議論

現在の研究では、マウスのCDが動物福祉の懸念に翻訳された失敗率を運ぶかもしれないかどうかを評価しようとした。 我々は、”意識喪失を誘発するのに必要な時間”のAVMA基準の代理マーカーとして呼吸停止までの時間を使用した。”1C2以上の高い頚椎のきれいな切断は、無意識のうちに呼吸停止を誘発する可能性があることを認識したが、様々なCD法の総外傷は、この結果をもたら

成功した安楽死を定義するためのカットオフとして、呼吸停止までの時間を0秒に設定しました。

成功した安楽死を定義するためのカットオフ 私たちは、マウスが（どのくらいの間に関係なく）呼吸を続ける可能性がある任意の安楽死の方法は注意を必要とすると考えています。 麻酔されていないマウスで行われた場合、不完全な安楽死は、オペレータが手順を繰り返すか、別の安楽死方法に切り替えることができるまで、重度の外傷性傷害を経験して潜在的に意識したマウスを残します。 完全な胸郭CNS切断は尾側体の鎮痛剤を残すことができるが、病変の周囲および頭蓋の損傷した組織は依然として痛みを伴う可能性がある。呼吸を継続するのに十分な運動神経支配を有する17,25動物は、痛みが発生するのに十分な求心性神経支配を有する可能性が高い。

私たちのパイロットの仕事では、いくつかのマウスは、ペントバルビタールナトリウムで安楽死する前に15分ほど呼吸を続けました。 彼らが麻酔から取り除かれ、意識を取り戻し、複数の脊髄損傷を伴っていたら、彼らの苦しみは深刻であった可能性があります。 吸入剤または注射用安楽死剤の補助剤としても、マウスが不十分に行われた転位技術から（おそらくカーカス冷凍庫の中で）回復することであっても、痛みや苦痛の可能性は悪化するであろう。 CDのいずれの方法も、本質的に100％の動物が直ちに呼吸を永久に停止するという要件を満たすことが不可欠である。

呼吸停止までの時間に基づいて、CDメソッドのための私たちの21％の失敗したパーセントは、CDを受けたが、放射線学的に明らかな頚椎病変を欠いていたマ7,14これらの以前の研究の著者7,14は、彼らの放射線法を詳述していません。 安楽死に失敗した事象は報告されていないため、7、14著者らは、子宮頸部および胸部病変を有するが、放射線撮影中に気晴らしが不十分なマウスを胸部病変のみを有すると誤読した可能性がある。

以前の知見に照らして、7、14我々は、骨格外傷が推奨される高頸部領域に尾部であっても、脊髄に沿ってどこにでも適用される十分に強力な緊張が無意識と呼吸停止を誘発する可能性があると仮定した。 胸部脱臼群に対する私たちの100％の失敗率は、この仮説を支持していません。 麻酔マウスにおける胸部脱臼を用いて，訓練されていないオペレータが行う可能性のある誤った技術をモデル化し，マウスの安楽死を成功させるために正しい技術が必要であることを検証した。

AVMAガイドラインは、異なるCD技術の比較評価の不足を反映して、手順の具体的な説明なしに、一般的にCDを治療してきました。 様々な出版物は、子宮頸部脱臼を行うための様々な技術を記述している。AVMAパネル報告書を含む8,13,14,16,22その他のものは、様々なCD技術を区別していない。3,10,12,24私たちが選んだ3つの方法に加えて、著者らは、C2椎骨の歯状突起が脊髄を損傷し、それによって技術の有効性を高めることを期待して、30°の角度で引き上げることによってMCDを行うべきであると指定している。7マウスにおけるこの小さな骨のプロセスの骨折は、放射線学的に見ることはまずありません。 さらに、いくつかのオペレータは、頭蓋骨が背骨に完全に付着していないと感じられるまで引っ張ることを記述し、これは私たちが私たちの施設で教 この練習はcdが他の安楽死の技術（例えば、麻酔の過量）の後で使用されるが、このより長く、より遅いプロシージャによりまだ意識不明動物で付加的な苦痛

死後x線撮影は、イベント後の安楽死の成功を評価する役割を果たす可能性がありますが、この技術は労働集約的であり、慎重に解釈する必要があ 我々は、十分な気晴らしがなければ、無傷の靭帯が頭蓋骨を背骨に十分に近づけて、場合によっては正常な脱臼を隠すことができることを懸念していた。 死体を伸ばすために緊張が適用されたときに死後のx線写真を解釈するのが最も簡単であることがわかりましたが、そうすることでc2とC3の椎体の間に疑わしいギャップが生じ、慎重な評価が必要でした。 陰性のCO2のみのコントロール（図2）は、病変を正常と区別するのに有用であった。 呼吸停止までの時間を「ゴールドスタンダード」として設定した場合、子宮頸部x線撮影では71％の陽性予測値しか得られませんでした。 したがって、放射線撮影が品質管理またはスキル評価ツールとして使用される場合、失敗した安楽死のいくつかのインスタンスが見逃されます。

