továbbfejlesztett kisléptékű folyamatos termesztési rendszer
ebben a tanulmányban bemutatjuk a Klein et al. , az egyes reaktorok fokozott párhuzamosítása és jobb kezelése, valamint ellenőrzése érdekében. A rendszerben végrehajtott változtatások fő szempontjai közé tartozik a párhuzamos tenyésztőedények készletének növelése 8-ról 24 reaktorra, valamint az üzemi térfogat 10-ről 6,5 mL-re történő csökkentése. A jelenlegi rendszer továbbá egyedi gyártású fedelekből áll, amelyek négy rögzített portot tartalmaznak, amelyeket levegőztetésre, közegellátásra, húsleves eltávolítására, valamint oltásra vagy mintavételre használnak (ábra. 1). A négy port mellett a fedélen keresztül egy optikai rúd alakú DO szondát helyeznek be a do monitorozáshoz a termesztési folyamat megzavarása nélkül, ily módon helyettesítve az előző beállítás oxigén fluoreszcens érzékelő pontját . A vízfürdőt, amely az előző beállításban állandó művelési hőmérsékletet tartott fenn, egy egyedi gyártású alumínium fűtőblokk váltotta fel, amelyet egy mikrolemez keverőegységhez olvasztottak. Mivel a kisméretű bioreaktor rendszer korábbi verzióját a Schizosaccharomyces pombe hasadási élesztő segítségével validáltuk, itt bemutatjuk a S. cerevisiae termesztések továbbfejlesztett termesztési beállítását.
Az alapvető működési lépéseket, valamint a hígítási sebességek beállítását a megfelelő csőátmérő és a közegbeáramló szivattyú szivattyúsebességének kiválasztásával a korábban leírtak szerint végeztük el . Itt az egyes bioreaktorok folyadéktartalmának tömegét gravimetrikusan határoztuk meg a termesztés végén, lehetővé téve a megfelelő hígítási sebesség pontos kiszámítását a 5.1% eltérés. A táptalajt és a reaktor gázfázisát a reaktorfedél ugyanazon nyílásán keresztül távolítottuk el az efflux szivattyú segítségével (ábra. 1). Az összes termesztési kísérlethez 7,5 mL min−1 Efflux szivattyú sebességet használtunk. Az efflux szivattyú sebessége messze meghaladta az etetőszivattyú sebességét, enyhe negatív nyomást generálva a tenyészedényben. Ez a nyomáskülönbség a levegő beáramlását eredményezte a levegőztető nyíláson keresztül. A kLa átlagos oxigéntömeg-átviteli együtthatója 110 h−1 volt, ami a termesztési folyamat során jóval 30% – os telítettség feletti DO-szintet tett lehetővé. A pH-t nem monitorozták online, sem a termesztés során nem szabályozták, mivel a tápközeget a priori 6,0 pH-ra állították be, ami a végső pH-t eredményezte 5,5 a termesztési húslevesben. A pH-t a reaktorok kiáramlásától és a betakarítás után napi szinten mértük. A pH állandó maradt az egyensúlyi állapot elérésekor, és a reaktor szennyvize 0,1 pH-egység kis eltérést mutatott (az adatok nem szerepelnek).
