単一細胞レベルでのIfn Γ、CD1 0 7およびCD1 3 7の相関を使用して、免疫療法後の患者におけるT細胞応答をモニターすることができる。

免疫療法が様々な癌の治療においてますます重要になるにつれて、治療の有効性を反映するために免疫応答を監視することもますます重 以前は、低悪性度濾胞性リンパ腫(FL)のワクチンを受けている患者における腫瘍抗原特異的体液性応答は、腫瘍退行、分子寛解、無増悪生存(PFS)および全生存(OS) 対照的に、T細胞免疫応答は、検証することが困難であった。 T細胞増殖アッセイは、主に、cd4T細胞応答を測定する;一方、CD8T細胞は、免疫療法によって生成された重要なエフェクターであり得る。 しかし、cd8T細胞を測定するように設計されたアッセイ、すなわち クロム解放CTLの試金、およびIFN-γ ELISPOTおよび細胞内の流れのcytometry試金は、再生可能にしにくいです。 この問題に対処するために、PBLをFL患者から得、凍結保存し、解凍し、次いで、フローサイトメトリーによる細胞内IFN−γの検出のための標準化された方法を設 可溶性抗CD3抗体および抗CD2 8抗体の組み合わせ刺激は、堅牢な刺激を提供し、典型的には、正常なPBL CD8+t細胞の約5%が応答する。 刺激剤として照射されたB細胞リンパ腫細胞株のパネルを使用することにより、我々は、平均して、これらのT細胞の1–2%は、このアッセイで応答をマウント 驚くべきことに、FLを有するいくつかの患者からのCD8+PBL T細胞は、結合された抗CD3および抗CD28刺激ならびにアロ刺激、それぞれ15〜22%および2〜6% この応答は、マルチカラーフローサイトメトリーによって示されるように、細胞の同じ集団におけるCD107、CTL脱顆粒の代理マーカーの表面発現を伴っていた。 IFN−γおよびCD1 0 7応答の両方が、抗クラスi抗体、W6/3 2によって阻害され、クラスi制限T細胞受容体媒介応答を示唆した。 さらに、後の時点で、これらのT細胞はまた、それらの表面上のCD1 3 7を上方調節した。 この活性化分子は、特異的抗原認識に応答してCD8T細胞上でアップレギュレートされ、細胞に抗アポトーシスシグナルを提供する。 結論として、FL患者から単離されたCD8T細胞の免疫能力は、B細胞リンパ腫細胞株のパネルによる同種刺激によって評価することができる。 さらに重要なのは、アロ刺激と特定の標的の両方に対する細胞の単一集団内の応答の3つの独立した指標(IFN-γ、CD107およびCD137)のフローサイトメトリーによる相関は、免疫応答におけるT細胞の役割のより良い理解につながる可能性がある。 最終的には、これらの応答は、リンパ腫におけるワクチンの臨床試験における患者の転帰で検証する必要があります。

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