for å avgjøre om vertscelledødsmaskineriet er aktivert etter cvb3-infeksjon, ble immunoblotanalyse av lysat samlet på bestemte tidspunkter utført. Caspase 3, som er tilstede i celler som et forløperprotein med en molekylvekt på 32 kDa, er et primært molekyl involvert i utførelsen av celledød. Ved bruk av monoklonale anti-caspase 3 (1:1000; Transduksjonslaboratorier) ble det fastslått at uinfiserte celler inneholdt 32-kDa forløperproteinet. Etter cvb3-infeksjon begynte nivået av 32-kDa-forløperproteinet å redusere mellom 7 og 8 h etter infeksjon, og det var nesten helt uoppdagelig ved 12 h etter infeksjon (Fig.2). For å avgjøre om det utarmede pro-caspase 3 hadde blitt proteolytisk behandlet fra et enkeltkjedet zymogen til dets aktive to-kjedede enzym, ble HeLa-cellelysater inkubert med caspase 3 fluorescerende substrater som tidligere beskrevet (23). Kort tid ble cellulære lysater inkubert med reaksjonsbuffer (20 Mm Tris , 137 mM NaCl, 1% Nonidet P-40, 10% glyserol) inneholdende 100 µ caspase 3 substrat acetyl-Asp-Glu-Val-Asp–7-amino-4-metylkoumarin (Ac-DEVD-AMC) (Calbiochem, Cambridge, Masse.) Eller Z-Asp-Glu-Val-Asp-7-amino-4-trifluoromethylcoumarin (Z-DEVD-AFC) (Enzymsystemer Produkter, Livermore, Calif.). Reaksjonsblandingen ble inkubert ved 37°C i 2 timer, og fluorescenseksitasjon AV AMC eller AFC ved henholdsvis 380 eller 400 nm ble målt ved henholdsvis 460 eller 505 nm med Et CytoFluor 2350 cytofluorometer (Perseptive Biosystems, Burlington, Ontario, Canada). Ved hjelp av denne tilnærmingen var caspase 3-aktivitet tydelig ved 5 h postinfeksjon. Økningen i caspase 3-aktivitet fra 7 til 10 h etter infeksjon, da maksimalt aktiveringsnivå ble nådd, ble opprettholdt til 12 h etter infeksjon (Fig . 2). Denne proteasetesten viste at caspase 3 var i aktiv form i infiserte celler, og at den var i stand til proteolytisk behandling av andre caspaser og substrater.

Caspase 3 spalter spesifikke substrater ved asparaginsyrerester (42). PARP, et nukleært protein involvert I DNA-reparasjon (13, 69), har vist seg å være et substrat for aktivert caspase 3 så vel som andre caspaser (35). I apoptotiske celler spaltes PARP fra et 116-kDa-protein, som gir fragmenter på 85 og 25 kDa, bestemt med antistoffer for henholdsvis amino-og karboksylterminien av proteinet. I CVB3-infiserte HeLa-celler ble PARP-nedbrytning, med utseendet av et 85-kda-fragment, detekterbart ved 9 h postinfeksjon, med ytterligere reduksjon av nivåene av 116-kDa-peptidet ved 10 og 12 h postinfeksjon, som bestemt ved immunoblotanalyse med musmonoklonal anti-PARP (1: 2000; Biomol) (Fig. 3).

DFF ER et cytosolisk protein som kan spaltes av caspase 3 (37). Når spaltet, frigjør dette proteinet en endonuklease som migrerer til kjernen, hvor DEN kan spalte DNA på internukleosomale steder, noe som resulterer i DNA-fragmentering (16). Det har tidligere vist seg at internukleosomal DNA-nedbrytning er et cellulært trekk ved pikornavirusinfeksjon (32). Som bestemt ved bruk av rabbit polyclonal anti-DFF (sjenerøst levert Av Xiaodong Wang, University Of Texas Southwestern Medical School, Dallas), spaltes DFF fra et 45-kDa-protein, som produserer et 30-kDa-fragment som begynner ved 9 h etter infeksjon, med fortsatt behandling og tap av 45-kda-proteinet mellom 10 og 12 h etter infeksjon (Fig. 3).