すべての失敗した安楽死は胸部または腰部の病変（またはその両方）を有していたのに対し、成功した安楽死の50の64も同様であった。 胸部病変または腰部病変の存在は貧弱な手技の診断ではないと結論した。 さらに、180-sエンドポイントに行った11のCD動物のいずれも観察可能な子宮頸部病変を持っていませんでした。 対照的に、64の成功したCDケースの63はそうした、と観察可能な子宮頸部病変（図3）を欠いていたマウスは、微妙な病変の誤診を反映したり、十分に重度の遠位脊髄外傷が呼吸停止を引き起こす可能性があるという証拠として役立つ可能性があります; 実際、胸部脱臼群の2匹のマウスは、別の技術が適用される前に、最終的に呼吸停止を達成した。 さらに、6CDマウスは失敗した安楽死を受けたが、180-sエンドポイントの前に死亡したにもかかわらず、x線撮影は、これらのマウスの5で子宮頸部病変を明らかにした。 中間傷害は、放射線学的に明らかであるが、最終的には致命的であるが、結果を”良い死”として修飾するにはあまりにも延長される可能性があるため、x線誤診が可能である。’

私たちは、私たちの研究にいくつかの制限を認識しています。 我々は、マウスにおけるCDのすべての記載または可能な変異を実行しませんでした。 我々は、脱臼後の無傷の脳機能を分析するために脳波または他の測定を使用しようとしなかった。 意識への復帰の可能性を評価するために、麻酔マスクから呼吸動物を除去しなかった。 0秒を超える呼吸停止までの時間の存在は、少なくとも最小限の無傷の脳機能、”良い死”と矛盾しているように見える状態を示唆している;我々は呼吸停止までの時間が0秒であるときの死の質に関するデータを提示していない。

私たちが指摘した演算子の効果は、さらなる調査が必要です。 2人のオペレータだけでは、その効果はオペレータの年齢、訓練、強さ、または他の要因の違いに帰することができませんでした。 おそらく、他の事業者は成功率が異なるでしょう。 オペレータの効果をより完全に調べるためのフォローアップ研究は、採点されていたさまざまなオペレータの知識と、この知識がパフォーマンスに与える影 より成功したオペレータがまだケースの8.1％で失敗したことが懸念を提起します。

さらに、x線診断は通訳効果の対象となる可能性があります。 正確な放射線診断のための”ゴールドスタンダード”がなければ（例えば、安楽死の成功に目に見える病変がないことは、その部位での脊髄骨折または脱臼が迅速な死に必要ではないこと、または放射線技師が病変を逃したことのいずれかを意味する可能性がある）、通訳効果の可能性を探ることができなかった。 プレーンフィルムｘ線写真を用いたパイロット作業は，ｘ線写真を読んでいるいくつかの獣医師の間で診断に適度な不一致を明らかにした。

最後に、すべてのマウスは、人道的な理由からイソフルラン麻酔下で脱臼しました。 麻酔薬は筋緊張を廃止したため，この方法は安楽死の唯一の方法としてＣ ｄをモデル化するよりも死後Ｃ Ｄをモデル化することができる。 それが呼吸の抑制剤であるので、isofluraneはある中間ケースの呼吸の停止を急がせたかもしれません。 神経保護剤として、イソフルランは死を遅らせた可能性がある。 いずれにしても、イソフルランの使用は、その評価を行うために麻酔薬から離乳したことがないため、まだ呼吸に失敗した症例で潜在的な意識を評価

我々は、CDの3つの方法は、マウスが転位を試みた後に呼吸を続ける安楽死に失敗する可能性があると結論づけている。 私たちは、意識や痛みの知覚がこの結果に付随するかどうかを述べることはできません。 麻酔マウスの練習は、研修生の成功の尺度として設定された呼吸停止までの時間で、有用な訓練方法である可能性があります。 レントゲン写真は麻酔されたマウスの練習の観察より報知的でないようである労働集約的な技術査定用具である。 追加の研究が我々の調査結果を再現する場合、推奨される慣行は、麻酔されていないマウスのCDを禁止するか、より高い成功率を持つCDメソッドを特定するか、またはマウスがCDの後に密接に監視されなければならないことを強調するか、まだ呼吸している場合（CDに続くことが多い運動排出を考えると確認するのが難しい場合があります）、同じまたは代替の安楽死の方法で直ちに治療するかどうかを変更する必要があります。