Abstrakti

kohdunkaulan on yleinen sukupuolitauti. Viime vuosina antibioottien väärinkäyttö kohdunkaulan hoidossa johtaa antibiooteille vastustuskykyisten bakteerien syntymiseen; vaihtoehtoisia strategioita on kehitettävä. Tässä tutkimuksessa selvitimme kiinalaisen kasviperäisen kaavan Feilin Emätingeelin (FVG) vaikutuksia kohdunkaulan hoitoon. Kaksi kervisiittimallia optimoitiin käyttämällä BALB / C-hiirtä; Yksi in vitro-malli perustettiin HeLa-soluissa. Chlamydia trachomatis-indusoidussa kohdunkaulan mallissa voitiin havaita suuri bakteerikuormitus, kudoksen tulehdus ja seerumin sytokiinit. FVG: n antamisen myötä kohdunkaulan liman ja kohdunkaulakudoksen bakteerikuormitus voi estyä merkittävästi annosriippuvaisesti. Kohdunkaulan ja emättimen patologista vammaa sekä IL-2: n, IL-17: n ja MCP-1: n pitoisuuksia seerumissa voitaisiin lieventää FVG: llä. FVG vähensi C. trachomatis-bakteerin hela-soluissa indusoiman includaation määrää. Lisäksi Escherichia coli-ja Staphylococcus aureus-bakteerin aiheuttamaa kohdunkaulan infektiota voidaan pienentää FVG: llä. Nämä tulokset viittaavat siihen, että FVG pystyy hoitamaan kohdunkaulan taudinaiheuttajia estämällä ja isäntäimmuniteettivastetta säätelemällä. FVG voi osallistua vaihtoehtoisena aineena kohdunkaulan hoitoon.

1. Johdanto

kohdunkaulan tulehdus on yleinen sukupuolitauti, johon liittyy kohdun kohdunkaulan tulehdustila . Infektio kohdunkaula alkaa alempi sukupuolielinten (emätin) ja sitten kehittyy sisäsynnytintulehdus kanssa nouseva infektio ylemmän sukupuolielinten (kohtu ja munanjohtimet) ja vatsakalvon onteloon . Kohdunkaulan tulehdus esiintyi usein oireettomana infektiona. Epänormaali kohdunkaulan tai emättimen mukopurulentti vuoto ja kohdunkaulan ektopia voivat olla merkkejä ja oireita kohdunkaulan joillakin potilailla . Kuitenkin vakava kohdunkaulan voi johtaa edelleen hedelmättömyyttä ja kohdunulkoinen raskaus. Kohdunkaulan katsotaan liittyvän HIV-infektion tarttumiseen ja kohdunkaulan karsinoomien kehittymiseen .

kohdunkaulan voivat aiheuttaa erilaiset taudinaiheuttajat, kuten Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhea, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas, Herpes simplex-virus, sytomegalovirus ja adenovirus . C. trachomatis infektio on raportoitu olevan yleisin syy kohdunkaulan. Yli 10% naisista, joilla on kohdunkaulan diagnosoidaan tartunnan C. trachomatis ja näiden tartuntojen määrä jatkaa kasvuaan viime vuosikymmeninä . C. trachomatis on gramnegatiivinen velvoittava solunsisäinen bakteeri. C. trachomatis-lajista voidaan löytää sen kehitysvaiheessa kaksi muotoa. Alkeiskappaleiden (EBs) kiinnittyminen isäntäsoluihin välittää C. trachomatisin invaasiota. Isäntäsolujen sisällä C. trachomatis muodostaa reticulate-elimet (RBS), jonka jälkeen RBS replikoituu sytoplasmaisen vakuolin sisällä ja muodostaa lopulta inclusionin .