for å avgjøre om caspaser direkte produserer den karakteristiske CPE som oppstår etter pikornavirusinfeksjon eller aktiveres etter de morfologiske endringene, ble cellene behandlet med den generelle caspasehemmeren benzyloksykarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketon (ZVAD.(fmk). En lagerløsning (100 mM i dimetylsulfoksid) AV ZVAD.Fmk (Bachem) ble fortynnet i komplett MEM til konsentrasjoner fra 0 til 200 µ, og fortynningene ble inkubert med celler i 30 minutter før infeksjon eller lettbehandling. Etter cvb3-infeksjon ble cellene vasket MED PBS, og komplett MEM inneholdende 10% FBS og frisk ZVAD.fmk (0 til 200 µ) ble deretter erstattet. Dette peptidet har vist seg å hemme induksjonen av morfologiske endringer ved flere apoptotiske stimuli (46, 54). ZVAD.fmk ved konsentrasjoner på 50, 100 og 200 µ blokkerte både caspaseaktivitet og spaltning AV PARP og DFF i Bpd-MA – og lysbehandlede HeLa-celler (positiv kontroll for apoptose) (Fig . 4). I CVB3-infiserte HeLa-celler ble spaltningen av PARP og DFF delvis forhindret av inhibitoren i konsentrasjoner på 50 og 100 µ (Fig . 4). Ved høyeste konsentrasjon av inhibitoren (200 µ) var DET ingen tegn PÅ PARP-eller dff-spaltningsfragmenter i CVB3-behandlede celler ved 10 timer etter infeksjon. Kaspasespaltning av strukturelle proteiner som aktin, gelsolin, lamin B og fokal adhesjonskinase er ansvarlig for de morfologiske endringene som er observert etter induksjon av apoptose (42, 45). Ved 2 timer etter fotoaktivering AV BPD-MA ble HeLa-celler kondensert, hadde omfattende membranblebbing og frigjort fra monolaget (Fig.5). Ved økende konsentrasjoner AV ZVAD.fmk, denne apoptotiske fenotypen var ikke tydelig, med cellene opprettholde en morfologi som ligner på kontrollcellene (Fig. 5). CVB3-infiserte HeLa-celler ble kondensert og frigjort fra monolaget, men viste ingen membranblebbing ved 10 h etter infeksjon (Fig . 5). Blokkering av caspase-aktivitet AV ZVAD.fmk ved konsentrasjoner opp til 200 µ endret ikke den cytopatiske fenotypen selv om spaltning av substrater (DFF og PARP) ble hemmet.

en klassisk funksjon av virus Av Familien Picornaviridae er den cellulære CPE etter infeksjon. Siden oppdagelsen av en ekstraneural cellekulturteknikk for multiplikasjon av poliovirus (17), har degenerative endringer i cellemorfologi blitt notert. Først beskrevet Av Robbins et al. (48) i 1950, disse cytopathic endringene inkluderer kjernefysisk krymping, kondensering av kromatin, celle avrunding, og frigjøring fra monolag, med eventuell progresjon til acidophilic cytoplasma, kjernefysisk pyknosis, og fragmentering av kjernefysisk kromatin (karyorrhexis) (47).den nylige forståelsen av celledødsmekanismer setter scenen for undersøkelse av vertscelledødsproteiner og deres mulige rolle i CPE AV CVB3-infeksjon. Mange virus hemmer eller aktiverer celledød, strategier som formidler særegne aspekter av celleskade, inflammatoriske responser eller viral utholdenhet. Som nevnt ovenfor har tidligere picornavirus-studier avslørt de morfologiske egenskapene ved apoptotisk celledød, inkludert cellekrymping, DNA-fragmentering og kjernekondensasjon (21, 32, 47).Caspase 3, en cysteinprotease med homologi til caenorhabditis elegans protein Ced-3 (77), regnes som et av nøkkelproteinene involvert i utførelsesstadiet av celledød. Apoptose indusert av flere stimuli, inkludert Fas, TNF, etoposid, staurosporin, fotodynamisk terapi, ioniserende stråling og vekstfaktorabstinens, involverer pro-caspase 3-behandling og påfølgende aktivering (15, 23, 30, 33, 51). Fra 7 til 8 timer etter infeksjon MED CVB3 er pro-caspase 3 tømt, og caspase-aktiveringsanalyser har vist at dette proteinet spaltes til sin aktive form. Flere proteiner kan aktivere caspase 3, inkludert caspase 8 (via signalering VIA tnf-eller Fas-reseptorer) (55), granzyme B fra cytotoksiske lymfocytter (62) og caspase 9 (via frigjøring av mitokondrielt cytokrom c og sammenstilling av apoptotiske proteaseaktiveringsfaktorer) (36). Når det er aktivert, kan caspase 3 nedbryte spesifikke substrater, noe som igjen resulterer i strukturelle endringer og tap av homeostatisk regulering av cellulære prosesser. Tallrike proteiner har vist seg å bli spaltet av aktiverte caspaser. I samsvar med aktiveringen av caspase 3 spaltes BÅDE PARP og DFF etter cvb3-infeksjon. Caspase-aktivering og DNA-fragmentering er direkte forbundet gjennom spaltningen AV DFF (37). DFF er en human cytosolisk faktor som består av to underenheter på 45 og 40 kDa, hvorav den største nedbrytes til mindre polypeptider av caspase 3. I nyere studier Av Enari et al. (16) ved bruk av murine lymfomceller ble en endonuklease, caspase-aktivert DNase (CAD) isolert. Den murine ekvivalenten AV DFF-protein ble isolert og betegnet inhibitor AV CAD (50). Caspase 3 spalting av hemmer AV CAD (DFF) tillater CAD nukleær translokasjon og DNA nedbrytning. DFF spaltes ved 9 h etter infeksjon, noe som resulterer i et 30-kDa fragment (Fig. 3) som kan viderebehandles til et 11-kDa-fragment(37). PARP ligger i kjernen og er involvert I DNA-reparasjon. Spaltning AV PARP begynner ved 9 h etter infeksjon, noe som tyder på at når caspaser er aktivert i cytosol, kan de få tilgang til kjerne-lokaliserte substrater.

