InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)
Bauche, D., et al. (2018). “LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed
Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Itt megmutatjuk, hogy a Foxp3 (+) szabályozó T-sejtek (Treg-sejtek) megakadályozták az ILC3 által közvetített vastagbélgyulladást IL-10-független módon. A Treg-sejtek gátolták az IL-23 és IL-1BETA termelést a bélben rezidens cx3cr1(+) makrofágokból, de a CD103(+) dendritikus sejtek nem. Ezenkívül a Treg sejtek az ILC3 il-22 termelését az IL-23 és IL-1BETA cx3cr1(+) makrofág termelésének elnyomásával fékezték meg. Ez a szuppresszió kontakt-függő volt, és a látens aktiváló gén-3 (LAG-3)-egy immunellenőrző receptor-közvetítette a Treg sejteken. A LAG-3 bevonása az MHC II osztályba a cx3cr1(+) szöveti rezidens makrofágok mély immunszuppresszióját eredményezte. Tanulmányunk feltárja, hogy a bélnyálkahártya egészségét egy tengely tartja fenn, amelyet a Treg sejtek kommunikálnak rezidens makrofágokkal, amelyek visszatartják az ILC3 működéséhez szükséges gyulladásos ingereket.
Gordon, Sr, et al. (2017). “A daganattal összefüggő makrofágok PD-1 expressziója gátolja a fagocitózist és a tumor immunitását.”Természet 545(7655): 495-499. PubMed
programozott sejthalálfehérje 1 (PD-1) egy immunellenőrző pont receptor, amelyet az aktivált T-sejteken szabályoznak az immuntolerancia kiváltására. A tumorsejtek gyakran túlexpresszálják a ligandumot PD-1, programozott sejthalál ligandum 1 (PD-L1), megkönnyítve az immunrendszerből való menekülésüket. A monoklonális antitestek, amelyek blokkolják a PD-1 és a PD-L1 közötti kölcsönhatást a ligandumhoz vagy a receptorhoz való kötődéssel, jelentős klinikai hatékonyságot mutattak különböző rákos betegeknél, beleértve a melanomát, a vastagbélrákot, a nem kissejtes tüdőrákot és a Hodgkin-limfómát. Bár jól megalapozott, hogy a PD-1-PD-L1 blokád aktiválja a T-sejteket, keveset tudunk arról, hogy ennek az útnak milyen szerepe lehet a tumorral összefüggő makrofágokban (TAMs). Itt megmutatjuk, hogy mind az egér, mind az emberi tamok expresszálják a PD-1-et. A TAM PD-1 expressziója idővel növekszik a rák egérmodelljeiben és a betegség stádiumának növekedésével az elsődleges emberi rákokban. A TAM PD-1 expressziója negatívan korrelál a tumorsejtekkel szembeni fagocitikus potenciával, és a PD-1-PD-L1 in vivo blokkolása növeli a makrofág fagocitózist, csökkenti a tumor növekedését és meghosszabbítja az egerek túlélését makrofágfüggő módon. Ez arra utal, hogy a PD-1-PD-L1 terápiák a makrofágokra gyakorolt közvetlen hatás révén is működhetnek, jelentős következményekkel jár a rák kezelésére ezekkel a szerekkel.
