende mekanismen forblir stort sett uutforsket.

Små molekyl-mediert kreftcelle omprogrammering: en game-changer

ankomsten av transkripsjonsfaktor-mediert kreftcelle omprogrammering har gitt banebrytende resultater for å bevise muligheten for omprogrammering av kreft skjebner . Selv om transkripsjonsmediert kreftcellerprogrammering er allment anerkjent som en potensielt lovende strategi mot maligniteter, forblir sikkerhet og effekt bekymringer forårsaket av transgene modifikasjoner som en ikke-ubetydelig blokkering . De genetiske avvikene, som aktivering av onkogener eller demping av tumorsuppressorgener forårsaket av innføring av eksogene DNA-sekvenser, kan sette fremtidig klinisk oversettelse av kreftcellerprogrammeringsterapi i fare. Det har vært en alternativ tilnærming for å erstatte virusinfeksjonen med forbigående genlevering ved hjelp av spesialdesignede mikropartikler, men transkripsjonsfaktormediert kreftcellerprogrammering forblir risikabelt og teknisk utfordrende . Derfor er det et presserende behov for å etablere alternative strategier for å indusere effektiv kreftcellerprogrammering. Nylig har små molekyl-mediert kreftcelle-omprogrammering vist seg å være i stand til å omprogrammere terminalt differensierte celler til en pluripotent tilstand . Mer signifikant er det også flere studier som fremkaller at bruk av små molekyler for å indusere kreftcellerprogrammering fra malignitet til benignitet, kan omgå noen av begrensningene i transkripsjonsfaktor-mediert kreftcellerprogrammering .Små molekyl-mediert omprogrammering har klare fordeler, inkludert relativt lave kostnader, enkel teknikk, lett-tunable allsidighet, permeabilitet og reversibilitet . Små molekyler kan også tjene som en utmerket kandidat til effektivt å regulere cellulære prosesser via direkte målretting signalveier som Wnt, Pinnsvin, Og Flodhest veier . Det er praktisk å produsere små molekyler og skalere deres gjennomstrømning for å indusere omprogrammering med forskjellige linjer . Videre kan slike molekyler benyttes som molekylære prober for å undersøke de underliggende endringene i molekylær signalering under kreftcellerprogrammering, noe som kan føre til en forbedring i omprogrammeringseffektivitet og reduksjon av off-target-effekten . For at små molekylmedierte kreftcellerprogrammering skal lykkes, er det nødvendig å identifisere og utvikle små biokjemiske molekyler som kan hjelpe kreftceller til å overvinne epigenetiske barrierer og blokkeringer i ulike cellulære signalveier . Siden bruk av små molekyl-mediert kreftcelle omprogrammering uavhengig for å konvertere malignitet til benignitet er fortsatt utfordrende så langt, er det et begrenset antall studier i forlengelsesgrensen .