i notatet, caspasehemming med den generelle caspasehemmeren ZVAD.fmk forhindret ikke CPE indusert AV CVB3 etter infeksjon. Ved mellom 6 og 7 h postinfeksjon ble CPE tydelig ved kontrastmikroskopi i VÅR cvb3-infeksjonsmodell. Tiden mellom infeksjon og UTSEENDE AV CPE, som observert ved kontrastmikroskopi, var konsistent VED ZVAD.konsentrasjoner av fmk fra 50 til 200 µ I tillegg til ikke å påvirke tiden TIL CPE, ZVAD.fmk-behandling resulterte i celler med et morfologisk utseende som ligner på ubehandlede, infiserte celler (Fig. 5). Vi brukte behandling MED bpd-MA og lys som en alternativ metode for å indusere apoptose I HeLa-celler (22, 23). Hemming av caspase-aktivering med inhibitoren ZVAD.fmk forhindret apoptotisk fenotype (Fig. 5). Fra disse resultatene konkluderer vi med at caspaseaktivitet og spalting av substrater ikke tar hensyn til den karakteristiske CPE forbundet med pikornavirusinfeksjon, men i stedet aktiveres etter de morfologiske endringene.

krysspunktet mellom den virale replikative syklusen og aktiveringen av vertscelledødsveien gjenstår å bli bestemt. Pikornavirusinfeksjon resulterer snart i hemming av cellulær RNA og proteinsyntese (19, 74). Tidlige studier av sammenhenger mellom pikornavirus-induserte metabolske endringer og virusindusert CPE indikerte at hemming av protein-OG RNA-syntese ikke var direkte relatert til cellemorfologiske endringer (4). Protein-og RNA-syntesehemmere forsinket celledød, men cellene viste færre morfologiske endringer enn picornavirus-infiserte celler(5). Inhibering av protein-og RNA-syntese med noen av flere midler, som actinomycin D, puromycin og difteritoksin, resulterer i apoptose (39). Tidlige studier gjort i poliovirusinfeksjonssystemer viste at puroycin, en hemmer av oversettelsen av virale så vel som vertsproteiner, forsinker utbruddet av cytopatiske forandringer, noe som tyder på at visse virale proteiner kan være direkte cytotoksiske (4). Økning AV MOI fører til en raskere oppstart AV CPE( upubliserte observasjoner), selv om nesten all vertsproteinoversettelse slås av innen 3 timer ved en relativt lav MOI (25) som den som ble brukt i denne studien (MOI = 5). Nylig har det vist seg AT 2b-proteinet kodet av coxsackievirus og poliovirus forbinder med cellulære membranfraksjoner, inkludert plasmalemma og endoplasmatisk retikulum, og forstyrrer ionbevegelse, inkludert bevegelsen Av Ca2 + til cytosol (1, 67). Ca2 + tilstrømning skjer ved apoptose (7, 44), men det er ikke klart om tilstrømningen skjer før eller etter caspase-aktivering. Ved undersøkelse av de ioniske kravene til caspaser er det fastslått at kalsiumionkonsentrasjonen har liten effekt på caspaseaktiviteten (56). En tidlig kalsiumtilstrømning etter coxsackievirusinfeksjon kan skyldes påvirkning AV 2b-proteinet på membranpermeabilitet, og den store senkalsiumtilstrømningen bemerket (> 6 timer etter infeksjon) (67) kan være en nedstrøms effekt av caspase-aktivering.

I de tidlige faser av infeksjonen vil det være fordelaktig for viruset å hemme vertscelledød, og dermed muliggjøre maksimal produksjon av viral avkom. På sene stadier av virussyklusen vil det også være gunstig for viruset å indusere apoptose i stedet for nekrose. En slik mekanisme for død er et potensielt middel for vertsimmunsystemunndragelse av viruset under frigjøring til det omkringliggende vevet. Apoptose er preget av rask fagocytose av berørte celler uten frigjøring av proinflammatoriske cytokiner (53).

