Oversikt

Jern spiller en viktig rolle i de fleste organismer på grunn av sin evne til å katalysere elektronoverføring, en viktig del av metabolske reaksjoner i mitokondriene under produksjon av energi. I tillegg er jern i pattedyr en nøkkelkomponent av hemoglobin, slik at transport av oksygen til vev via røde blodlegemer. Fritt jern er potensielt giftig på grunn av sin evne til å katalysere genereringen av skadelige frie radikaler. Av denne grunn er jern vanligvis bundet til proteiner som en del av hemegrupper eller jernsulfursentre for funksjonell aktivitet. Ikke-funksjonelt jern er bundet til bærere eller lagringsproteiner, men kan være mer løst festet til andre proteiner i en labil form. Forsiktig kontroll av jernfordeling hos mennesker regulerer ikke bare tilgjengelighet og toksisitet, men spiller også en rolle i immunresponsen. Under infeksjon kroppen sekvestrer tilgjengelig jern for å hindre bruken av invaderende bakterier, betydelig begrense deres evne til å vokse og formere seg.EN av de viktigste kontrollerne av jerntransport til celler ER CD71, også kjent som transferrinreseptor 1. Figur 1 oppsummerer sin rolle i transport av jern fra vev væske eller plasma inn i cellen. «Fri» jern, i Form Av Fe(III) binder seg til transferrin, som i seg selv blir en ligand for membranbundet CD71. Fe (III)-transferin-CD71-komplekset blir så endocytosed i et endosom som surgjøres gjennom virkningen av ionpumper. Innenfor det sure miljøet dissocieres komplekset i komponentdelene. CD71 og transferrin resirkuleres tilbake til overflaten, Mens Fe(III) reduseres til Fe (II) gjennom aktiviteten til metalloprotease STEAP3. Fe (II) kan deretter eksporteres fra endosomet av PROTEINET DMT1 (divalent metalltransportør 1). I cytoplasma Kan Fe (II) assosieres med ferritin og lagres for fremtidig bruk; behandles i mitokondriene for syntese av hemegrupper og Fe-s-forbindelser; eller frigjøres tilbake i det ekstracellulære miljøet gjennom ferroportins virkning. Frigivelsen Av Fe (II) av ferroportin styres negativt av hormonet hepcidin fra leveren, for eksempel under betennelse for å begrense jerntilgjengelighet til patogener. Det frigjorte Fe (II) jernet kan deretter omdannes tilbake Til Fe (III) formen av plasmaproteiner som ceruloplasmin.

Fig. 1. Rollen av transferrinreseptor 1 i jerntransport til celler.

Studie Av Jerntransport

Bio-Rad selger en rekke antistoffer mot proteiner involvert i jernhomeostase.

Target	Human	Mouse	Rat
CD71/TfR1	MCA1148, MCA2775, VMA00037	MCA1033, MCA2474	MCA155
Transferrin	9100-0004, 9100-1055, AHP081, AHP1757, AHP858, VMA00578, VPA00797	AHP081	9100-1055, AHP081
Ferritin	4420-4804, 4420-3010, 4420-3904GA, 4420-4804, AHP2179, OBT1639
Ceruloplasmin
Proerythroblasts / Erythrocytes	MCA506G	MCA6044G

Flow Cytometry Analysis of Key Iron Transport Marker CD71

Rat Anti-Mouse CD71 Antibody, clone 8D3 recognizes mouse CD71, a 763 amino acid ~95 kDa single pass type II transmembran glykoprotein celleoverflate, ellers kjent som transferrinreseptoren. CD71 uttrykkes på celler fra erythroid-linjen, men mangler fra flertallet av modne erytrocytter. Klonen 8D3 gjenkjenner innfødte, oppløselige og denaturerte former for murine CD71. Binding AV 8d3-antistoffet TIL CD71 forstyrrer ikke opptaket av jern i celler. Rat Anti-Mouse TER-119/Erytroid Celler Antistoff, klon TER-119 gjenkjenner TER-119 også Kjent Som Ly-76. Ter-119 klonen oppdager et 52 kDa protein som er assosiert med celleoverflate uttrykt glykophorin A. TER-119 er et erytroidspesifikt antigen uttrykt fra tidlig proerytroblast til det modne erytrocyttrinnet. Dette antigenet uttrykkes også i mindre grad på 20-25% av benmargceller og 2-3% av miltceller. Disse nøkkelmarkørene har blitt brukt sammen i flowcytometri (Figur 2) for å vise CD71 som kreves FOR FE-import for å syntetisere hemoglobin I TER-119 positive proerytroblaster.

Fig. 2. Flowcytometri analyse av mus tron transportmarkører CD71 OG TER-119. A, rpe konjugert Rotte Anti-Mus Ter-119 (MCA6044PE) Antistoff OG FITC konjugert Rotte IgG2a Isotype Kontroll (MCA1212F). B, rpe-konjugert Rotte-Anti-Mus Ter-119 (MCA6044PE) – Antistoff og FITC-konjugert Rotte-ANTI-Mus CD71 (MCA2474F) – Antistoff. Alle eksperimenter utført på mus benmarg. Data ervervet på ZE5™ Celleanalysator.