ved å introdusere C/EBPa, Rapino et al. vellykket omprogrammert humant lymfom og leukemi b-cellelinjer til makrofaglignende celler. Funnet fører til en teoretisk innsikt i om små molekyler også kan utøve effekter på omprogrammering av lymfoblastisk leukemi. I år 2015, McClellan et al. funnet at myeloide differensieringsinduserende cytokiner, inkludert fms-lignende tyrosinkinase ligand (FLT3L), interleukin 7 (IL-7), interleukin 3 (IL-3), granulocytt-makrofag kolonistimulerende faktor (GM-CSF), makrofag kolonistimulerende faktor (MCSF) og myeloide transkripsjonsfaktorer Som C/EBPa og PU.1 kunne effektivt omprogrammere primære humane BCR – ABL1 + B-alle celler til makrofaglignende celler. Etter 2 ukers eksponering for myeloide differensieringsinduserende cytokiner ble det funnet at 53% AV cd19+/CD34+ leukemiske blaster signifikant økte ekspresjonen AV CD14 og reduserte ekspresjonen AV CD19. CD14 + / CD19-subpopulasjonen ble sortert og renset for å gi > 98% makrofaglignende celler med stabilt CD14-uttrykk. De omprogrammerte cellene hadde makrofaglignende morfologi, overflateimmunfenotyper, genuttrykksprofil, generering av oksidativ burst og fagocytisk evne. Videre kan de omprogrammerte cellene betydelig lindre leukemogenicitet, manifestert av tap av evnen til å danne ondartede xenografter i dyremodeller. Resultatene kan føre til en mulig strategi som utnytter kreftcellerprogrammering for å behandle BCR-ABL1+ B-ALL in vivo. Likevel var resultatene generert fra leukemisk omprogrammering foreslått in vivo omprogrammering på et foreløpig stadium da underliggende genetiske avvik forårsaket av cytokininduksjon forblir uutforsket. Videre viste 5 av 12 kliniske tilfeller resistens mot CD14 + omprogrammering. Derfor er det uklart hvordan man prospektivt velger pasienter som vil ha nytte av leukemisk omprogrammering. Mer forskning innebærer å overvinne disse begrensningene før det kan bli en effektiv terapeutisk strategi mot b-celleassosierte maligniteter.

I år 2019, Ishay-Ronen et al. vellykket konvertert invasive brystkreftceller til funksjonelle adipocytter for å forhindre metastase via små molekyl induksjon av epitel-mesenkymal overgang (EMT) og re-differensiering. EMT ER en anerkjent omprogrammeringsprosess som kan forbedre cellulær plastisitet . Som tidligere vist, er omprogrammeringsprosessen for å generere pluripotente kreftceller vanligvis forbundet med potensialet for ytterligere å differensiere i forskjellige linjer med normale cellulære funksjoner via transkripsjonsfaktor eller småmolekylinduksjon . Dermed, Ishay-Ronen et al. indusert EMT ved å behandle Py2T-brystkreftceller med transformerende vekstfaktor-beta (TGF-β) in vitro og re-differensierte De omprogrammerte Py2T-cellene til funksjonelle adipocytter ved bruk av insulin, deksametason, rosiglitazon og benmorfogenetisk protein 2 (BMP2). Resultatene viste at De omprogrammerte Py2T-cellene kunne induseres til å gjennomgå adipogenese med en cocktail av små molekyler. Etter minst 20 dagers behandling MED tgf-β og adipogeneseinducerende faktorer, uttrykte De omprogrammerte Py2T-cellene med mesenkymale egenskaper signifikant høyere C / EBPa og CCAAT / enhancer-bindende protein beta (C/EBPß), som var regulatorer av adipogenese, sammenlignet med deres motstykker med epitelegenskaper. Den allsidige pluripotensen til de omprogrammerte brystkreftcellene ble bekreftet av andre mesenkymrelaterte differensieringer inkludert osteogenese og kondrogenese med påvisning av osteo-og kondrospesifikke markører som transkripsjonsfaktor Sp7 (Osterix), kollagen TYPE II og kjønnsbestemmende Region Y-boks 9 (SOX9). I tillegg brukte De MTflECad (epithelial) og Mtδ (mesenkymal) murine modeller for å teste effektiviteten og spesifisiteten TIL EMT-relaterte omprogrammering og re-differensieringsprosesser. In vitro tgf-β indusert omprogrammering og in vivo Cre rekombinase-mediert omprogrammering viste begge at omtrent 60% av brystkreftcellene uttrykte C / EBPa+. Resultatene bekreftet AT TGF-β spilte en viktig rolle i regulering AV EMT-relatert omprogrammeringsprosess og mesenkymale egenskaper hos kreftceller både in vitro og in vivo. Kombinatorisk behandling med trametinib og rosiglitazon i musemodellen førte dessuten til effektiv adipogenese in vivo av de omprogrammerte brystkreftcellene. Siden trametinib og rosiglitazon er AMERIKANSKE Food And Drug Administration (FDA)-godkjente legemidler for å indusere EMT og adipogenese, ved hjelp av dem som mediatorer i kreftcelle omprogrammering terapi er klinisk mer gjennomførbart i forhold til tilnærminger ved hjelp av andre mediatorer . De betydelige fordelene med denne studien er ikke bare for identifisering av de små molekylene i regulering av brystkreftcellerprogrammering og re-differensiering, men også for etablering av en replikerbar modell som kan utnyttes i evalueringen av kreftcellerprogrammering i mange andre typer kreft med forskjellige linjer. Eliminasjon av invasive mesenkymale kreftceller ved hjelp av små molekylmediert kreftcellerprogrammeringsterapi kan behandle ervervet kjemo – / radioresistens og kreftmetastaser, men spesifisiteten av trametinib pluss rosiglitazonbehandling og forebygging av bivirkninger bør undersøkes nærmere i senere studier .