Moynihan, K. D., et al. (2016). “Egerekben kialakult nagy tumorok felszámolása kombinált immunterápiával, amely veleszületett és adaptív immunválaszokat von maga után.”Nat Med. doi: 10,1038 / nm.4200. PubMed
ellenőrzőpont blokád citotoxikus T-limfocita-asszociált fehérjére (CTLA)-4 vagy programozott sejthalál 1 (PDCD1; más néven PD-1) specifikus antitestekkel tartós tumor regressziót vált ki metasztatikus rákban, de ezek a drámai válaszok a betegek kisebbségére korlátozódnak. Ez a nem optimális eredmény valószínűleg részben az előrehaladott daganatokban jelen lévő immunszuppresszív utak komplex hálózatának köszönhető, amelyek valószínűleg nem képesek legyőzni egyetlen jelátviteli ellenőrző ponton történő beavatkozással. Itt leírunk egy kombinációs immunterápiát, amely számos veleszületett és adaptív immunsejtet toboroz a nagy tumorterhek kiküszöbölésére a szingén tumormodellekben és a melanoma géntechnológiával módosított egérmodelljében; tudomásunk szerint az ilyen méretű daganatok korábban nem voltak gyógyíthatók endogén immunitáson alapuló kezelésekkel. A maximális tumorellenes hatékonyság négy komponenst igényelt: tumor-antigént célzó antitest, rekombináns interleukin-2 meghosszabbított felezési idővel, anti-PD-1 és erős T-sejt vakcina. A kimerülési kísérletek azt mutatták, hogy CD8+ T-sejtek, keresztbemutató dendritikus sejtek és számos más veleszületett immunsejt-alcsoport szükséges a tumor regressziójához. A hatékony kezelés indukálta az immunsejtek infiltrációját és gyulladásos citokinek termelődését a tumorban, fokozta az antitest-mediált tumor antigén felvételét és elősegítette az antigén terjedését. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a kiváltott endogén immunválasz képes elpusztítani a nagy, megalapozott daganatokat és tisztázni a kombinációs immunterápiák alapvető jellemzőit, amelyek képesek a daganatok többségének gyógyítására kísérleti körülmények között, amelyeket általában kezelhetetlennek tekintenek.
Arnold, I. C., et al. (2015). “A CD11c monocita / makrofágok elősegítik a krónikus Helicobacter hepaticus által kiváltott bélgyulladást az IL-23 termelésével.”Nyálkahártya Immunol. doi: 10.1038 / nekem.2015.65. PubMed
gyulladásos bélbetegségekben a gazda mikrobiális kölcsönhatásainak lebontása kíséri az immunsejtek tartós aktiválódását a bélben. A funkcionális vizsgálatok az interleukin-23 (IL-23) kulcsszerepét sugallják a bélgyulladás hangszerelésében. Az IL-23 különféle mononukleáris fagocitákkal (MNP-k) állítható elő akut mikrobiális stimulációt követően, de keveset tudunk az IL-23 kulcsfontosságú sejtforrásairól, amelyek krónikus bélgyulladást okoznak. Itt foglalkoztunk ezzel a kérdéssel a baktériumok által vezérelt vastagbélgyulladás fiziológiai modelljével. A feltételes gén abláció és a génexpressziós profilozás kombinálásával megállapítottuk, hogy az IL-23 cd11c+ MNPs általi termelése elengedhetetlen a bél immunopatológiájának kiváltásához, és az MHCII+ monocitákat és makrofágokat azonosítottuk az IL-23 fő forrásaként. Az IL-23 monociták általi expresszióját a bélben történő differenciálódásuk során szerezték meg, és korreláltak a II.osztályú fő hisztokompatibilitási komplex (MHCII) és a CD64 expressziójával. Ezzel szemben a Batf3-függő CD103 + CD11b-dendritikus sejtek nélkülözhetetlenek voltak a baktériumok által kiváltott vastagbélgyulladáshoz ebben a modellben. Ezek a vizsgálatok megerősítik a monociták patogén szerepét a bélbaktériumokra adott szabályozatlan válaszokban, és azonosítják az IL-23 termelését, mint ennek a válasznak a kulcselemét. Az IL-23 funkcionális forrásainak további megértése a bélgyulladás különböző formáiban új terápiás stratégiákhoz vezethet, amelyek célja az IL-23 által vezérelt immunpatológia megszakítása.Nyálkahártya immunológia advance online kiadvány 5 augusztus 2015. doi: 10.1038 / nekem.2015.65.
