要約

目的。 カンジダkruseiは外陰膣カンジダ症（VVC）のケースのおよそ1%を引き起こし、フルコナゾールに対して自然に抵抗力があります。 C.kruseiのvaginitisが再発伝染の患者の非fluconazole療法に、特に答えなければAntifungalテストは要求されるかもしれません。 デザイン。 ちつＣ．ｋｒｕｓｅｉ分離株の臨床特性と抗真菌感受性プロファイルを検討した。 2009年から2012年の間に、我々は560無関係なカンジダ属を同定した。-陽性の膣培養物、そのうちの28（5.0％）はC.kruseiであった。 これらの分離株は、宿主因子およびVVCの臨床形態に従って分析し、10抗真菌剤に対するそれらのin vitro感受性は、参照マイクロ希釈法を用いて試験した。 結果。 我々は、会陰裂傷と年齢の増加（>50年）は、膣サンプル（）におけるC.kruseiの有意な予測因子であったことを観察した。 すべての分離株はアンホテリシンＢ，カスポファンギン，ケトコナゾール，ミコナゾールに感受性であった。 さらに、感受性用量依存性および耐性率は、それぞれ42.9％および57.1％としてフルコナゾールのために発見された。 驚くべきことに、分離株のわずか42.9％と67.9％は、それぞれイトラコナゾールとボリコナゾールの影響を受けやすかった。 結論。 局所感受性パターン、特に非c.albicansカンジダ種のものを理解することは、効果的な抗真菌剤の選択を大幅に支援することができます。 様々な抗真菌治療薬に対するC.krusei膣炎のin vivo応答は未知のままであり、さらなる研究が必要である。

1. はじめに

外陰膣カンジダ症（VVC）は、カンジダ種の過増殖に起因する一般的な病気であり、すべての女性の75％が生涯にVVCのエピソードを経験すると推定 C.albicansは、世界中のVVCのすべてのエピソードの80-95％を占めています。 非c.albicansカンジダ種によるVVCの有病率は、以前に5から20％の範囲であった;しかし、報告された症例の数は、特にC.glabrataの症例のために、最後の二十年にわたって急 したがって、非Cの抗真菌耐性株の可能性がある。 カンジダ膣炎のアルビカンスカンジダ種は診療所で考慮されるべきである。 抵抗の出現は次の要因に帰因するかもしれません(i)店頭(OTC)の薬物の広まった使用;(ii)抑制アゾールの長期使用;および(iii)antifungal薬物のコースの頻繁な使用または(iv)信頼できる診断のための腟文化の増加の使用。 以下のことを示唆する証拠はありません: （i）特定の女性は、他の種よりも特定のカンジダ種による感染の影響を受けやすくなる可能性があるか、または（ii）急性VVC（AVVC）対再発VVC（RVVC）に女性を素因と

VVCはまた、まれではあるが、C.parapsilosis、C.tropicalis、およびC.kruseiによって引き起こされる。 ブロスマイクロ希釈法を用いて決定されたアンホテリシンBおよび5-フルシトシンに対する血流C.krusei分離株の感受性の低下はよく文書化されてい しかし、In vitro感受性試験は、Cの臨床応答を評価するために使用されていない。 クルセイ膣炎 さらに、膣C.krusei感染症については、比較的まれであるためほとんど知られていません。 しかし、c.kruseiは、最も一般的に使用される抗真菌薬の1つであるフルコナゾールに本質的に耐性があることが知られています。 C.krusei膣炎の徴候および症状は、他のカンジダ種によって引き起こされるVVC症例の徴候および症状と区別できないようである。 稀ではあるが，ｃ．ｋｒｕｓｅｉはＲＶＶＣの難治性原因である。 さらに、ほとんどの機関は、C.krusei膣炎の経験が限られていました。 したがって、本研究は、文献におけるこのギャップを埋めることを目的としている。 ここでは、遡及的にホストと危険因子を含む28膣C.krusei分離株の疫学的特性を分析しました。 さらに、我々はC.krusei膣炎を持つ女性の最も適切な治療上の選択（複数可）を決定するために10抗真菌薬にこれらの分離株の抗真菌感受性プロファイルを調

2. 材料および方法

2.1. 膣C.krusei分離株

我々は1,543無関係な女性からの膣サンプルを調べ、そのうちの560（36.3％）は培養陽性であり、983（63。7％）はカンジダ酵母の培養陰性であり、これらの症例の医療記録をレビューした。 560の膣酵母分離株の中で、C.albicansが最も一般的な種であり、242(43.2%)分離株で同定され、C.glabrataが155(27.7%)、c.kruseiが28(5.0%)、C.kefyrが20(3.6%)、115(20.5%)がカンジダのいくつかの種を表す。 彼らの膣にC.kruseiを持っていた女性が研究に含まれていました。 各群のVVCの臨床提示の定義は以下の通りであった: AVVC(グループ1),症候性膣炎の初期または散発的なエピソードを持つ現在無症候性の女性,すなわち,年間四回未満発生();RVVC(グループ2),年間VVCの四つ以上の臨床エピソードの病歴を持つ症候性の患者();コントロール(グループ3),偶然に完全に無症候性であり、RVVCの病歴を持っていなかった膣炎のない膣培養中のC.kruseiの正常なレベルを運んだ女性(). 対照群には、RVVCの既往がない無症候性女性と、陽性の文化を有する女性の混合群が含まれていた。 すべての参加者は、ライフスタイルや医療、婦人科、性的な歴史に関する質問を含む短いインタビューに参加しました。 この研究は、トルコのAdana、Çukurova大学のInstitutional Review Boardによって審査され、承認されました。 ヘルシンキ議定書の宣言に続いて、患者は書面によるインフォームドコンセントを提供した。

