Abstrakt

utviklingen av en kontinuerlig to-trinns sentrifugeringsprosess for fjerning av hybridomceller og celleavfall fra kulturbuljong er rapportert. Målet var å generere supernatant, som direkte kan brukes til ultrafiltrering eller kromatografi uten filtreringstrinn.

det første sentrifugeringstrinnet for fjerning av hybridomceller fra gjentatt batchfermentering i 100 L-skala ble utført av en forbedret skivebunkseparator. Sentrifugen var utstyrt med et hydrohermetisk matesystem, som tillot en skadefri separasjon av cellene ved moderat sentrifugalkraft.

avklaringen for pattedyrceller i dette trinnet var i området 99 til 99,9 %. Mengden av subcellulære partikler i den klargjorte væskefasen ble redusert opp til 50 % av partikkelinnholdet i matestrømmen.

i et andre sentrifugeringstrinn ble fjerning av gjenværende mengde celleavfall og andre små partikler utført. Det ble utført med sentrifugalkrefter opp til 18000 * g i en høyhastighets sentrifuge utstyrt med et kontinuerlig strømningssystem.

de monoklonale antistoffene i den resulterende supernatanten ble direkte konsentrert ved ultrafiltrering og Kromatografiske metoder. I denne prosessen ble det ikke observert begroing AV UF-membraner eller Kromatografiske membraner.

Kostnader for membranutskifting kan reduseres drastisk ved å bruke to-trinns sentrifugeringsprosessen.