A 3-HP termelés feltárása kisüzemi kemosztatikákban, különböző hígítási sebességgel, C-limitáló körülmények között
a maximális fajlagos növekedési ütem (6max) meghatározásához a S. cerevisiae ST938-at szakaszos körülmények között tenyésztettük, túlzott tápanyag-rendelkezésre állást alkalmazva. A glükóz szénforrásként történő felhasználása esetén a 6,265 h-1, A biomassza hozama 24,9 g mol−1, a glükóz 3 LE szénhozama pedig 0,6% C-mol volt (1.táblázat). Ebben a termesztési módban a szén nagy része etanollá és CO2-vá metabolizálódott , mivel a vad típusú S-ben magas glikolitikus fluxus alakult ki. a cerevisiae szorosan kapcsolódik az alkoholos erjedéshez . A kemosztát termesztéseket egy növekedést korlátozó szubsztrát ellátása szabályozza. Egyensúlyi állapotban a vad típusú S. cerevisiae nem termel jelentős mennyiségű túlfolyó metabolitot egy bizonyos növekedési sebesség alatt, jelezve a kritikus hígítási sebességet (Dcrit (h−1)) A szénforrás felhalmozódásának hiánya miatt. A kritikus hígítási sebességnél vagy annál magasabb szénforrás halmozódik fel a reaktorban, és a túlfolyó anyagcsere beindul, ami különböző melléktermékek, például etanol, acetát és kisebb mennyiségű szerves savak előállítását eredményezi . Ennek megfelelően folyamatos tenyészeteket használtunk a növekedési ütem és a biomassza-specifikus 3-HP termékképződés közötti kapcsolat vizsgálatára az S. cerevisiae ST938-ban. A négy különböző hígítási arány D (h−1): 0,04, 0,09, 0,17 és 0,21 úgy választottuk meg, hogy a szakaszos termesztésben meghatározott S. cerevisiae st938 törzsben a 6max alatt legyen. Megvizsgáltuk a glükóz biomassza hozamát, valamint a 3 HP hozamot, a specifikus 3 HP termelési sebességet és a specifikus szubsztrát felvételi sebességet (ábra. 2a-d, 1. táblázat). Az összes vonatkozó termesztési paramétert, azaz a hozamokat és a rátákat a megfelelő szórásokkal, az 1. táblázat foglalja össze.
Selected rates and yields for C-limited aerobic chemostat cultivations of S. cerevisiae ST938 a 3-HP yield (C-mol C-mol−1) on glucose, b biomass yield on glucose (g mol−1), c specific 3-HP production rate (mmol gCDW−1 h−1) and d specific glucose uptake rate (mmol gCDW−1 h−1) at different dilution rates for S. cerevisiae ST938. Cultivations were carried out in triplicates at 30 °C and pH 5.5 under C-limited conditions. A hibák háromszoros tenyésztésből származó szórásoknak felelnek meg
A S. cerevisiae ST938 tenyésztése C-korlátozó körülmények között a szakaszos üzemmódban megfigyelt túlnyomórészt fermentatív metabolizmusról a kemosztatikumok légzőszervi metabolizmusára váltott, ami a magasabb biomassza hozamokban, valamint az elhanyagolható etanol-és glicerinképződésben tükröződik (1.táblázat). Továbbá, kisebb mennyiségű maradék glükóz alatt 0.A különböző reaktorok kiáramlásából vett mintákban 1 mM-t detektáltunk, ellenőrizve, hogy a tenyészetek glükóz-korlátozottak-e. Úgy tűnt, hogy az egyensúlyi állapotú kemosztát tenyészetekben a szén-dioxid-korlátozott körülmények elősegítik a 3-HP képződését, mivel ennek a terméknek a hozama 20-25 – ször magasabb volt, mint a kötegelt tenyészetben meghatározott hozam (1.táblázat). Ez valószínűleg annak köszönhető, hogy a szén hatékonyabban alakul át energiává ATP formájában a légzés során, összehasonlítva a szakaszos tenyészetekben történő fermentációval. Érdekes módon az S. cerevisiae ST938 C-korlátozó körülmények között kiderült, hogy a csökkenő fajlagos növekedési sebesség mellett a 3 lóerős szénhozamok állandó növekedése figyelhető meg, a legmagasabb 3 lóerős 16,6% C-mol hozam 0,04 h-1 hígítási sebesség mellett figyelhető meg (ábra. 2a). A biomassza 3 lóerős hozama tízszerese a szakaszos tenyészetek hozamának, és több mint kétszeresére nőtt 0,19−ről 0,43 g gCDW−1-re azáltal, hogy a hígítási sebességet 0,21-ről 0,04 h-1-re csökkentette (1.táblázat). A 3-HP maximális fajlagos termelékenysége körülbelül 0,50 mmol gCDW−1 h−1 volt, 0,17 és 0 hígítási sebesség mellett.21 h−1, ami nagyjából négyszerese a szakaszos műveléseknél mért értéknek (ábra. 2c, 1. táblázat). A várakozásoknak megfelelően a fajlagos glükózfelvételi sebesség (qS) a magasabb hígítási sebesség mellett 0,51−ről 2,1 mmol gCDW−1 h-1-re nőtt (ábra. 2d). Ezek az értékek legfeljebb 20−szor alacsonyabbak a 10, 7 mmol gcdw−1 h-1 maximális specifikus glükózfelvételi sebességnél, amelyet a 6max-on figyeltek meg korlátozott glükóznövekedési körülmények között szakaszos üzemmódban (1.táblázat). A specifikus szubsztrátfelvételi sebességre és a biomassza hozamára kapott értékek 0 hígítási sebesség mellett.A 09 h-1 (1 .táblázat) megegyezett a vad típusú S. cerevisiae−vel végzett kemosztátkultúrák adataival 0,10 h−1 hígítási sebességgel, 1,1, illetve 1,25 mmol gCDW−1 h−1, illetve 0,49 g g-1 hígítással. Megállapítást nyert, hogy a szubsztrátonkénti biomassza-hozam a hígítási arány növekedésével növekszik, a vad típusú S. cerevisiae esetében azonban ez a paraméter általában állandó a Dcrit alatt, mindaddig, amíg a fenntartó anyagcsere jelentős szén-elnyelőt jelent, amely alacsony hígítási sebesség mellett csökkenti a biomassza hozamát . S esetében. a cerevisiae st938 törzs azonban úgy tűnt, hogy a szén, amely nem a biomassza képződésére irányult, bizonyos mértékben hozzájárult mind a 3-HP, mind a melléktermékek kialakulásához.