2.2. C.kruseiの同定

C.krusei分離株はCHROMagar Candida（Becton Dickinson、Heidelberg、ドイツ）で回収され、鈍い、平らな、軽い藤色から藤色、および白っぽい境界を持つコロニーとして現れた。 C.kruseiの同定のための基準は、37℃で2時間でヒト血清中の胚管産生の欠如、コーンミール-トゥイーン80寒天（Difco、デトロイト、MI、米国）上のいくつかの中等度の分岐と豊富なpseudohyphaeの産 これらの分離株を、ＡＰＩ２ ０Ｃ ＡＵＸ法（Ｂｉｏｍｅｒｉｅｕｘ，Ｍａｒｃｙ ｌ’Ｅｔｏｉｌｅ，Ｆｒａｎｃｅ）を使用して、それらの同化パターンによって検証した。 Ｃ．ｋｒｕｓｅｉ ＡＴＣＣ６ ２ ５ ８を陽性対照として使用した。2.3.

抗真菌感受性試験

2.4。 統計分析

データは、IBM SPSSバージョン19を使用して分析しました。 年齢や体格指数などの連続変数は、最初にビンに分割されました：<><>ボディマス指数のdiv>25（太りすぎまたは肥満）。 次に、すべてのカテゴリ変数をCによって交差分類した。 カイ二乗検定を使用して変数間の関連付けを記述的に要約し、95%の信頼区間を持つオッズ比を使用して関連付けの程度を測定するためのkrusei感染または 多変量解析のために、バイナリデータ（C.krusei感染、キャリア、またはどちらも）のロジスティック回帰モデリングは、モデル内の他の要因を調整した後、C.krusei感染の有意な予測子を決定するために使用されました。 有意水準を持つ因子<0。30は、C.krusei感染の予測に同時に各因子の有意な効果を決定するために多変量ロジスティックモデルに入力されました。 Ｃ．ｋｒｕｓｅｉ感染の予測には他の因子は有意に寄与しなかった。

3. 結果

C. 2009年から2012年までチュクロワ大学産婦人科医学部を訪問した免疫不全の既往のない非妊娠患者（）、妊娠患者（）、糖尿病患者（）、避妊患者（）から回収された。 C.krusei分離株のうち、24（85.7％）はプレート上の唯一の種であり、四つ（14.3％）は常にC.albicansによって含まれていた混合培養の一部であった。 私たちのグループでは、24（85.7％）の女性は閉経前であり、4人（14。またホルモン補充療法を露出したpostmenopausal期間の3%）。 女性の平均年齢は年（範囲、21-59歳）であった。

膣C.krusei分離株を有する女性の基本的な人口統計学的および臨床的特徴を表1および2に示す。 会陰裂傷は、非C.krusei群と比較してC.krusei群で有意に高い（表2）。 多変量解析によって明らかにされたように、会陰裂傷の存在（）と50歳以上の年齢（）は、C.krusei膣炎またはキャリア状態の有意な予測因子であった（表3）。

C.krusei ATCC6258およびC.parapsilosis ATCC22019の対照株のMIC結果は許容範囲内であった。 すべてのC.krusei分離株は、アンホテリシンB、カスポファンギン、ケトコナゾール、およびミコナゾールに感受性であり、10 28分離株（35.7％）の5-フルシトシンのS-DDとし フルコナゾールでは高いMIC率が観察され、そのうち分離株の42.9％がS-DDであり、57.1％が観察された。 驚くべきことに、分離株のわずか42.9％と67.9％は、それぞれイトラコナゾール（六つのS-DDと10）とボリコナゾール（四つのS-DDと五）に影響を受けやすかった。 また，ｅｃｏｎａｚｏｌｅとｓｕｌｃｏｎａｚｏｌｅについても低ＭＩＣレベルを観察した。 AVVCおよびRVVC患者から単離されたC.kruseiの抗真菌感受性は、膣炎の症状のない女性群から単離されたものと有意に異ならなかった（;表4）。