Conde, P., et al. (2015). “A DC-jelű (+) makrofágok szabályozzák a transzplantációs tolerancia indukcióját.”Immunitás 42(6): 1143-1158. PubMed
a monocita vonal szöveti effektor sejtjei környezetüktől függően különböző sejttípusokba differenciálódhatnak, specifikus sejtfunkcióval. Az immunvédő makrofágok fenotípusa, fejlődési követelményei és funkcionális mechanizmusai, amelyek közvetítik a transzplantációs tolerancia indukcióját, továbbra is megfoghatatlanok. Itt bemutatjuk, hogy a kostimulációs blokád elősegítette a DC-jelet expresszáló makrofágok felhalmozódását, amelyek gátolták a CD8 (+) T-sejtek immunitását és elősegítették a CD4 (+) Foxp3 (+) Treg sejtek számának növekedését. Mechanikusan, hogy egyidejű DC-jel elkötelezettség fucosilált ligandumok és TLR4 jelátvitel volt szükség a termelés immunszabályozó IL-10 társított elhúzódó allograft túlélés. A DC-jelet expresszáló makrofágok in vivo deléciója, zavarva CSF1-függő fejlődésüket, vagy megakadályozva a DC-jel jelátviteli út megszakította a toleranciát. Az eredmények együttesen új betekintést nyújtanak a kostimulációs blokád tolerogén hatásaiba, és azonosítják a DC-jel (+) szuppresszív makrofágokat, mint az immunológiai tolerancia döntő mediátorait, az ezzel járó terápiás következményekkel a klinikán.
Kaminsky, L. W., et al. (2015). “A Plazmacytoid és a hagyományos dendritikus sejtek redundáns funkciója szükséges a természetes vírusfertőzés túléléséhez.”J Virol 89 (19): 9974-9985. PubMed
a fertőzés perifériás helyéről szisztémásan terjedő vírusok morbiditást és mortalitást okoznak az emberi populációban. A veleszületett myeloid sejtek, beleértve a monocitákat, makrofágokat, monocita eredetű dendritikus sejteket (mo-DC) és dendritikus sejteket (DC), a vírusfertőzés korai szakaszában reagálnak a vírus replikációjának szabályozására, csökkentve a vírus terjedését a perifériás helyről. Az ectromelia vírus (ECTV), egy ortopoxvírus, amely természetesen megfertőzi az egeret, szisztémásan terjed a fertőzés perifériás helyéről, és a fogékony egerek pusztulását eredményezi. Míg a fagocitikus sejtek szükséges szerepet játszanak az ECTV-re adott válaszban, az egyes myeloid sejtpopulációk igénye a perifériás vírusfertőzésre adott akut immunválaszok során nem világos. Ebben a tanulmányban különféle myeloid-specifikus kimerülési módszereket alkalmaztak az egyes myeloid sejt részhalmazok szerepének boncolására az ECTV-fertőzés túlélésében. Megmutattuk, hogy a DC az elsődleges termelő I. típusú interferonok (T1-IFN), szükséges citokinek a túléléshez, az ECTV fertőzést követően. DC-re, de makrofágokra, monocitákra vagy granulocitákra nem volt szükség a vírus kontrollálásához és az egerek ECTV-fertőzést követő túléléséhez. A plazmacytoid DC (pDC) önmagában vagy a lymphoid-rezidens DC részhalmaz (CD8alpha(+) DC) önmagában történő kimerülése nem okozott halálos érzékenységet az ECTV-vel szemben. Azonban a pDC vagy CD8alpha(+) DC részhalmazok legalább egyikének funkciója szükséges az ECTV fertőzés túléléséhez, mivel mindkét populációból kimerült egerek fogékonyak voltak az ECTV kihívásra. Ezen DC alcsoportok közül legalább egy jelenléte elegendő a citokin termeléshez, amely csökkenti az ECTV replikációját és a vírus terjedését, megkönnyítve a fertőzést követő túlélést. Fontosság: a himlőt okozó ortopoxvírus, a variola vírus felszámolása előtt a fertőzött emberek egyharmada engedett a betegségnek. A himlő sikeres felszámolását követően a himlő elleni oltási arány jelentősen csökkent. Jelenleg egyre növekszik a zoonózisos ortopoxvírus fertőzések előfordulása, amelyekre nincs hatékony kezelés. Ezenkívül a himlő vakcina biztonsága nagy aggodalomra ad okot, mivel komplikációk léphetnek fel, ami morbiditást eredményez. Mint sok olyan vírus, amely jelentős emberi betegségeket okoz, az orthopoxvírusok a fertőzés perifériás helyéről szisztematikussá válnak. Ez a tanulmány tisztázza a veleszületett immunsejtek korai követelményét a perifériás fertőzés ECTV-vel történő szabályozásában, az egérhimlő kórokozója. Beszámolunk arról, hogy redundancia van két veleszületett immunsejt-részhalmaz működésében a vírus terjedésének korai szakaszában a fertőzés során. Az ezen sejtcsoportok által közvetített víruskontroll potenciális célpontot jelent a terápiák és a racionális vakcinák tervezésében.
