absztrakt

a hibridóma sejtek és sejttörmelék tenyésztőlevesből történő eltávolítására szolgáló folyamatos kétlépcsős Centrifugálási eljárás kifejlesztéséről számoltak be. A cél felülúszó létrehozása volt, amely közvetlenül felhasználható ultraszűréshez vagy kromatográfiához szűrési lépések nélkül.

az első Centrifugálási lépést a hibridóma sejtek ismételt szakaszos fermentációból történő eltávolítására 100 L-es skálán egy továbbfejlesztett lemezköteg-elválasztóval hajtottuk végre. A centrifugát hidrohermetikus betápláló rendszerrel szereltük fel, amely lehetővé tette a sejtek károsodásmentes elválasztását mérsékelt centrifugális erővel.

ebben a lépésben az emlőssejtek tisztázása 99-99, 9% között volt. A tisztított folyadékfázisban a szubcelluláris részecskék mennyiségét a betáplált áram részecsketartalmának 50% – ára csökkentettük.

egy második Centrifugálási lépésben a maradék mennyiségű sejttörmeléket és más apró részecskéket eltávolítottuk. Ezt 18000 • g-ig terjedő centrifugális erőkkel végeztük egy nagy sebességű centrifugában, amely folyamatos áramlási rendszerrel van felszerelve.

a kapott felülúszóban lévő monoklonális antitesteket ultraszűréssel és kromatográfiás módszerekkel közvetlenül koncentráltuk. Ebben a folyamatban nem figyelték meg az UF-membránok vagy a kromatográfiás membránok szennyeződését.

a membráncsere költségei drasztikusan csökkenthetők a kétlépcsős Centrifugálási eljárás alkalmazásával.