háttér & célok: a Celiakia kezelhető és potenciálisan gyógyítható a gliadin T-sejt toleranciájának helyreállításával. A gliadin fehérjét(TIMP-GLIA) kapszulázó negatív töltésű 500 nm-es poli (laktid-Ko-glikolid) nanorészecskék biztonságosságát és hatásosságát 3 coeliakia egérmodellben vizsgáltuk. Kimutatták, hogy ezeknek a nanorészecskéknek az antigént bemutató sejtek általi felvétele immuntoleranciát indukál az autoimmun betegség más állatmodelljeiben.
módszerek: vizsgálatokat végeztünk C57BL / 6; RAG1-/- (C57BL/6); és HLA-DQ8, huCD4 transzgenikus Ab0 nod egerekkel. Az egereknek 1 vagy 2 tail-véna injekciót adtak TIMP-GLIA vagy kontroll nanorészecskék. Egyes egereknek intradermális gliadin injekciókat adtak teljes Freund adjuváns (immunizálás) vagy oldható gliadin vagy ovalbumin (ear challenge) formájában. A RAG – / – egereknek intraperitoneális injekciókat adtak CD4+CD62L-CD44hi T-sejtekből gliadinnal immunizált C57BL / 6 egerekből, és Ain-76a alapú étrenddel etették, amely búzaglutént (orális provokáció) vagy glutén nélkül tartalmazott. A lép-vagy nyirokcsomó-sejteket proliferációs és citokinszekréciós vizsgálatokban, vagy áramlási citometriával, RNS-szekvenálással vagy valós idejű kvantitatív polimeráz láncreakcióval elemeztük. A szérummintákat gliadin antitest enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálattal, a bélszöveteket szövettani vizsgálattal elemeztük. Az emberi perifériás vér mononukleáris sejtjeit vagy az emberi perifériás vér mononukleáris sejtjeiből származó éretlen dendritikus sejteket TIMP-GLIA-t, anti-CD3 antitestet vagy lipopoliszacharidot (kontrollokat) tartalmazó táptalajban tenyésztettük, és proliferációs és citokinszekréciós vizsgálatokban vagy áramlási citometriával elemeztük. Egészséges önkéntesektől származó teljes vért vagy plazmát inkubáltunk TIMP-GLIA-val, és elemeztük a hemolízist, a thrombocyta aktiválást és aggregációt, valamint a komplement aktiválást vagy koagulációt.
eredmények: A TIMP-GLIA nem növelte a tenyésztett humán dendritikus sejtek érési markereit, és nem indukálta az aktív vagy kezelt lisztérzékenységben szenvedő betegek T-sejtjeinek aktiválódását. A késleltetett típusú túlérzékenység (1.modell), a HLA-DQ8 transzgenikus (2. modell) és a gliadin memória T-sejt enteropátia (3. modell) modelljeiben a lisztérzékenység, a timp-GLIA intravénás injekciói jelentősen csökkentették a gliadin-specifikus T-sejt proliferációt (az 1. és 2. modellben), gyulladásos citokin szekréciót (az 1., 2. és 3. modellben), a keringő gliadin-specifikus IgG/IgG2c (az 1. és 2. modellben), fülduzzanatot (az 1. modellben), gluténfüggő enteropathiát (a 3. modellben), valamint a testtömeg-csökkenés (a 3. modellben). Az 1. modellben a hatások dózisfüggőnek bizonyultak. A HLA-DQ8 transzgenikus egerekből származó splenociták, amelyek TIMP-GLIA nanorészecskéket kaptak, de nem kontrollálták a nanorészecskéket, megnövelték a FOXP3 szintjét és a tolerancia indukciójával összefüggő génexpressziós aláírásokat.
következtetések: gliadin érzékenységű egerekben a timp-GLIA nanorészecskék injekciója nem reagált a gliadinra, és csökkentette a gyulladás és enteropathia markereit. Ezt a stratégiát a celiakia kezelésére lehet kidolgozni.