összefoglalva, a folyamatos tenyészetekben eltérő hígítási sebességgel tapasztalt különbségek, valamint a S. cerevisiae vad típusú hasonló beállításokkal összehasonlítva azt sugallják, hogy az integrált bioszintetikus út a 3-HP előállításához óriási hatással van az élesztő fiziológiájára, amelyet feltehetően adaptív stresszválaszok erősítenek. Végül, C-korlátozott kemosztát termesztés a legalacsonyabb hígítási sebességgel 0.A 04 h-1 a legmagasabb 3 lóerős szénhozamot eredményezte.
A nitrogén-és foszfátkorlátozás vizsgálata a megnövekedett 3-HP hozamok tekintetében kisléptékű kemosztát tenyészetekben
a S. cerevisiae ST938 C-limitáló körülmények között történő jellemzése után nitrogén – és foszfát – limitáló körülmények között tenyésztéseket végeztek, mivel korábban bebizonyosodott, hogy kedvezőek a különböző natív és nem natív metabolitok különböző organizmusokban történő előállításához . Itt a megfelelő nitrogén (N) és foszfor (P) korlátozás alatti termesztéseket vizsgáltuk a kisléptékű folyamatos termesztési rendszerben (ábra. 1) 0,04 h-1 beállított hígítási sebességgel, amely korábban a legmagasabb 3-HP szénhozamot eredményezte C-korlátozott körülmények között (1.táblázat). Az st938 élesztőtörzs n – és P-korlátozott fajtáitól való paramétereket és azok szórásait a 2.táblázat foglalja össze.
az n-és P-korlátozott termesztési körülmények között nem mutattak ki maradék ammóniumot vagy foszfátot a különböző reaktorok kiáramlásából vett mintákban, ellenőrizve a megfelelő szubsztrátkorlátozás tekintetében korlátozandó tenyészeteket (2.táblázat). Az n – és P-korlátozás alatt azonban kis mennyiségű, 0,63 és 0,19 mM-es reziduális glükózt mutattak ki (2.táblázat). A C-korlátozás alatt a maradék glükózszint jóval 0, 1 mM alatt volt (2.táblázat). Az N – és P-korlátokat alkalmazó termesztések 3 lóerős 17,7%-os, illetve 21,1%-os C-mol-hozamot mutattak ki, amely p-korlátozott körülmények között szignifikánsan magasabb értéket mutatott, mint a C-korlátozott termesztési körülményekre számított 3 lóerős 16,6% C-mol szénhozam (1., 2. táblázat). Hasonlóképpen, a 3-HP fajlagos termelékenysége jelentősen megnőtt az N-és P-korlátozott tenyésztéseknél, amelyek 0,22 és 0,23 mmol gCDW−1 h−1 értékeket mutattak, szemben a C−korlátozott kultúrákban elért 0,17 mmol gCDW−1 h-1 értékekkel. Ezenkívül a biomassza 3 lóerős hozama összehasonlítható 0,43 és 0 értékeket mutatott.44 g gCDW−1 C – és N-limitáló körülmények esetén, azonban a P-limitáció esetén 0,50 g gCDW−1 megnövekedett hozamot figyeltek meg. A számszerűsített melléktermékek összességében alacsony koncentrációja miatt ezek elhanyagolhatóak (2.táblázat). A C – és P-korlátozás specifikus szubsztrátfelvételi sebességének (qS) értékei hasonlóak voltak, és n−korlátozott körülmények között enyhén emelkedett 0, 61 mmol gCDW−1 h-1 értéket kaptunk. A szubsztrátonkénti biomassza-hozamok n-és P-korlátozott körülmények között hasonló, 72,4, illetve 75,2 g mol−1 értéket mutattak. Összehasonlítva a biomassza hozam 78.4 g mol−1 C-korlátozott körülmények között érhető el, ezek az értékek hasonlóak. Tanulmányunk alátámasztja azt az indoklást, hogy szubsztrátonként magasabb termékhozamot értek el N – és P-korlátozó körülmények között. Következésképpen úgy tűnik, hogy az n-korlátozás esetén a magasabb fajlagos szubsztrátfelvételi sebesség a melléktermékek minimális képződésével kombinálva végső soron a termékképződést részesítette előnyben. P-korlátozó körülmények között a legkevesebb melléktermék képződött, ami elősegítheti a termék szintézisét. Feltételezhető továbbá, hogy egyes anyagcsere-változások valószínűleg alacsonyabb szénmennyiséghez vezetnek CO2.