klamydia voi säilyä kohdun kohdunkaulassa pitkään oireettomana. Infektio voi parantua itsestään ilman hoitoa tai voi aiheuttaa kohdunkaulan. C. trachomatisin puhdistuma vaatii th1-immuniteetin vasteet . Adaptiivisen immuniteetin vasteet voivat kuitenkin olla kaksiteräisiä ja tuoda kudosvaurioita. C. trachomatis-infektion hoito perustuu potilaiden ja heidän seksikumppaniensa hoitoon makrolideilla. Antibioottien väärinkäyttö ja väärät positiiviset diagnoosit voivat edistää antibiooteille vastustuskykyisten organismien syntymistä. Antibiooteille vastustuskykyiset bakteerit taas johtavat hoidon epäonnistumiseen . Antibioottihoidon jälkeen 10-20% potilaista kärsii uudelleenfektiosta vuoden sisällä, mikä voi johtua siitä, ettei klamydiaa vastaan ole suojaavaa immuniteettia . Nämä olosuhteet huomioon ottaen on kehitettävä vaihtoehtoisia strategioita.

perinteisellä kiinalaisella lääketieteellä (TCM) on pitkä historia gynekologisten sairauksien hoidossa . Feilin emätin geeli (FVG) on kehitetty kliinisesti käytetty kiinalainen lääke kaava, jota käytetään mucopurulent cervicitis. FVG koostuu seuraavista rohdosvalmisteista: Gentianae radix et rhizoma, Stemonae radix, Fraxini cortex, Paeoniae radix rubra, Dictamni cortex ja Glycyrrhizae radix et rhizoma. TCM: n teorian mukaan: FVG: tä voidaan käyttää kosteuden ja myrkyllisten materiaalien aiheuttaman epänormaalin valkovuodon, kuten runsaan, fetidin ja kellertävän leukorean, kutinan ja kivun hoitoon ulkoisten sukuelinten ympärillä . FVG: n uuttamista, valmistusta ja laadunvalvontaa oli tutkittu. GENTIOPIKROSIDIN ja PAEONIFLORIININ pitoisuudet FVG: ssä analysoitiin noin 5, 90 mg/g ja 8, 96 mg/g .

tässä tutkimuksessa testasimme hypoteesia, jonka mukaan FVG voisi hoitaa kohdunkaulan tehokkaasti. FVG: n hoidon arvioimiseksi laadittiin hiirten kohdunkaulan tautimalleja. C. trachomatis-tartunnan saaneessa hiirimallissa arvioitiin bakteerikuormia, patologista vammaa sekä MCP-1: n, IL-2: n ja IL-17: n pitoisuuksia seerumissa. C. trachomatisin indusoimat sulkeumat HeLa-soluissa lueteltiin in vitro. Lisäksi sen jälkeen, kun Escherichia colin ja Staphylococcus aureuksen seos oli saanut tartunnan, FVG: n hoitoa arvioitiin kohdunkaulan histologisella tutkimuksella.

2. Materiaalit ja menetelmät

2.1. FVG

– valmiste kuusi rohdosvalmistetta uutettiin kolme kertaa kiehuvalla vedellä ja saostettiin alkoholin kanssa 70-prosenttiseksi (v/v) etanoliksi. Supernatantti konsentroitiin pyöröhaihduttimella suhteelliseen tiheyteen 1,30-1,35 (50°C), jotta saatiin feilin-uutto (Fe, 5,62 g/g). Geelipohja oli karbopol 941: n ja ksantaanikumin seos. Uutto sekoitettiin geelipohjaan FVG: n saamiseksi. FVG: n lääkekuorma oli 2,5 g/g, 1,25 g/g ja 0,625 g/g.

2,2. Bakteerikannat ja isäntäsolu

Chlamydia trachomatis-hiiren pneumoniittikanta Nigg II (ATCC® VR-123™), Escherichia coli (ATCC® 25922™) ja Staphylococcus aureus (ATCC® 25923™) saatiin Amerikkalaistyyppisestä Kantakokoelmasta. E. coli ja S. aureus viljeltiin ravinneliemessä. Ihmisen kohdunkaulan epiteelisolulinja HeLa (ATCC® CCL-2™) ostettiin Kiinan lääketieteen Akatemian Kantakokoelmasta ja viljeltiin rpmi 1640-väliaineessa, joka sisältää 10% FBS: ää 37°C: ssa 5% CO2: n läsnä ollessa. C. trachomatis N levitettiin HeLa-soluissa. Ennen tartuntaa infektoituneita HeLa-soluja (105 solua/mL) häirittiin ja sentrifugoitiin. Supernatantti kerättiin, jotta saatiin puhdistettuja alkeeneja (EBs), joiden avulla voidaan tartuttaa suoraan hiiriä ja HeLa-soluja.