Naik, S., et al. (2015). “A kommensális-dendritikus-sejt interakció egyedi védő bőr immunjelzést határoz meg.”Természet 520 (7545): 104-108. PubMed
a bőr jelenti az elsődleges interfészt a gazdaszervezet és a környezet között. Ez a szerv több billió mikroorganizmusnak is otthont ad, amelyek fontos szerepet játszanak a szövetek homeosztázisában és a helyi immunitásban. A bőr mikrobiális közösségei nagyon változatosak, és idővel vagy a környezeti kihívásokra reagálva átalakíthatók. Hogy e komplexitás összefüggésében az egyes kommenzális mikroorganizmusok hogyan modulálhatják a bőr immunitását, és ezeknek a válaszoknak a szöveti fiziológiára gyakorolt következményei továbbra sem tisztázottak. Itt megmutatjuk, hogy a meghatározott kommenzálok dominánsan befolyásolják a bőr immunitását, és azonosítják a specifikációban részt vevő celluláris mediátorokat. Különösen a Staphylococcus epidermidis-szel történő kolonizáció indukálja az IL-17A(+) CD8(+) T-sejteket, amelyek az epidermisznek otthont adnak, fokozzák a veleszületett barrier immunitást és korlátozzák a kórokozó inváziót. A kommenzális specifikus T-sejt válaszok a bőrrezidens dendritikus sejt részhalmazok összehangolt működéséből származnak, és nem kapcsolódnak gyulladáshoz, ami azt mutatja, hogy a szövetrezidens sejtek készen állnak arra, hogy érzékeljék és reagáljanak a mikrobiális közösségek változásaira. Ez a kölcsönhatás olyan evolúciós eszközt jelenthet, amellyel a bőr immunrendszere ingadozó kommenzális jeleket használ a barrier immunitás kalibrálására és heterológ védelem biztosítására az invazív kórokozókkal szemben. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a bőr immunrendszere egy rendkívül dinamikus környezet, amely gyorsan és specifikusan átalakítható a meghatározott kommenzálokkal való találkozások révén, amelyek mélyreható következményekkel járnak a szövetspecifikus immunitás és patológiák megértésére.
Sheng, K. C., et al. (2014). “Az IL-3 és a CSF-1 kölcsönhatása elősegíti a CD11c+ IL-10-termelő makrofágok képződését.”PLoS One 9(4): e95208. PubMed
a több citokin által szabályozott hematopoiesis mechanizmusainak feltárása továbbra is kihívást jelent a hematológiában. Az IL-3 allergiás citokin, többvonalas potenciállal, míg a CSF-1 egyensúlyi állapotban termelődik, korlátozott származási lefedettséggel. Itt felfedeztük a CSF-1 tanulságos szerepét az IL-3 által közvetített vérképzésben. A CSF-1 jelentősen elősegítette az IL-3-vezérelt CD11c+ sejt expanziót és csillapította a basophil és hízósejt generációt a C57BL/6 csontvelőből. További vizsgálatok azt mutatták, hogy a CSF-1/CSF-1R tengely jelentősen hozzájárult az IL-3 által indukált CD11c+ sejttermeléshez a c-Fos-hoz kapcsolódó monopoiesis fokozásával. Az IL-3 vagy IL-3/CSF-1 által indukált CD11c+ sejtek kompetensek voltak a sejtek érésében és endocitózisában. Mind az IL-3, mind az IL-3/CSF-1 sejteknek hiányzott a klasszikus dendritikus sejt megjelenése, morfológiájukban makrofágokhoz hasonlítottak. Mindkét populáció magas szintű IL-10-et termelt az IL-1, IL-6 és TNFalpha mellett az LPS-re adott válaszként, és viszonylag gyenge T-sejt stimulátorok voltak. Ezek az eredmények együttesen feltárják a CSF-1 szerepét az IL-3 hematopoietikus út közvetítésében monopoiesis útján, amely szabályozza a CD11c+ makrofágok terjeszkedését.
