cDNA Kloning

Omvendt transkripsjon AV RNA til komplementært DNA (cDNA) Er det første trinnet i mange molekylærbiologiske arbeidsflyter, inkludert genuttrykksstudier ved hjelp av sanntids PCR, genkloning og i etableringen av cDNA-biblioteker.et cDNA-bibliotek er en samling av klonede DNA-sekvenser som er komplementære til mRNA som ble ekstrahert fra en gitt celle eller vev. Biblioteket representerer bare de transkriberte sekvensene i en bestemt prøve og kan gi et vell av informasjon om identiteten og funksjonaliteten til bestemte gener. cDNA-biblioteker gir også innsikt i overflod AV RNA produsert i en prøve fordi jo mer en mRNA er uttrykt, jo mer cDNA vil bli produsert.Ved konstruksjon av cDNA-biblioteker er det viktig at cDNA-klonene er representative for den opprinnelige rna-populasjonen, både når det gjelder full lengde og relativ overflod. Dette betyr at valget av revers transkriptase som brukes i dette trinnet er av kritisk betydning. Når du kloner cdnaer og lager cDNA-biblioteker, anbefaler Vi Vår UltraScript og UltraScript 2.0-serie av produkter. Disse svært aktive og termostabile enzymene er i stand til å syntetisere mer full lengde cDNA-produkt, selv med begrensede mengder rna, rna uttrykt i lave nivåer eller som inneholder en høy grad av sekundær struktur.