Összefoglalva, az N – és P-korlátozás alatt végzett kemosztátkultúrák a C-korlátozott körülményekhez képest megnövekedett 3 lóerős terméshozamot és fajlagos termelési arányt mutattak, a P-korlátozás pedig lehetővé tette a legmagasabb termékhozamot.
a kisléptékű kemosztatikumokban mért fiziológiai paraméterek átvitele táplált szakaszos tenyészetekbe 1-L próbapadi bioreaktorokban, C-és P-korlátozó körülmények között
mivel ez a vizsgálat a különböző tenyésztési körülmények között mért fiziológiai paraméterek átvitelének és összehasonlíthatóságának értékelésére irányult, a kemosztát tenyészetekben meghatározott C-és P – korlátozó körülményekből nyert tenyésztési paramétereket 1-L – es kevert próbapadi reaktorokba vittük át, amelyek táplált szakaszos üzemmódban működtek. Ennek a megközelítésnek a koncepciója tehát az volt, hogy a kemosztát és a takarmány-köteg tenyészetek legfontosabb feltételeit és paramétereit állandó értéken tartsák az összehasonlíthatóság biztosítása érdekében. Ezek a feltételek (i) ugyanazt a C:P arányt foglalták magukban, mint amelyet a P-korlátozó kemosztátkultúrákban alkalmaznak, (ii) azonos folyamatfeltételeket, például pH-t és hőmérsékletet, és (iii) ugyanazokat a fajlagos növekedési rátákat, mint amelyeket a kemosztátokban alkalmaznak, exponenciális takarmányprofil révén. A termék titerének optimalizálása érdekében a kemosztátkísérletekből származó szubsztrátonkénti maximális termékhozammal rendelkező paraméterek (D = 0.04 h-1) A C-és P-korlátozás alatt választottuk a fed-batch rendszerbe történő átvitelre. A felépítés technikai korlátozásai miatt a takarmány-szakaszos termesztéseket 0,05 h−1 növekedési sebességgel hajtották végre, ami valamivel magasabb, mint a kemosztátos termesztéseknél a beállított 0,04 h−1 hígítási sebesség. A táplált szakaszos termesztés egy kezdeti szakaszból állt a biomassza előállításához, amelyet egy exponenciális, tápanyag-korlátozott etetési szakasz követett a növekedési ütem szabályozására. Csak a takarmányozási fázist tekintették relevánsnak a folyamatos tenyésztési rendszerből kapott paraméterek átvihetőségének értékelése szempontjából, mivel a szubsztrát koncentrációja kizárólag ebben a fázisban volt kontrolláló, és így korlátozta a mikrobiális növekedést. Az S. cerevisiae ST938 C-és P – korlátozó feltételeket alkalmazó takarmány-szakaszos termesztési profiljait az ábra mutatja. 3, valamint a megfelelő termesztési paramétereket a megfelelő szórással együtt a 3. táblázat foglalja össze.