Greter, M., et al. (2012). “A GM-CSF szabályozza a nem limfoid szöveti dendritikus sejtek homeosztázisát, de nélkülözhetetlen a gyulladásos dendritikus sejtek differenciálódásához.”Immunitás 36(6): 1031-1046. PubMed
a GM-CSF (Csf-2) kritikus citokin a dendritikus sejtek (DCs) in vitro generálásában, és úgy gondolják, hogy szabályozza a gyulladásos DCs és a rezidens CD103 (+) DCs kialakulását egyes szövetekben. Itt megmutattuk, hogy a jelenlegi ismeretekkel ellentétben a Csf-2 receptor egyensúlyi állapotban hat a nem lymphoid szövetben rezidens CD103(+) és CD11b(+) DCs túlélésének és homeosztázisának elősegítésére. A CSF-2 receptor hiánya a tüdő DCs-jén megszüntette a CD8(+) T-sejt immunitásának indukcióját részecske antigénekkel történő immunizálás után. Ezzel szemben a Csf-2 receptor nélkülözhető volt a gyulladásos DCs differenciálódásához és veleszületett funkciójához akut sérülések során. Ehelyett a gyulladásos DCs-k CSF-1 receptort igényeltek fejlődésükhöz. Így a Csf-2 fontos a vakcina által kiváltott CD8(+) T-sejt immunitásában a nem nymphoid Szövet DC homeosztázisának szabályozása révén, nem pedig a gyulladásos DCs in vivo.
Li, W., et al. (2012). “Intravitális 2-foton képalkotó leukocita kereskedelem dobogó szív.”J Clin Invest 122 (7): 2499-2508. PubMed
a Kétfoton intravitális mikroszkópia jelentősen kibővítette a szövet – és szervspecifikus különbségek megértését a gyulladásos válaszok szabályozásában. A leukocita toborzás dinamikus szabályozásáról azonban keveset tudunk gyulladt szívszövet, nagyrészt a mozgó szövetek képalkotásában rejlő technikai nehézségek miatt. Itt, beszámolunk egy módszerről az egér szívének verésére intravitális 2-foton mikroszkóppal. Ezzel a módszerrel láthatóvá tettük a neutrofil-kereskedelmet a kiinduláskor és a gyulladás során. Ischaemia reperfúziós sérülés által kiváltott transzplantáció vagy tranziens koszorúér lekötésével vezetett toborzás neutrofilek a szív, azok extravazáció a koszorúér, valamint infiltráció a szívizom, ahol kialakult nagy klaszterek. A mutáns ICAM-1-et tartalmazó szívek oltása, amely a neutrofilek toborzásához fontos ligandum, csökkentette a neutrofilek Mászási sebességét az erekben, és jelentősen gátolta extravazációjukat. Hasonló károsodást észleltek a Mac-1, az ICAM-1 receptor gátlásával. Az LFA-1, egy másik ICAM-1 receptor blokkolása megakadályozta a neutrofilek endotheliumhoz való tapadását és extravazációját a szív graftokban. Mivel a szív gyulladásos válaszai nagy jelentőséggel bírnak a közegészségügy szempontjából, ez a képalkotó megközelítés ígéretet tesz a leukocita toborzás szívspecifikus mechanizmusainak tanulmányozására és új terápiás célok azonosítására a szívbetegségek kezelésében.