4. 議論

我々の知る限りでは、この研究は、排他的にマイナー分離C.kruseiのためのホストと危険因子、および抗真菌感受性の有病率を調査するための最大のシリー また、Cを持っていた女性のベースラインと人口統計学的特性を簡単にまとめました。 彼らの膣サンプル中に存在するkrusei（表1および2）。 我々のデータは、C.kruseiの有病率は、この集団では比較的高い（5.0％）であり、特定のホストの好みを表示せず、最も頻繁にRVVCに関連していたことを示唆している。 会陰裂傷および年齢の増加（>50年）は、c.krusei膣炎の有意な予測因子であった（表2および3）。 本研究の重要な制限は、C.krusei膣炎におけるin vivo治療薬の選択と転帰に関するデータの欠如です。 また、Cを持つ女性の数。 kruseiは非常に小さいので、私たちが調べた他の要因のいくつかについては、この研究では差を検出するのに十分なパワーがなかった可能性があります（表1-3）。

混合培養の存在は、治療戦略の選択に影響を与える可能性がある。 我々の以前の研究では、発色培地を使用して、我々は、膣サンプルから回収された混合培養の割合がアダナ、トルコで14.1％と高かったことを決定した。 この調査の結果（14.3％）は、以前の研究の結果と同様です。 また、私たちの発見は、高齢の女性（平均年齢、40。3年）は感染の影響を受けやすく、Singhらの以前の発見を裏付けている。 （平均年齢、44歳）。 しかし、Singhらによって研究された女性。 すべてがRVVCを有していたが、我々の研究はRVVC症例だけでなく、AVVCとコントロールも含まれていた。 これらの著者らは、C.krusei分離株はフルコナゾール（MIC90>64μ g/mL）に対して非常に耐性があり、我々の知見と一致していることに留意した。 さらに、これらの著者らは、我々が観察しなかった最も一般的に使用されるOTC抗真菌剤の1つであるミコナゾール（MIC90>4μ g/mL） しかし，クロトリマゾールはＣ．ｋｒｕｓｅｉに対して最も活性な局所イミダゾールであることが観察された。 さらに，さらに重要なことに，アンホテリシンＢ，カスポファンギン，イトラコナゾールおよびボリコナゾールは良好な抗真菌活性を有することが示されたが，いくつかの株は後者の二つの薬剤に対して明らかに高い耐性を示した。 注目すべきことに、著者らは、使用される薬剤にかかわらず、治療を2-6週間継続すべきであることを示唆した。 一方では、最近の調査はfluconazole抵抗力があるc.albicansが医院で出現するようであることを報告しました。 したがって，抗真菌感受性試験は，非Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓカンジダ膣炎だけでなく，まれなフルコナゾール耐性ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ膣炎に対しても適切な治療薬を選択するのに役立つ可能性がある。

この調査では、アンホテリシンB、カスポファンギン、ケトコナゾール、およびミコナゾールは、すべてのC.krusei分離株に対して活性であることが観察された（表4）。 Singh et al.の発見とは対照的に。 るが、Ｒｉｃｈｔｅｒらのものに沿ったものである。 、イトラコナゾールは、高いS-DDと率、それぞれ35.7％と21.4％を示した。 新しい広域スペクトル経口抗真菌ボリコナゾールはほとんどVVC患者で使用されていないが、我々は分離株の67.9％がボリコナゾールの影響を受けやすいこ Pfallerら。 より高い割合を報告し、81.5％の426生殖器c.krusei分離株はCLSI M44-aディスク拡散法を用いてボリコナゾールの影響を受けやすかったことを示した。 私たちの調査結果によると、Lyon et al。 フルコナゾール耐性率は、ボリコナゾールに対する耐性を非常に予測していたことを報告した。 Econazoleおよびsulconazoleの感受性のための特定の臨床カットオフポイントがまだ割り当てられていないが、私達は両方の薬剤の低いMICの価値を観察しました。 ナイスタチン坐剤およびホウ酸は、c.krusei膣炎のための選択の治療法である可能性がある。

本研究は、C.krusei膣分離株の抗真菌薬耐性プロファイルおよび感染の疫学的危険因子を調査するためにこれまで最大のものです。 この調査では、会陰裂傷と年齢の増加（>50年）は、Cの重要な予測因子であった。 krusei膣炎またはキャリアの状態（表3）。 また，日常的に安全に処方できる局所イミダゾール（ケトコナゾールおよびミコナゾール）は，すべてのＣ．ｋｒｕｓｅｉ分離株に対して有効であることを明らかにした。 さらに、膣C.krusei分離株は、他の抗真菌治療薬よりもイトラコナゾール（42.9％）とボリコナゾール（67.9％）の影響を受けやすかった。 これらの知見は、c.krusei膣炎のin vivo治療治療に影響を与える可能性がある（表4）。 これにより、Cの同定が可能となる。 腟のサンプルおよび生体外のantifungalテストのkruseiは適切なantifungal代理店および療法の持続期間の選択で助けます。 C.krusei膣炎を有する女性に対する現在の薬物のin vivoでの有効性を決定するための将来の臨床試験が必要である。

利益相反

著者らは、この論文の出版に関して利益相反はないと宣言しています。

謝辞

この研究のための資金は、トルコのアダナのÇukurova大学とトルコのAnkaraのGazi大学から受領されました。