som nevnt, under kreft celle omprogrammering, cellulær apoptose synes å være upåvirket av de små molekylene, som er celleproliferasjon. For Eksempel er tiden For g0/G1-fasen forlenget, og cellesyklusfremmende gener undertrykkes, noe som indikerer at forbedringen av benignitet har skjedd . Små molekyl-mediert kreftcelle omprogrammering gir en ikke-viral og ikke-integrert tilnærming for å indusere overgangen fra kreftceller til godartede celler. Som en av de potensielle strategier, slik omprogrammering tilnærming har stort løfte om å effektivt undertrykke utvikling og tilbakefall av ulike maligniteter.

så langt står fremskritt i kreftcellerprogrammering overfor mange utfordringer. For det første består noen typer kreft (som nasopharyngeal carcinoma) av en stor subpopulasjon av utifferentierte kreftceller, noe som gjør slike kreftceller vanskelig å bli omprogrammert til godartede celler på grunn av in situ tumor heterogenitet . Direkte omprogrammering kan være en potensielt mulig tilnærming som kan brukes på disse typer kreft, men det har ikke vært noen lovende bevis så langt . For det andre er det mange små molekyler som kan tjene som gode kandidater i kreftcellerprogrammering in vitro, men bare få av DEM har blitt offisielt godkjent AV USA FDA, siden hvert lite molekylært stoff må vurderes strengt basert på fordelene og potensielle risikoer for de tiltenkte pasientene . Fremtidige undersøkelser bør konsentrere seg om å utvikle farmakologiske midler-mediert kreftcelle omprogrammering for å minimere sikkerhet og effektivitet bekymringer. Videre er funksjonene til små biokjemiske molekyler ikke tilstrekkelig spesifikke, noe som tyder på at potensielle off-target-effekter noen ganger kan skje under omprogrammering . I tillegg bør doseringen av små molekyler for å indusere in vivo kreftcellerprogrammering og differensiering undersøkes nøye for å unngå potensielt skadelige bivirkninger hos pasienter. Derfor er det presserende å nøyaktig dechifisere molekylære mekanismer for kreftcellerprogrammering for å lindre bivirkningene. Det anser for å være nødvendig å bruke en effektiv leveringsmetode for omprogrammering-assosierte små molekyler siden mange behandlingssvikt ikke har resultert fra ineffektiviteten av stoffene selv, men ineffektiviteten av medikamentlevering .

MicroRNA og exosome-mediert kreftcelle omprogrammering: nye alternativer

det har blitt rapportert at microRNAs, inkludert miRNA302s, miRNA200c, miRNA369, miRNA34a og miRNA30b , er avgjørende for å forbedre uttrykket av pluripotency-assosierte gener. MicroRNA har blitt ansett som nyttige biomarkører og molekylære prober for å målrette bestemte celletyper og for å manipulere cellerprogrammering. Men for å nøyaktig og effektivt regulere celleovergang for å behandle maligniteter ved å utnytte microRNA, er det fortsatt utfordrende så langt.

