3.8 CARD11-mangel
Caspase recruitment domain 11 (CARD11), også kjent som caspase recruitment domain membrane-associated guanylate kinase protein 1 (CARMA1) er medlem av en familie av membrane – associated guanylate kinaser, og fungerer som et stillaseprotein som letter dannelsen av makromolekylære komplekser som integrerer TCR-og BCR-mediert signalering og fremmer aktivering av KANONISK nf-kb Signalvei (Bertin Et al., 2001). Det er hovedsakelig uttrykt i hematopoietisk og lymfoid vev, som milt, tymus og perifere leukocytter (Bertin et al., 2001). Etter antigen-reseptorengasjement og aktivering AV plc-γ, omdannes fosfatidylinositol 4,5-bisfosfat (PIP2) til inositol 1,4,5-trisfosfat (InsP3) og diacylglycerol (DAG). Sistnevnte aktiverer proteinkinase C (PKC)-β i B-lymfocytter og PKC-θ i T-lymfocytter. PKC fosforylerer linker regionen CARD11 (Matsumoto et al., 2005; Sommer et al., 2005), induserer konformasjonsendringer som gjør DET MULIG FOR CARD11 å knytte Seg Til B-cellelymfom 10 (BCL10) og slimhinneassosiert lymfoidvevslymfomtranslokasjonsprotein 1 (MALT1) (McCully & Pomerantz, 2008). CARD11-BCL10-MALT1 (CBM) – komplekset rekrutterer tumor nekrose faktor reseptor-assosiert faktor 6 (TRAF6) protein, som aktiverer IkB kinase (IKK) – komplekset som fosforylerer inhibitoren IkBa, noe som resulterer i fosforylering og allestedsnærværende. Dette frigjør underenheter AV NF-kB Fra IkBa. NF-kB dimerer kan således translokere til kjernen og binde seg til konsensussekvenser av målgener og derved formidle deres transkripsjon (Fig. 4.2). SPESIELT BINDER CARD11 seg til den regulatoriske underenheten IKK-γ (også kjent SOM NF-kB essential modulator, NEMO) (Stilo et al., 2004) og modulerer sin polyubiquitinering etter antigen-reseptor stimulering (Shambharkar et al., 2007). Denne modifikasjonen er viktig for IKK kinase aktivitet (Shambharkar et al., 2007).
EN ROLLE FOR CBM-komplekset i immunfunksjon og homeostase ble videre demonstrert når SOMATISKE gevinst-av-funksjon mutasjoner AV CARD11, og kromosomale translokasjoner som involverer BCL10 OG MALT1 ble identifisert hos pasienter med diffus stort b-cellelymfom OG MALTLYMFOM (Shaffer, Young, & Staudt, 2012). Interessant, innføring AV CARD11 punkt mutasjoner funnet i lymfom i antigen-aktivert modne b-lymfocytter i mus bestemt en bryter fra selv-antigen-indusert b-celledød Til t-celle-uavhengig proliferasjon, noe som indikerer AT CARD11 fungerer også som en modulator Av b-celletoleranse (Jeelall et al ., 2012).
mer nylig har biallelisk tap av funksjon mutasjoner AV CARD11 blitt identifisert hos pasienter med kombinert immunsvikt. Stepensky et al. har beskrevet en 13 måneder gammel kvinnelig spedbarn, født av consanguineous foreldre, som presenterte med tilbakevendende infeksjoner, inkludert P. jiroveci lungebetennelse, og progressiv panhypogammaglobulinemi (Stepensky et al., 2013). Tilsvarende, Greil et al. rapportert tilfelle av en 6 måneder gammel kvinne født til consanguineous foreldre, som presenterte Med P. jiroveci lungebetennelse, og agammaglobulinemia (Greil et al., 2013). Begge pasientene hadde et normalt antall T-og B-lymfocytter i periferien, med et polyklonalt tcr-repertoar og bevarte nivåer av TRECs og kappa-reseptoreksisjonskretser, noe som indikerte at generering Av T-og B-lymfocytter ikke ble påvirket. Imidlertid Var b-celler umodne, med en økt andel av overgangs b-lymfocytter (Greil et al., 2013; Steffen et al., 2013). Videre uttrykte både naï og overgangs b-lymfocytter lavere mengder b-celleaktiverende faktorreseptor (BAFF-R) (Stepensky et al., 2013). I begge tilfeller ble det identifisert signifikante abnormiteter I t-cellekammeret. Spesielt hadde begge spedbarnene markert redusert antall sirkulerende Treg-celler. In vitro proliferasjon av T-lymfocytter til oppløselig anti-CD3 ble avskaffet. Stimulering Av T-og b-lymfocytter med PMA og ionomycin resulterte i defekt IkBa-degradering, redusert p65-fosforylering og nukleær translokasjon og svekket cytokinproduksjon