I risultati ottenuti in questo studio sono unici e originali, in Brasile. I risultati hanno dimostrato che la precedente radioterapia potrebbe introdurre importanti cambiamenti morfologici che inibiscono la classificazione specifica delle alterazioni cellulari e favoriscono la categorizzazione citologica dell’incertezza.
Nel nostro laboratorio, abbiamo introdotto il concetto di controllo di qualità interno in citologia supportato da un metodo di analisi automatizzato al fine di migliorare l’interpretazione citologica, riducendo teoricamente gli errori di classificazione citologica. La soggettività dello screening manuale eseguito dai citotecnologi è stata esaminata in modo critico e accurato, ei risultati ottenuti in questo studio forniscono dati interessanti per supportare un cambiamento significativo nel paradigma della prevenzione del cancro cervicale nel nostro ospedale, in cui l’automazione può servire contemporaneamente come opzione per lo screening primario e/o come strumento importante per il controllo di qualità interno I nostri risultati hanno dimostrato, tuttavia, che lo screening automatizzato offre prestazioni diagnostiche simili a quelle del metodo manuale, anche nei casi di lesioni di alto grado, se eseguite da professionisti altamente qualificati. Questi risultati hanno permesso di introdurre il sistema automatizzato FPG nel protocollo di routine del laboratorio di citologia del Dipartimento di Patologia dell’Ospedale per il cancro di Barretos.
La valutazione citologica post-radiazioni effettuata nel presente studio ha offerto dati sostanziali riguardanti la qualità e le limitazioni dell’esame citologico mediante apparecchiature automatizzate. Le frequenze delle lesioni riscontrate dopo la radioterapia erano le seguenti: ASC (ASCUS, ASC-H e AGC), 6,1%; LSIL, 2,9%; e HSIL o peggio, 4,5% letto manualmente e letto sotto orientamento FPG erano: ASC 8,2%, LSIL 2,9% e HSIL o peggio 4,8%. Questi risultati sono diversi da quelli ottenuti da Wright e colleghi , che hanno riportato frequenze più basse di HSIL o peggiori del nostro studio (ASCUS, 5.1%; LSIL, 1.0%; HSIL, 0.3%; e carcinoma, 0.7%). I nostri risultati sono anche diversi da uno studio italiano, dove le frequenze variavano dal 9,2% per il cancro a 13.8% per cellule squamose atipiche di significato indeterminato . Queste grandi variazioni tra gli studi sottolineano chiaramente le difficoltà di categorizzare gli effetti indotti nelle cellule cervicali dalle radiazioni. Lo studio bioptico di queste alterazioni (Tabelle 3 e 4), tuttavia, riflette la sottovalutazione e la sovrastima che questi effetti ionizzanti inducono, poiché la maggior parte dei risultati citologici non sono corroborati dalla valutazione istopatologica. Nel nostro studio, numerosi casi di lesioni di alto grado post-radiazioni identificate dalla citologia non sono stati confermati dalla biopsia. Questo risultato dimostra che le alterazioni citologiche non corrispondevano a modificazioni tissutali compatibili con la diagnosi di lesioni intraepiteliali. Di conseguenza, sono necessari metodi ausiliari per la diagnosi e il monitoraggio dei pazienti post-radioterapia per evitare pazienti allarmanti e l’esecuzione di biopsie invasive non necessarie.
È anche importante sottolineare che lo screening manuale in questo studio si è verificato in condizioni di routine, ma per gli screening automatizzati, che sono stati eseguiti quasi un anno dopo le diagnosi iniziali, i citotecnologi hanno letto tutti i vetrini accecati di qualsiasi informazione clinica e laboratoriale del paziente (incluso lo stato RT), che potrebbe certamente aver influenzato la classificazione morfologica. Ciò è particolarmente vero per alterazioni citologiche dubbie che si riscontrano frequentemente nei casi di alterazioni dell’atrofia cellulare e preparati citologici post-radioterapia. Per questo motivo, le analisi di diagnostica riproducibilità sono stati eseguiti separatamente per i pazienti che hanno avuto e non erano stati sottoposti a RT.
L’accordo tra il manuale e automatizzato le tecniche di screening hanno dimostrato che c’era un sostanziale accordo tra i cytotechnologists per quanto riguarda i pazienti che non erano stati sottoposti a RT, ma il livello di accordo di varia sensibilmente per i pazienti che erano stati sottoposti a RT, che vanno da un sostanziale accordo per quanto riguarda ASC-H e LSIL classificazioni a moderata accordo per HSIL classificazione. Non sorprendentemente, i risultati hanno mostrato valori di kappa simili tra tutti gli osservatori ad eccezione dei casi di lesioni di alto grado in pazienti sottoposti a RT, che hanno prodotto valori di kappa inferiori. Si prevede una minore concordanza dai campioni dei pazienti dopo la RT a causa del pregiudizio indotto dalle radiazioni, che favorisce la categorizzazione citologica dell’incertezza.
Al meglio delle nostre conoscenze, non è stato riportato nessuno studio incentrato sull’uso di FPG in campioni cervicali post-radioterapia. Pochi studi recenti che valutano la riproducibilità dello screening citologico utilizzando preparati a base liquida hanno dimostrato risultati interessanti con la digitalizzazione delle immagini. Tsilalis e colleghi hanno studiato le prestazioni di un gruppo di patologi che hanno analizzato le immagini citologiche digitali; questo stesso gruppo ha rivalutato le stesse immagini dopo 12 e 24 mesi, e l’accordo tra le letture variava da sostanziale a eccellente, con valori di kappa variabili tra 0,79 e 0,97. Attraverso il programma di qualità in Austria, i pap test di pazienti con carcinoma cervicale invasivo raccolti nei 5 anni precedenti al rilevamento della malattia sono stati rivalutati. I valori di kappa trovati tra le letture originali e rivalutate delle diapositive erano solo moderati .
Una riproducibilità moderata è stata la scoperta più comune nei rapporti relativi alle interpretazioni interobserver di citologia cervicale in diversi scenari . Il nostro studio ha dimostrato dati interessanti riguardanti le prestazioni dei citotecnologi, poiché la maggior parte dei risultati ha mostrato una sostanziale riproducibilità. Inoltre, la riproducibilità significativa con diversi valori kappa tra le due tecniche di screening mostra che la sostituzione dello screening manuale con lo screening automatizzato non causa la perdita di casi positivi, con alti livelli di accordo tra lo screening manuale e automatizzato.
La citologia a base liquida ha anche un valore aggiuntivo introducendo l’approccio di biologia molecolare tra diverse lesioni provenienti da diverse regioni con diversi tipi di campioni citologici. Da notare, la rilevanza dell’amplificazione hTERC può essere analizzata con la tecnica FISH associata a CIN3 più progressivo e carcinoma se presente nei casi positivi all’HPV nel materiale cervicale . Similmente, il modello genomico di amplificazione della prova umana del gene dell’RNA della telomerasi è stato dimostrato per essere altamente sensibile ed adatto a selezione cervicale del cancro in campioni conservati nel mezzo liquido, ma non la prova di C-MYC a causa della sua sensibilità più bassa . Sono attualmente disponibili nuove opzioni di colorazione cellulare per migliorare la qualità delle osservazioni dei protocolli di colorazione tradizionali . Nel prossimo futuro possiamo ipotizzare che questi nuovi strumenti di colorazione potrebbero essere utilizzati anche con l’assistenza ausiliaria dello screening computerizzato.