Virus har vist seg å interagere på ulike nivåer av den apoptotiske vei. Flere gammaherpesvirus (inkludert Kaposis sarkomassosiert humant herpesvirus 8) samt tumorigenisk molluscum contagiosum virus inneholder FLICE-hemmende proteiner som interagerer Med Fas-adapterproteinet FADD og konkurrerer om å hemme caspase 8 rekruttering og påfølgende aktivering (61). Ekspresjon av koppeviruset serpin CrmA blokkerer caspase 8-mediert aktivering av caspaser nedstrøms som caspase 1 og caspase 3 (55). IAP (for hemmere av apoptose) proteiner utgjør en familie av proteiner, uttrykt av baculovirus, som blokkerer apoptose indusert av virusinfeksjon eller av caspase 1 (78). Videre har flere virale homologer Av Bcl-2-familien av proteiner blitt oppdaget (2, 8, 20, 70). Adenovirus (9, 20, 57), Afrikansk svinepestvirus (41) og Epstein-Barr-virus (26, 41, 59) koder proteiner (HENHOLDSVIS e1b-19k, lmws-HL og BHRF1) som viser sekvenshomologi til pro-overlevelsesgener Av Bcl – 2-familien.identifisering av virale proteiner som direkte induserer apoptose er ikke så omfattende dokumentert som for virale proteiner som hemmer celledød. Lentivirusene humant immunsviktvirus og humant t-celle leukemivirus type 1 koder transkripsjonsregulatorene Tat og Tax, som har vist seg å øke ekspresjonen Av Fas-ligand samtidig som ekspresjonen av Bcl-2 familiemedlemmer reduseres (79, 80). De humane adenovirus-kodede e1a, E3 og e4 genprodukter forårsaker celledød etter uttrykk i cellekultur. Adenovirusdødsinduserende gener uttrykkes sent i infeksjonssyklusen og overvelder til slutt de viruskodede dødshemmende gener (38).Våre data viser at caspase 3-aktivering følger, snarere enn forut, cvb3-induserte degenerative morfologiske endringer i infiserte HeLa-celler. Aktiverte caspaser prosessspesifikke substrater, inkludert PARP og DFF. Inhibering av caspase-aktivitet eliminerer imidlertid ikke det morfologiske utseendet (CPE) av virusinfiserte celler, som bestemt ved kontrastmikroskopi. Kaspasebehandling og spalting av substrater kan være viktig i den endelige endringen av normale homeostatiske prosesser i infiserte celler og kan lette den endelige clearance av virusinfiserte celler. Virale proteaser 2A, 3c og 3CD kan spalte spesifikke strukturelle proteiner, noe som resulterer i morfologiske endringer i samsvar MED CPE, på en måte som er analog med virkningen av caspaser, som spalter separate substrater for å oppnå en distinkt apoptotisk fenotype.

FOTNOTER

i xmlns:hwp=»http://schema.highwire.org/Journal Mottatt 9.Januar 1998.i xmlns:hwp=»http://schema.highwire.org/Journal Akseptert 21.Mai 1998.
• Copyright © 1998 American Society For Microbiology
1. 1.↵
   1. Aldabe R., Irurzun A., Carrasco L.

   Poliovirusprotein 2BC øker cytosoliske frie kalsiumkonsentrasjoner.J. Ferrule.71199762146217

2. 2.↵
   1. Ambrosini G., Adidas C., Altieri D. C.

   den nye anti-apoptose genet, survivin, uttrykt i kreft og lymfom.Nat. Med.31997917921

3. 3.↵
   1. Anderson D. R.,
   2. Wilson Je,
   3. Carthy Cm,
   4. Yang D.,
   5. Kandolf R.,
   6. McManus Bm

   Direkte interaksjoner av coxsackievirus B3 med immunceller I miltkammeret av mus som er mottakelige eller resistente mot myokarditt.J. Virol.70199646324645

4. 4.↵
   1. Bablanian R.,
   2. Eggers H.,
   3. Tamm I.

   Studier på mekanismen for poliovirus-indusert celleskade. I. forholdet mellom poliovirus-induserte metabolske og morfologiske endringer i dyrkede celler.Virologi261965100113

5. 5.↵
   1. Bablanian R.,
   2. Eggers H. J.,
   3. Tamm I.

   Studier på mekanismen for poliovirus-indusert celleskade. II. forholdet mellom poliovirus vekst og virus-indusert morfologiske endringer i celler.Virologi261965114121

6. 6.↵
   1. Bergelson J. M.,
   2. Cunningham J. A.,
   3. Kurt-Jones E. A.,
   5. Kristhivas A.,
   7. Horwitz M. S.,
   8. Crowell R. L.,
   9. li> finberg r. w.

   Isolering av en felles reseptor for coxsackie b-virus og adenovirus 2 og 5.Science275199713201323

7. 7.↵
   1. Bian X.,
   2. Hughes F. M. Jr.,
   3. Huang Y.,
   4. Cidlowski J. A.,
   5. Putney J. W. Jr.

   roller av cytoplasmatiske Ca2+ Og intracellulære Ca2+ butikker i induksjon og undertrykkelse av apoptose I S49 cells.Am. J. Physiol.2721997C1241C1249

8. 8.↵
   1. Cheng E. H.,
   2. Nicholas J.,
   3. Bellows D. S.,
   4. Hayward G. S.,
   5. Guo H. G.,
   6. Reitz M. S.,
   7. Hardwick J. M.

   A Bcl-2 homolog kodet Av Kaposi sarkom-assosiert virus, humant herpesvirus 8, hemmer apoptose, men heterodimerer ikke Med Bax eller Bak.Proc. Natl. Acad. Sci. USA941997690694

9. 9.↵
   1. Chiou S.-K.,
   2. Tseng C.-C.,
   3. Rao L.,
   4. Hvit E.

   Funksjonell komplementering av adenovirus e1b 19-kilodalton protein Med Bcl-2 i inhibering av apoptose i infiserte celler.J. Virol.68199465536566

10. 10.↵
    1. Clark M. E.,
    2. Hammerle T.,
    3. Wimmer E.,
    4. Dasgupta A.

