Abstract
Fondo: Cyclin dependent kinase 7 (CDK7) è stato riconosciuto come uno dei potenziali bersagli terapeutici in Myc-driven tumori. In precedenza, abbiamo sintetizzato l’inibitore selettivo irreversibile di CDK7 e abbiamo dimostrato una significativa inibizione della proliferazione delle cellule TNBC e HCC mediante down-regulation di c-Myc e MCL-1. Riportiamo inoltre YPN-005 dei dati preclinici con caratterizzazione biologica.
Metodi: L’attività antiproliferativa di YPN-005 è stata misurata in linee cellulari tumorali solide con amplificazione Myc e in cellule tumorali ematologiche con MCL-1overespressione. Per indagare il meccanismo d’azione di YPN-005, i livelli di espressione di fosfo-RNA polimerasi II, fosfo-CDK2 e-CDK4, BClXL, cleaved-PARP, c-Myc e MCL-1 sono stati analizzati da analisi Western Blot. L’occupazione di CDK7 è stata determinata utilizzando una sonda a piccola molecola biotinilata dopo l’incubazione di cellule TNBC, HCC, AML e hPBMC con YPN-005. L’efficacia terapeutica di YPN005 è stata valutata nel modello murino di xenotrapianto TNBC e HCC.
Risultati: apoptosi indotta dal trattamento YPN-005 e arresto del ciclo cellulare. La selettività di YPN – 005 su CDK7 è stata confermata nel test del pannello 468 chinasi. YPN-005 ha inibito significativamente la proliferazione di TNBC, ER+ cancro al seno, HCC, cancro ovarico, carcinoma polmonare a piccole cellule (SCLC), pancreas, prostata e vari tipi di cellule tumorali del sangue e IC50 sono stati determinati nell’intervallo 1-20 nM. L’inibizione della proliferazione cellulare è stata accompagnata dalla down-regolazione della fosforilazione di RNA PolII, dell’espressione di c-Myc e MCL-1. Il saggio di washout di Western Blot ha dimostrato che YPN-005 ha bloccato irreversibilmente la fosforilazione di RNA PolII. Inoltre, YPN – 005 downregulated il checkpoint immunitario adattivo PD-L1 dall’esaurimento di c-Myc in TNBCs. L’occupazione di CDK7 oltre il 90% è stata osservata nelle cellule TNBC, HCC e AML con 100 Nm di YPN-005. I modelli di xenotrapianto in vivo di TNBC e HCC hanno mostrato che la somministrazione orale giornaliera di YPN-005 per 21 giorni (una volta e 10~20 mg/kg) ha inibito efficacemente la crescita del tumore. Tutti i topi sono sopravvissuti e non ci sono stati cambiamenti significativi nei loro profili ematologici.
Conclusione: I nostri risultati suggeriscono che YPN-005 è un inibitore CDK7 disponibile per via orale, potente e selettivo che può essere utilizzato per il trattamento di pazienti oncologici Myc e MCL-1 sovraesprimenti. Questi dati supportano la logica per far avanzare YPN-005 verso studi IND-enabling.
Formato di citazione: Jakyung Yoo, Jun Hee Lee, Mi Jung Lee, Kang Woo Lee, Ji Eun Min, Jinhwan Kim, Ki-Nam Min, Da-Hye Jeon, Dae Seong Lim, Kwang-Ok Lee. YPN-005, un inibitore orale di CDK7, mostra un’attività antitumorale significativa nei tumori solidi amplificati Myc e nel cancro del sangue sovraespresso MCL-1 . In: Atti della riunione annuale dell’Associazione americana per la ricerca sul cancro 2020; 2020 Apr 27-28 e Jun 22-24. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2020; 80 (16 Suppl): Abstract nr 4849.
