The Breakdown of Cell Membrane by Electrical and Mechanical Stress

Abbiamo cercato di determinare se la tensione meccanica e la coppia di stress elettrico causassero la rottura della membrana nelle cellule. Utilizzando patch cell-attached da celle HEK293, abbiamo stimato la tensione prodotta meccanicamente dalla pressione applicata e dalla geometria della patch. Impulsi di tensione di ampiezza crescente sono stati applicati fino a quando abbiamo osservato un improvviso aumento della conduttanza e della capacità. Per impulsi di durata di 50 µs, la ripartizione richiedeva > 0,5 V e dipendeva dalla tensione. Per impulsi di durata 50-100 ms, la rottura richiedeva 0,2-0,4 V ed era indipendente dalla tensione. Apparentemente due processi fisicamente diversi possono portare alla rottura della membrana. Potremmo spiegare la risposta agli impulsi brevi e ad alta tensione se si verificasse una rottura nel doppio strato lipidico. L’energia elettromeccanica critica per unità di superficie per la ripartizione da impulsi brevi era di dyn 4 dyne / cm, in accordo con i risultati precedenti su bistrati. I nostri dati suggeriscono che, almeno in una patch, il doppio strato può contenere una frazione significativa (4 40%) della tensione media. Per essere compatibile con i grandi cambiamenti di area non lytic dei cerotti, il doppio strato sembra essere tirato verso la punta della pipetta, forse dalle forze idrofobiche che bagnano le proteine di membrana legate al vetro. Sebbene le tensioni di rottura per gli impulsi lunghi fossero in accordo con i precedenti lavori sulle alghe, i meccanismi per questa rottura rimangono poco chiari.

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