sammenlignet med det som ble observert i friske kontroller. Videre produserte T-lymfocytter aktivert in vitro med PMA og ionomycin, eller med oppløselig anti-CD3/CD28, reduserte mengder IL-2, og klarte ikke å oppregulere ekspresjon AV ICOER, CD25 og OX40. Tilsvarende førte stimulering Av b-lymfocytter med anti-IgM til redusert ekspresjon AV CD25 og ICAM-1 sammenlignet med kontroller (Greil et al ., 2013; Steffen et al., 2013). Disse dataene var sterkt indikative for defekt NF-kB-aktivering. WES avslørte biallelic CARD11 mutasjoner hos begge pasientene, spesielt en nonsensmutasjon (Q945*) (Greil et al., 2013), og en sletting av ekson 21 (Stepensky et al., 2013). Innføring Av q945 * mutasjon I CARD11-mangel JPM50. 6 Jurkat t cellelinje resulterte i manglende evne til å aktivere NF-kB og markert defekt IL-2 produksjon (Greil et al., 2013). Card11 – / – mus og umodulerte mus (bærer en hypomorf Card11 mutasjon), viser en lignende fenotype, med selektiv defekt I nf-kB aktivering, redusert proliferasjon og svekket cytokinproduksjon som respons PÅ tcr / BCR stimulering, hypogammaglobulinemi, og dårlig antistoffrespons På T-avhengige og t-uavhengige antigener (Hara et al., 2003; Jun et al., 2003). Samlet sett identifiserer disse observasjonene germline tap av funksjon mutasjoner AV CARD11 som en ny årsak til kombinert immunsvikt med dysfunksjonelle T-og B-lymfocytter.interessant nok har germline heterozygote gain-of-function mutasjoner I CARD11 også vist seg å forårsake t-og b-celleavvik. Spesielt Snø et al. rapportert fire pasienter fra to familier, som presenterte splenomegali og b-celle lymfocytose. Immunologiske undersøkelser viste økt antall polyklonale sene Overgangs b-celler i periferien, forbedret b-celleproliferasjon in vitro som respons på IgM-stimulering, og økt nukleær translokasjon av p65-protein i sirkulerende B-og T-lymfocytter (Snow et al., 2012). Akkumuleringen av Sene Overgangs b-celler i periferien reflekterte ikke økt proliferasjon eller økt overlevelse, og var sannsynligvis på grunn av forhøyet produksjon fra benmargen. Histologisk undersøkelse av lymfoid vev viste fremtredende primære follikler, med atrofiske germinale sentre. Pasientene hadde redusert antall sirkulerende minne B-celler og klarte ikke å montere antistoffrespons på polysakkaridantigener. Videre ble differensieringen av Pasientens B-lymfocytter til plasmablaster in vitro svekket.
bruk av massivt parallell mRNA-sekvensering tillot identifisering av en heterozygot e127g-mutasjon AV CARD11 hos berørte pasienter fra den første familien. Innføring av denne mutanten I CARD11-mangel JPM50. 6 t-celler resulterte i konstitutiv aktivering AV NF-kB. Den berørte pasienten fra den andre familien ble funnet å bære en heterozygot G116S CARD11 mutasjon, som tidligere hadde blitt rapportert å være en gain-of-function somatisk mutant i EN DLBCL tumor (Lenz et al., 2008). TIL tross for CARD11-mutasjonenes aktiverende natur viste Pasientens t-lymfocytter defekt proliferasjon, redusert ekspresjon AV CD25 og CD69 og nedsatt PRODUKSJON AV IL-2 som respons på stimulering med oppløselig anti-CD3/CD28. Innføring AV e127g-mutanten i normale t-celler førte til økt CD69-uttrykk og IL-2-produksjon; men da cellene ble stimulert via CD3 / CD28, produserte de signifikant mindre IL-2 og viste redusert proliferasjon sammenlignet med kontrolltransfektanter (Snow et al ., 2012). Disse dataene indikerer at germline heterozygote CARD11 gain-of-function mutasjoner forårsaker konstitutiv nf-kB-signalering som fremmer økt frigjøring av overgangs b-celler fra benmargen, selektiv utvidelse av overgangs-og naï perifere b-celler, assosiert med manglende evne til å opprettholde et minne B-cellebasseng og induksjon Av T – celleanergi. Denne tilstanden har også blitt referert til som «b-celleutvidelse MED NF-kB og T-celleanergi» syndrom (Snow et al., 2012). Til sammen viser disse dataene at både tap av funksjon og gevinst-av-funksjon mutasjoner AV CARD11 forstyrrer T-cellefunksjonen.