    Poliovirus proteinase 3c konverterer en aktiv form for transkripsjonsfaktor IIIC til en inaktiv form: en mekanisme for inhibering av vertscellepolymerase III transkripsjon av poliovirus.EMBO J. 10199129412947

11. 11.↵
    1. Clark M. E.,
    2. Lieberman P. M.,
    3. Berk A. J.,
    4. Dasgupta A.

    direkte spalting av HUMANT TATA-bindende protein ved poliovirus protease 3c in vivo og in vitro.Mol. Celle. Biol.13199312321237

12. 12.↵
    2. Bergeron L.,
    3. Zhu H.,
    4. Li H.,
    5. Yuan J.

    Spesifikk spaltning av α-fodrin under fas – og tumor nekrosefaktor-indusert apoptose er mediert av et interleukin-1β-konverterende enzym/Ced-3 protease forskjellig fra poly(ADP-ribose) polymerase protease.J. Biol. Chem.27119963127731282

13. 13.↵
    1. De Murcia J. M.,
    2. Niedergang C.,
    3. Trucco C.,
    4. Ricoul M.,
    5. Dutrillaux B.,
    6. Oliver F. J.,
    7. Masson M.,
    8. Dierich A.,
    9. LeMeur M.,
    10. Walztinger C.,
    11. Chambon P.,
    12. De Murcia G.

    Krav til poly(ADP-ribose) polymerase i utvinning FRA DNA-skade i mus og i celler.Proc. Natl. Acad. Sci. USA94199773037307

14. 14.↵
    1. Doedens Jr,
    2. Kirkegaard K.

    Inhibering av cellulær proteinsekresjon AV poliovirusproteiner 2B og 3a. EMBO J. 141994894907

15. 15.↵
    1. Enari M.,
    2. Klem H.,
    3. Nagata S.

    Involvering AV EN ISLIGNENDE protease i Fas-mediert apoptose.Nature37519957881

16. 16.↵
    1. Enari M.,
    2. Sakahira H.,
    3. Yokoyama H.,
    4. Okawa K.,
    5. Iwamatsu A.,
    6. Nagata S.

    en caspase-aktivert DNase som nedbryter DNA under apoptose, OG dens hemmer ICAD.Nature39119984350

17. 17.↵
    1. Enders J. F.,
    2. Weller T. H.,
    3. Robbins R. C.

    Dyrking Av Lansing-stammen av poliomyelittvirus i kulturer av forskjellige humane embryonale vev.Science10919498587

18. 18.↵
    1. Erhardt P.,
    2. Tomaselli K. J.,
    3. Cooper G. M.

    Identifikasjon AV mdm2 onkoprotein som substrat FOR CPP32-lignende apoptotiske proteaser.J. Biol. Chem.27219971504915052

19. 19.↵
    1. Etchison D.,
    2. Milburn S. C.,
    3. Edery I.,
    4. Sonenberg N.,
    5. Hershey J. W.

    Hemming av HeLa-celleproteinsyntese etter poliovirusinfeksjon korrelerer med proteolysen av et 220 000-dalton-polypeptid assosiert med eukaryotisk initieringsfaktor 3 og et cap-bindende proteinkompleks.J. Biol. Chem.25719821480614810

20. 20.↵
    1. Farrow S. N.,
    2. Hvit J. H.,
    3. Martinou I.,
    4. Raven T.,
    5. Ordspill K. T.,
    6. Grinham C. J.,
    7. Martinou J. C.,
    8. Brun R.

    Kloning av en bcl-2 homolog ved interaksjon med adenovirus e1b 19k.Nature3741995731733

21. 21.↵
    1. Godman Gc

    cytopatologien av enteroviral infeksjoninternasjonal gjennomgang av eksperimentell patologirichter Gw, Epstein M. A. 5196667110akademisk PressNew York, N. Y

22. 22.↵
    1. Granville D. J., Jiang H., M. T., Levy J. G., McManus B. M.,
    2. Hunt D. W.

    Overuttrykk Av Bcl-X(L) forhindrer caspase-3-mediert aktivering AV DNA-fragmenteringsfaktor (DFF) produsert ved behandling MED fotokjemoterapeutisk middel BPD-MA.FEBS Lett.4221998151154

23. 23.↵
    1. Granville Dj,
    2. Levy J. G.,
    3. Hunt Dw

    Fotodynamisk terapi induserer caspase – 3-aktivering I hl-60-celler.Celledød Er Forskjellig.41997623629

24. 24.↵
    1. Guinea R.,
    2. Lopez-Rivas A.,
    3. Carrasco L.

    Modifikasjon av fosfolipase C og fosfolipase A2 aktiviteter under poliovirusinfeksjon.J. Biol. Chem.26419892192321927

25. 25.↵
    1. Helentjaris T.,
    2. Ehrenfeld E.

    Hemming av vertscelleproteinsyntese VED UV-inaktivert poliovirus.J. Virol.211977259267

26. 26.↵
    3. Huen D.,
    4. Rowe M.,
    5. Dawson C.,
    6. Johnson G.,
    7. Rickinson A.Epstein-Barr virus-kodet BHRF1 protein, en viral homolog Av Bcl-2, beskytter humane b-celler fra programmert celledød.Proc. Natl. Acad. Sci. USA90199384798483
27. 27.↵
    1. Huber M.,
    2. Selinka H.-C.,
    3. Kandolf R.