Lin Et al. først viste at menneskelige hudkreftceller kunne omprogrammeres til iPSCs ved hjelp av microRNA-302s, som er rikelig uttrykt i menneskelige ESCs, men raskt forsvant etter differensiering. Det har blitt rapportert at pluripotente kreftceller med microRNA-302s transfeksjon viser redusert tumorigenisitet, genomisk demetylering og forhøyede uttrykk FOR SSEA-3/4, SOX2, NANOG Og Oct-3/4. Siden størrelsen på microRNA-302s bare var omtrent 1 kb, nådde transfeksjonseffektiviteten > 99% basert på flowcytometrianalyser, noe som tyder på at størrelsen på en eksogen faktor spilte en viktig rolle i transfeksjonseffektiviteten . Imidlertid ble bare 2% -5% av kreftcellene vellykket omprogrammert til pluripotente ES-lignende celler. Genekspresjonsanalyse viste at de pluripotente ES-lignende cellene viste mer enn 86% likhet med humane ES-cellelinjer H1 og H9. Under avstamningsspesifikke differensieringsinduserende medier differensierte kreftavledede ES-lignende celler videre til godartede celler, inkludert nevroner, kondrocytter og fibroblaster. MicroRNA – 200 familien har også vist seg å forbedre EMT via målretting sink finger e-box-bindende homeobox 1 (ZEB1) aksen, som er kjent for å hemme tumor suppressor genet E-cadherin . I humane kolonkreftceller har medlemmer som tilhører microRNA34-familien blitt bevist som nye transkripsjonsmål for tumorsuppressorgen p53 .

Eksosomer har evnen til å havne komponenter som etterligner konstitusjonen til det embryonale mikromiljøet . ESC-relaterte omprogrammeringsfaktorer er innkapslet i humane ESC-avledede eksosomer og kan leveres til kreftceller for å indusere overgangen fra malignitet til benignitet. I 2017, Zhou et al. vist at humane ESC-avledede eksosomer kan hemme kreftproliferasjon in vitro og lindre tumorigenisitet in vivo. Når Colo-320 og MCF-7 kreftcellelinjer ble dyrket I ESC-betinget medium, viste de re-uttrykk for pluripotency-assosierte markører, inkludert Oct-4, NANOG OG SOX2 og reduksjon av tumorigenicitet in vitro, noe som indikerer vellykket omprogrammering fra malignitet til benignitet. Omtrent 90% av brystkreftcellene mistet Vimentin-ekspresjon etter eksponering for ESC-betinget medium, mens omprogrammeringseffektiviteten til kolorektale kreftceller ikke ble bestemt. Resultatene antydet at eksosomer kunne undertrykke onkogenese ved å fremme uttrykksnivåene av kritiske pluripotensassosierte markører. Etter det kunne kreftceller gå tilbake til en pluripotent status og gjenopprette godartede differensieringsveier. DE KREFTAVLEDEDE ES-lignende cellene var imidlertid ikke fri for tumordannelse in vivo, og 60% reduksjon i tumorstørrelse ble observert med kreftceller behandlet med escs-avledede eksosomer. Betinget medium inneholdende eksosomer hemmet kreftproliferasjon via forlengelse av tiden I g1-fase, mens senking av tiden I s-og G2/m-faser. Zhou et al. det ble også funnet at ekspresjonsnivået for cyklin D1 ble redusert for å opprettholde retinoblastomhypofosforylering etter behandling av kondisjonert medium, noe som førte til hemming Av G1/s faseovergang . Videre ble fosforylering ved serinrest 10 i histon H3, som en av de vitale epigenetiske modifikasjonene under G2-fasen, signifikant redusert . I samsvar med tidligere funn har ulike stoffer fra humant embryonalt mikromiljø potensial til å hemme kreftprogresjon og lindre tumorigenisitet in vivo .