Un conteggio delle cellule vitali è essenziale per valutare la cinetica della crescita cellulare. Poiché l’emocitometro è stato utilizzato per la prima volta per il conteggio delle cellule del sangue, sono state sviluppate diverse varianti della metodologia per ridurre il tempo di analisi e migliorare l’accuratezza attraverso l’automazione sia della preparazione del campione che del conteggio. L’implementazione di successo di tecniche automatizzate si basa sulla regolazione della colorazione cellulare, dei parametri di visualizzazione delle immagini e della morfologia cellulare per ottenere precisione, accuratezza e linearità equivalenti rispetto all’emocitometro. In questo studio abbiamo condotto la validazione di tre metodi basati sull’esclusione del blu di tripano: manuale, semiautomatico e completamente automatizzato; che sono stati utilizzati per la stima della densità e della vitalità delle cellule impiegate per la biosintesi e i saggi biologici delle proteine ricombinanti. I nostri risultati hanno mostrato che gli attributi valutati sono rimasti nello stesso intervallo per i metodi automatizzati rispetto al manuale, fornendo un’alternativa efficiente per l’analisi di un numero enorme di campioni.