    Tyrosin fosforylering hendelser under coxsackievirus B3 replikering.J. Virol.711997595600

28. 28.↵
    1. Irurzun A.,
    2. Arroyo J.,
    3. Alvarez A.,
    4. Carrasco L.

    Forbedret intracellulær kalsiumkonsentrasjon under poliovirusinfeksjon.J. Ferrule.69199551425146

29. 29.↵
    1. Irurzun A., Perez L., Carrasco L.

    Forbedring av fosfolipaseaktivitet under poliovirusinfeksjon.J. Gen. Ferrule.74199310631071

30. 30.↵
    1. Jacobsen M. D., Weil M., Raff M. C.

    Rolle Av Ced-3 / IS – familie proteaser i staurosporin-indusert programmert celledød.J. Cell Biol.133199610411051

31. 31.↵
    1. Jang S. K., Davies M. V., Kaufman R. J.,
    2. Wimmer E.

    Initiering av proteinsyntese ved intern oppføring av ribosomer i 5 ‘ nontranslated region av encefalomyokarditt virus RNA in vivo.J. Virol.63198916511660

32. 32.↵
    1. Jelachich M. L.,
    2. Lipton H. L.

    Theilers murine encefalomyelittvirus dreper restriktive, men ikke permissive celler ved apoptose.J. Virol.70199668566861

33. 33.↵
    1. Kaufmann S. H.,
    2. Desnoyers S.,
    3. Ottaviano Y.,
    4. Davidson N. E.,
    5. Poirier G. G.

    Spesifikk proteolytisk spaltning av poly (ADP-ribose) polymerase: en tidlig markør for kjemoterapiindusert apoptose.Kreft Res. 53199339763985

34. 34.↵
    2. Azuma T.,
    3. Reinhard C.,
    4. Klippel A.,
    5. Tang J.,
    7. Chu K.,
    9. Mcgarry T. J.,
    10. Kirschner M. W.,
    11. Kodhs K.,

    /li>

    12. kwiatkowski d. j.,
    13. williams l. t.

    caspase-3-generert Fragment Av Gelsolin: effektor av morfologisk endring I Apoptose.Science2781997294298

35. 35.↵
    1. Lazebnik Y. A., Kaufmann S. H., Desnoyers S., Putrefy G. G., Earnshaw W. C.

    Spalting av poly(ADP-ribose) polymerase av en proteinase med egenskaper som IS.Nature3711994346347

36. 36.↵
    1. It P., Nijhawan D., Budihardjo I., Srinivasula S. M.,
    2. Ahmad M., Alnemri E. S.,
    3. Wang X.

    Cytokrom c og dATP-avhengig dannelse Av Apaf-1 / caspase-9 kompleks initierer og apoptotisk proteasekaskade.Cell911997479489

37. 37.↵
    1. Liu X.,
    2. Zou H.,
    3. Slakting C.,
    4. Wang X.

    DFF, et heterodimert protein som fungerer nedstrøms for caspase-3 for å utløse DNA-fragmentering under apoptose.Cell891997175184

38. 38.↵
    1. Liu Y.,
    2. Kitsis R. N.

    Induksjon AV DNA-syntese og apoptose i hjertemyocytter ved e1a onkoprotein.J. Cell Biol.1331996325334

39. 39.↵
    1. Martin Sj,
    2. Lennon S. V.,
    3. Bonham A. M.,
    4. Cotter T. g.

    Induksjon av apoptose (programmert celledød) i humane leukemiske hl-60-celler ved hemming AV RNA eller proteinsyntese.J. Immunol.145199018591867

40. 40.↵
    1. Nair C. N.

    Monovalent kationmetabolisme og cytopatiske effekter av poliovirusinfiserte HeLa-celler.J. Virol.371981268273

41. 41.↵
    1. Neilan J. G.,
    2. Lu Z.,
    3. Afonso C. L., Kutish Gf, Sussman M. D., Rock D. L.

    genet For Afrikansk svinepestvirus med likhet med proto-onkogen bcl-2 og Epstein-Barr-virusgenet BHRF1.J. Ferrule.67199343914394

42. 42.↵
    1. Nicholson D. W., Thornberry N. A.

    Caspases: killer proteaser.Trender Biochem. Sci.221997299306

43. 43.↵
    1. Ohlmann T., Rau M.,
    2. Smerte V., Morley S.

    Det C-terminale domenet til eukaryotisk proteinsynteseinitieringsfaktor (eIF) 4G er tilstrekkelig til å støtte cap-uavhengig oversettelse i fravær av eIF4E. EMBO J. 15199613711382

44. 44.↵
    1. Orrenius S.,
    2. Nicotera P.

    kalsiumion og celledød.J. Nevrale Transm. Suppl.431994111

45. 45.↵
    1. Porter A. G.,
    2. Ng P.,
    3. Janicke R. U.

    Dødsubstrater blir levende.Bioessays191997501507

46. 46.↵
    1. Pronk G. J.,
    2. Ramer K.,
    3. Amiri P.,
    4. Williams L. T.