aerob táplált szakaszos termesztés az S. cerevisiae ST938 1-L asztali fermentoraiban egy exponenciális etetési rámpa alkalmazásával D = 0,05 h-1-nél a korlátozó szubsztrátum a szénnel vagy B foszforral. A fekete körök a biomassza titerre, a piros négyzetek a 3 lóerős titerre, a kék szaggatott vonal pedig a reaktorokba táplált glükóz abszolút mennyiségére vonatkoznak
a takarmány-tételes tenyészetekben megfigyelt biomassza hozam 77,9, illetve 67,7 g mol−1 volt a C – és P-korlátozás esetében. A C-limitált termesztések biomasszahozama összehasonlítható volt a kemosztát és a takarmány-köteg művelet között, míg a P-limitáció esetében enyhén csökkent biomassza-hozamot figyeltek meg a takarmány-köteg művelet során (2., 3. táblázat), amely a két biomassza-hozam esetében megfigyelt szórásokon belül van. A 3-HP szubsztrátonkénti szénhozama 15,9% volt a C-korlátozásnál, ami szinte azonos a kemosztát rendszerben kiszámított értékkel (ábra. 4a). Az ebben a vizsgálatban meghatározott 3-HP hozamok továbbá szorosan megegyeznek a szubsztrátonkénti 14% – os szénhozammal, amelyet a korábbi C-limited fed-batch vizsgálatokban kaptak 5,0 pH-n egy S. cerevisiae törzsnél, amelyet úgy alakítottak ki, hogy az a 63%-ot használja a malonil-CoA reduktáz-függő útvonal . Az Escherichia coli-val végzett vizsgálatok során szubsztrátonként magasabb 3-HP szénhozamot határoztak meg a a glükóz táplált szakaszos tenyésztése 42%-os értéket .
a termesztési paraméterek összehasonlítása különböző korlátozások mellett, amelyeket kisüzemi kemosztatikumokban és 1 literes próbapados reaktorokban határoztak meg adagolt üzemmódban. 3 lóerős szénhozam (%C-mol) és b 3 lóerős biomassza-hozam (g gCDW−1). A hibák megfelelnek a háromszoros kultivációkból származó szórásoknak
A P-korlátozó körülmények esetén azonban tanulmányunk a 3 lóerős szénhozam jelentős, 25,6%-os növekedését tárta fel (ábra. 4a). A biomasszán megfigyelt 3 LE hozam 0,38 és 0,65 g gCDW−1 volt a C – és P-korlátozó körülmények között. A C-korlátozás esetében ez megerősítette a kemosztát beállításban megfigyelt értékeket (ábra. 4b). A szubsztrátonkénti 3 HP hozam növekedése P-korlátozó körülmények között, valamint a szubsztrátonkénti biomassza hozam enyhe csökkenése miatt ugyanakkor a 3 HP / biomassza hozam jelentősen megnőtt a kemosztát kísérlethez képest. A kemosztatikumokban végzett termesztésekkel ellentétben az etanol vagy a glicerin jelentős felhalmozódását nem észlelték a táplált szakaszos termesztésekben. A zárt szénmérleg a C-és P-korlátozó feltételek esetében azt jelezte, hogy egyéb (melléktermékek)releváns mennyisége nem képződött (3.táblázat). Ez a melléktermék-spektrum különbsége magyarázhatja a glükózonkénti 3 HP hozam növekedését.
a kemosztatikumokkal végzett tenyésztésekhez képest a táplált kötegelt tenyészetekben meghatározott specifikus glükózfelvételi arányok szignifikánsan magasabb, 0,75 mmol gCDW−1 h−1 értéket mutatnak a C – és P-limitáló körülmények között. Mint fentebb említettük, a takarmányprofil exponenciális tényezőjének alapértékét 0,05 h−1−re állítottuk be, és 0,059 h-1-ig változtattuk, ami 30-45% – kal magasabb fajlagos növekedési rátát eredményezett a táplált szakaszos termesztésekben a 0-val végzett kemosztát kísérletekhez képest.04 h−1 (3.táblázat), ami fokozott specifikus glükózfelvételi sebességet okoz. Mindazonáltal a C-korlátozott fermentációk esetében a glükóz biomassza hozama összehasonlítható volt a kemosztát és a takarmány-tételes termesztés között. Hasonlóképpen, a fajlagos 3 lóerős termelési arány emelkedett a táplált szakaszos termesztésekben, 0,24 mmol gCDW−1 h−1, illetve 0,38 mmol gCDW−1 h−1. A szubsztrátonkénti 3 HP hozamok összehasonlíthatók voltak a kemosztát és a takarmány-tételes termesztés között, ami arra utal, hogy a hozamok robusztus termesztési paraméternek tekinthetők, amely ellenáll a termesztési beállítás kisebb ingadozásai által kiváltott zavaroknak. A különböző reaktorokból vett mintákban nem mutattak ki maradék foszfátot, valamint glükózt P-korlátozó körülmények között, megerősítve, hogy a tenyészetek korlátozottak a megfelelő korlátozás tekintetében. Hasonlóképpen, a C-korlátozás esetében nem észleltek maradék glükózt a mintákban.