Tagliani, E., et al. (2011). “Koordinálja a szöveti makrofágok és a dendritikus sejtpopuláció dinamikájának szabályozását CSF-1 segítségével.”J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed
a szöveti makrofágok (Mphis) és a dendritikus sejtek (DCs) alapvető szerepet játszanak a szövetek homeosztázisában és immunitásában. Továbbra sem tisztázott, hogy ezek a sejtek hogyan tartják fenn jellegzetes sűrűségüket a különböző szövetekben. A vérrel terjedő prekurzor toborzás relatív arányának értékelésére szolgáló új áramlási citometriás technika segítségével megvizsgáltuk az Mphi-t és a DC populációs dinamikát a terhes egér méhében, ahol a gyors szövetnövekedés megkönnyítette a mögöttes szabályozó mechanizmusok boncolását. Bemutatjuk, hogy az Mphi dinamikáját, így az Mphi szövetsűrűségét a CSF-1 lokálisan szabályozza, egy pleiotróp növekedési faktor, amelynek in situ aktivitási szintje nagymértékben változott a méhszöveti rétegek között. A CSF-1 részben az Mphi proliferáció indukálásával, részben pedig az Mphi prekurzorként szolgáló Ly6C(hi) monociták (Mos) extravazációjának stimulálásával járt el. A Mo toborzás A ccr2 kemokin receptor ligandumok termelésétől függött a méh Mphis által a CSF-1-re adott válaszként. Váratlanul egy párhuzamos CSF-1-szabályozott, de CCR2-független út befolyásolta a méh DC szövetsűrűségét a helyi DC előtti extravazációs arányok szabályozásával. Ezek az adatok együttesen sejtes és molekuláris betekintést nyújtanak az Mphi szövetsűrűségének szabályozásába nem gyulladásos körülmények között, és feltárják a CSF-1 központi szerepét az MPHI és a DC homeosztázis koordinációjában.
Lim, A. K., et al. (2009). “A c-fms antitest blokádja elnyomja a gyulladás és a sérülés előrehaladását a korai diabéteszes nephropathiában elhízott db / db egerekben.”Diabetologia 52(8): 1669-1679. PubMed
célok / hipotézis: a makrofág által közvetített vesekárosodás fontos szerepet játszik a diabéteszes nephropathia kialakulásában. A kolónia-stimuláló faktor (CSF)-1 egy citokin, amely diabéteszes vesékben termelődik, és elősegíti a makrofágok felhalmozódását, aktiválódását és túlélését. A CSF-1 kizárólag a c-fms receptoron keresztül hat, amely csak a monocita-makrofág vonal sejtjein expresszálódik. Ezért a C-fms blokádot használtuk stratégiaként a makrofág által közvetített sérülés szelektív megcélzására a diabéteszes nephropathia progressziója során. Módszerek: Az elhízott, 2-es típusú diabéteszes db/db BL/KS egereket, akiknél már bizonyított albuminuria volt, neutralizáló anti-c-FMS monoklonális antitesttel (AFS98) vagy 12-18 hetes kor közötti, izotípusnak megfelelő kontroll IgG-vel kezelték, és megvizsgálták vesekárosodás szempontjából. Eredmények: az AFS98-kezelés nem befolyásolta az elhízást, a hiperglikémiát, a keringő monocita szintet vagy a megállapított albuminuriát db/db egerekben. Az AFS98 azonban megakadályozta a glomeruláris hiperfiltrációt és a diabéteszes vese gyulladásának elnyomott változóit, beleértve a vese makrofágjait (akkumuláció, aktiválás és proliferáció), a kemokin CC motif ligandum 2 szintjét (mRNS és vizeletfehérje), a proinflammatorikus utak veseaktivációját (C-Jun amino-terminális kináz és aktiváló transzkripciós faktor 2) és a TNF-alfa (más néven Tnf) mRNS szinteket. Emellett az AFS98 csökkentette a makrofágok által okozott szövetkárosodást, beleértve a tubuláris sérülést (apoptózis és hypertrophia), az intersticiális károsodást (sejtproliferáció és myofibroblast elhatárolás) és a vesefibrózist (Tgf-béta1 és Col4a1 mRNS). Következtetések / értelmezés: A c-fms blokádja elnyomhatja a kialakult diabéteszes nephropathia progresszióját db / db egerekben a makrofág által közvetített sérülés célzásával.