    Krav TIL EN ISLIGNENDE protease for induksjon av apoptose og ceramidgenerering av REAPER.Science2711996808810

47. 47.↵
    1. Reissig M.,
    2. Howes D. W.,
    3. Melnick J. L.

    Sekvens av morfologiske endringer i epitelcellekulturer infisert med poliovirus.J. Exp. Med.1041956289309

48. 48.↵
    1. Robbins Fc,
    2. Enders J. F.,
    3. Weller T. H.

    Cytopatogen effekt av poliomyelittvirus «in vitro» på humane embryonale vev.Proc. Soc. Exp. Biol. Med.751950370

49. 49.↵
    1. Rudin C. M.,
    2. Thompson C. B.

    Apoptose og sykdom: regulering og klinisk relevans av programmert celledød.Annu. Dr. Med.481997267281

50. 50.↵
    1. Sakahira H.,
    2. Enari M.,
    3. Nagata S.

    Spaltning AV CAD-hemmer ved CAD-aktivering og DNA-nedbrytning under apoptose.Nature39119989699

51. 51.↵
    1. Sarin A.,
    2. Wu M. L.,
    3. Henkart P. A.

    Ulike interleukin-1 beta converting enzyme (ICE) familie protease krav til apoptotisk død Av T-lymfocytter utløst av ulike stimuli.J. Exp. Med.184199624452450

52. 52.↵
    1. Schaefer A.,
    2. Kü J.,
    3. Zibirre R.,
    4. Koch G.

    Poliovirusinduserte endringer I HeLa cellemembranfunksjoner.J. Virol.441982444449

53. 53.↵
    1. Schwartzman R. a.,
    2. Cidlowski J. A.Apoptose: biokjemi og molekylærbiologi av programmert celledød.Endocr. Rev. 141993133151
54. 54.↵
    2. Zhu H.,
    4. Chow S. C.,
    5. Macfarlane M.,
    8. Cohen G. M.

    Benzyloksykarbonyl-Val-Ala-Asp (OMe) fluorometylketone (Z-vad.Fmk) hemmer apoptose ved å blokkere behandlingen AV CPP32.Biochem. J. 31519962124

55. 55.↵
    1. Srinivasula S. M.,
    2. Ahmad M.,
    3. Fernandes-Alnemri T.,
    4. Litwack G.,
    5. Alnemri Es

    Molekylær bestilling Av Fas-apoptotisk vei: Fas / APO-1 protease Mch5 er En CrmA-hemmende protease som aktiverer flere Ced-3 / ISLIGNENDE cysteinproteaser.Proc. Natl. Acad. Sci. USA9319961448614491

56. 56.↵
    1. Stennicke H. R.,
    2. Salvesen G. S.

    Biokjemiske egenskaper av caspase-3, -6, -7 og -8.J. Biol. Chem.27219972571915723

57. 57.↵
    1. Subramanian T.,
    2. Tarodi B.,
    3. Chinnadurai G.

    Funksjonell likhet mellom adenovirus e1b 19-kDa protein og proteiner kodet Av Bcl – 2 proto-onkogen OG Epstein-Barr virus BHRF1 gen.Curr. Topp. Mikrobiol. Immunol.1991995153161

58. 58.↵
    3. Alnemri E. S.,
    4. Lazebnik Y. A.,
    5. Fernandes-Alnemri T.,
    6. Litwack G.,
    7. Moir R. D.,
    8. Goldman R. D.,
    9. Poirier G. G.,

    li>

    10. kaufmann s. h.,
    11. earnshaw w. c.

    spalting av lamin a ved mch2 Alpha, Men Ikke Cpp32: flere interleukin 1 beta-konverterende enzymrelaterte proteaser med forskjellige substratgjenkjenningsegenskaper er aktive i apoptose.Proc. Natl. Acad. Sci. USA93199683958400

59. 59.↵
    1. Tarodi B.,
    2. Subramanian T.,
    3. Chinnadurai G.

    EPSTEIN-Barr-virus BHRF1-protein beskytter mot celledød indusert AV DNA-skadelige stoffer og heterolog virusinfeksjon.Virologi2011994404407

60. 60.↵
    1. Teodoro J. G.,
    2. Branton Pe

    Regulering av apoptose av virale genprodukter.Vir71199717391746

61. 61.
    2. Schneider P.,
    3. Hofmann K.,
    5. Meinl E.,
    7. Mattmann C.,
    8. Burns K.,
    9. Bodmer bod Schroter M.,
    13. Krammer P.,
    14. Peter M. e.,
    15. Tschopp.Nature3861997517521
62. 62.↵
    1. Thornberry I Tillegg Til Dette, Kan Du velge Å Bruke En Av De Mest Populære Programmene For Å Hjelpe Deg Med Å Finne Ut Hva Som Er Riktig For Deg.T.,
    2. Nicholson D. w.

    en Kombinatorisk tilnærming definerer spesifisitet av medlemmer Av Capsase Familien og granzyme b. funksjonelle relasjoner etablert For Sentrale Mediatorer Av Apoptose.J. Biol. Chem.27219971790717911

63. 63.↵
    1. Tolskaya E. A.,
    2. Romanova L. I.,
    3. Kolesnikova M. S.,
    4. Ivannikova T. a.,
    5. E. Smirnova A.,
    6. Raikhlin N. T.,
    7. Agol V. I.