az itt bemutatott fejlesztések egy kis léptékű chemostat rendszer, korábban kifejlesztett Klein et al. , többek között a reaktorok számának 24-re történő növelését, valamint a termesztési térfogat 6,5 mL-re történő csökkentését jelentette. Ez a megnövekedett fokú párhuzamosítás teszi a rendszert megfelelő nagy áteresztőképességű szűrőeszközré, mivel a különféle összehasonlítható kis léptékű kemosztát rendszerek nagyobb munkatérfogattal és alacsonyabb reaktorszámmal működnek: a folyamatos párhuzamos Megrázott bioreaktor (CosBios) rendszer hat, illetve nyolc párhuzamos tenyésztő edényt használ, 20-25 mL tenyésztési térfogattal . A folyamatos termesztéshez módosított egyszer használatos kevert tartályú bioreaktor rendszer (bioreaktor, 2mag AG) nyolc párhuzamos reaktorral működik 10 mL üzemi térfogaton . A mini-chemostat (Mc) rendszer által kifejlesztett Bergenholm et al. 16 párhuzamos reaktort tartalmaz, és 40 mL üzemi térfogatot igényel. Rendszerünk ezért jól alkalmazható a mikrobiális teljesítmény egyszerű és költséghatékony szűrésére folyamatos üzemmódban. Fontos lehet azonban, hogy a rendszer további paramétereket, például a kipufogógázokat figyelemmel kísérve további mértékben nyomon követhesse a széneloszlás részletes elemzését, ami különösen fontos a fiziológiai törzsjellemzések szempontjából.
mivel tanulmányunk azt javasolta, hogy az N – és P-korlátozás kedvező legyen a 3-HP képződéshez az S. cerevisiae-ben, a jövőbeni kísérletek magukban foglalhatják a növekedési ráták további szűrését n – és P-korlátozással annak érdekében, hogy megtalálják az optimális 3-HP termelést minden egyes korlátozással. Tanulmányunk tovább mutatta a fiziológiai paraméterek átvitele a kemosztátról a táplált szakaszos tenyésztésekre. Ez csak akkor valósítható meg, ha nem halmozódnak fel toxikus vagy gátló vegyületek a takarmány-tételes tenyésztés során, mivel a fiziológiai paraméterek idővel megváltoznak, és eltérnek a kemosztatikumokban megszerzett paraméterektől. Általános megközelítésként a kemosztátos kísérletek eszközként szolgálhatnak egy potenciális mérgező vagy gátló vegyület hatásának vizsgálatára azáltal, hogy az anyagot magához a takarmányhoz adják. Mivel az összes többi paraméter állandó, a vegyület hatása és koncentrációja közvetlenül értékelhető és értékelhető. Vizsgálatunkban nem észleltek melléktermékképződést a táplált szakaszos tenyésztésekben, és feltehetően hasonló stresszválaszt indukáltak a gyenge savak miatt, ami lehetővé tette, hogy a kis léptékű kemosztatikumok fiziológiai körülményei hasonlítsanak a táplált szakaszos körülményekhez.
összefoglalva, ez a tanulmány kimutatta, hogy a 3 – HP termelésének C-és P-korlátozó körülményeinek koncepcióját egy új, párhuzamos kemosztát termesztési rendszerben vizsgálták, és sikeresen át lehetett vinni az 1-L asztali bioreaktorokba, amelyek táplált kötegelt módban működnek. Ezért a kemosztatikumokban szerzett fiziológiai paraméterek felhasználhatók a takarmány-tételes termesztések tervezéséhez és teljesítményértékeléséhez a folyamatbeállításhoz szükséges hozamalapú paraméterek felhasználásával.