    Apoptose-induserende og apoptose-forebyggende funksjoner av poliovirus.J. Virol.69199511811189

64. 64.↵
    1. R. Tomko P.,
    2. Xu R.,
    3. Philipson L.

    HCAR og MCAR: humane og muscellulære reseptorer for undergruppe c adenovirus og gruppe b coxsackievirus.Proc. Natl. Acad. Sci. USA94199733523356

65. 65.↵
    1. Tsunoda I.,
    2. C. Kurtz I.,
    3. Fujinami R. S.

    Apoptose i akutt og kronisk sentralnervesystemsykdom indusert Av Theilers murine encefalomyelittvirus.Virologi2281997388393

66. 66.↵
    1. Vanags D. M.,
    2. Pron-Ares M. I.,
    3. Coppola S.,
    4. Burgess D. H.,
    5. Orrenius S.

    Proteaseinnblanding i fodrin spalting og fosfatidylserin eksponering i apoptose.J. Biol. Chem.27119963107531085

67. 67.↵
    1. van Kuppeveld F. J.,
    2. Hoenderop J. G.,
    3. Smeets R. L.,
    4. Willems P. H.,
    5. Dijkman Hb,
    6. Galama Jm,
    7. Melchers Wj

    Coxsackievirus protein 2B modifiserer endoplasmatisk retikulummembran og plasmamembranpermeabilitet og letter virusfrigjøring.EMBO J. 16199735193532

68. 68.↵
    1. Wang X.,
    2. Zelenski N. G.,
    3. Yang J.,
    4. Sakai J.,
    5. Brown Ms,
    6. Goldstein J. L.

    Spaltning av sterol regulatoriske elementbindende proteiner (SREBPs) VED CPP32 under apoptose.EMBO J. 15199610121020

69. 69.↵
    1. Wang Z. Q., Stingl L., Morrison C., Jantsch M.,
    2. Los M., Schulze-Osthoff K., Wagner E. F.

    PARP er viktig for genomisk stabilitet, men unnværlig i apoptose.Gener Dev.11199723472358

70. 70.↵
    1. Wattre P., Bert V., Hober D.

    Apoptose og humane virusinfeksjoner.Anne. Biol. Blinke.541996189197

71. 71.↵
    1. Wen L. P., Fahrni J. A., Troie S., Guan J. L.,
    2. Orth K.,
    3. Rosen g. d.

    Spaltning av fokal adhesjonskinase ved caspaser under apoptose.J. Biol. Chem.27219972605626061

72. 72.↵
    1. Yalamanchili P.,
    2. Banerjee R.,
    3. Dasgupta A.

    Poliovirus-kodet protease 2APro spalter DET TATA-bindende proteinet, men hemmer ikke vertscellens rna-polymerase II-transkripsjon in vitro.J. Virol.71199768816886

73. 73.↵
    1. Yalamanchili P.,
    2. Datta U.,
    3. Dasgupta A.

    Hemming av vertscelletranskripsjon med poliovirus: spalting av transkripsjonsfaktor CREB ved poliovirus-kodet protease 3Cpro.J. Virol.71199712201226

74. 74.↵
    1. Yalamanchili P.,
    2. Harris K.,
    3. Wimmer E.,
    4. Dasgupta A.

    Hemming av basal transkripsjon av poliovirus: en virus-kodet protease (3Cpro) hemmer dannelsen AV tbp-TATA boks kompleks in vitro.J. Virol.70199629222929

75. 75.↵
    1. Yalamanchili P.,
    2. Weidman K.,
    3. Dasgupta A.

    Spaltning av transkripsjonell aktivator Oct-1 av poliovirus kodet protease 3Cpro.Virologi2391997176185

76. 76.↵
    2. Wilson J. E.,
    3. Anderson D. R.,
    4. Bohunek L.,
    5. Cordeiro C.,
    6. Kandolf R.,
    7. McManus B. M.

    in vitro mutasjonell og hemmende analyse av cis-virkende translasjonelle elementer innenfor 5′ uoversatt region av coxsackievirus b3: potensielle Mål For Antiviral virkning av antigeneroligomerer.Virologi22819976373

77. 77.↵
    1. Yuan J.

    Evolusjonær bevaring av en genetisk vei for en programmert celledød.J. Celle Biochem.601996411

78. 78.↵
    1. Yuan J.

    Transducerende signaler om liv og død.Curr. Opin. Celle Biol.91997247251

79. 79.↵
    1. Zauli G.,
    2. Gibellini D.

    Humant immunsviktvirus Type-1 (HIV-1) Tat protein Og Bcl-2 genuttrykk.Leuk. Lymfom231996551560

80. 80.↵
    1. Zauli G.,
    2. Gibellini D.,
    3. Caputo A.,
    4. Bassini A.,
    5. Negrini M.,
    6. Monne M.,
    7. Mazzoni M.,
    8. Capitani S.

    Humant immunsviktvirus type-1 Tat protein oppregulerer Bcl-2 genuttrykk I Jurkat t-cellelinjer og primære perifere mononukleære celler i blodet.Blod86199538233834