2, 3. Eläintartunnat ja-hoito

120 balb / C-naarasta (18-20 g) ostettiin Charles River Laboratories Chinasta (Peking, Kiina). Eläimiä säilytettiin bsl2-esteeläinlaitoksessa. Kaikki tässä kuvatut eläinkokeet tehtiin Institute of China Academy of Chinese Medical Sciences, Chinese Materia Medica, Ethic Committee-järjestön luvalla. Eettisen hyväksynnän viitenumero on 20162019.

BALB / c-hiirten kohdunkaulakudos vaurioitui kulmaneulalla nukutuksessa. Tämän jälkeen hiiriin inokuloitiin 50 µL C. trachomatis N: ää tai E. colin ja S. aureuksen seosta (109 PMY/mL). Hiiret saivat tartunnan kerran päivässä ja toistuivat kolmen päivän ajan. 24 tuntia viimeisen infektion jälkeen FVG annettiin pipetillä hiiren emättimeen (FVG: n tilavuus oli tarkoin kontrolloitu) annoksilla 2, 2 g/kg, 1, 1 g/kg ja 0, 55 g/kg 12 päivän ajan. Policresulen suppositories (PS), positiivisena kontrollina, sekoitettiin geelipohjaan ja annettiin annoksena 16, 5 mg/kg 12 päivän ajan. Verrokkiryhmälle ja malliryhmälle annettiin yhtä suuri määrä geelipohjaa. Päivänä, ja hoitopäivänä, kohdunkaulan limaa kerättiin moppi. Päivänä 15 hiiret nukutettiin, aortta ventraliksesta otettiin verinäytteet ja seerumi erotettiin. Hiiret tapettiin kaularangan sijoiltaan nukutuksessa ja kohdunkaula ja emätin poistettiin. Kaavamainen koeaika on esitetty kuvassa 1.

2, 4. ELISA-analyysi C. trachomatis N, IL-2, IL-17 ja MCP-1

kohdunkaulan limaa sisältävät pyyhkäisynäytteet jakautuivat yhtä suureen määrään PBS: ää eli C-tasoon. PBS: n trachomatis N analysoitiin entsyymivälitteisellä immunosorbenttimäärityksellä (Elisa) (Meilian, Shanghai, Kiina) valmistajan ohjeiden mukaan (lisätään 50 µL näytettä ja 50 µL toteamisvasta-ainetta kuhunkin kaivoon ja inkuboidaan 37°C: ssa 1 tunnin ajan; pestään kaivot, lisätään 100 µL HRP-konjugaattia kuhunkin kaivoon ja inkuboidaan 37°C: ssa 0,5 tunnin ajan; pestään kaivot, lisätään 50 µL kromogeenisia substraatteja kuhunkin kaivoon ja inkuboidaan 37°C: ssa.0,5 tunnin ajan; lisätään 50 µl pysäytysliuosta kuhunkin kaivoon; luetaan kunkin kaivon absorbanssi 450 nm: ssä). IL-2 -, IL-17-ja MCP-1in-seerumitasot määritti ELISA kit (Meilian, Shanghai, Kiina) valmistajan ohjeiden mukaan edellä kuvatulla tavalla.

2, 5. RT-PCR-analyysi C. trachomatis n

kokonais-RNA uutettiin kohdunkaulasta Trizolilla (Invitrogen, Kalifornia, USA); kohdegeenien ilmentyminen analysoitiin yhdellä askeleella SYBR Prime Script RT-PCR Kit II (TaKaRa, Peking, Kiina) Piko Real 96: lla (Thermo Fisher Scientific, Massachusetts, USA). Alukkeita käytettiin seuraavasti: 16s rRNA forward primer, 5 ’- ACC CGT TGG ATT TGA GCG TA-3′; 16S rRNA reverse primer, 5′-GTT gag CCC CGA GAT TTG AC-3′; GAPDH forward primer, 5′-GCT GAG TAT GTC GTG gag T-3′; gapdh reverse primer, 5′-GTT CAC ACC CAT CAC AAA C-3’. Menetelmän mukaan laskettiin C. trachomatis n-geenin ja hiirigeenin suhteellinen ilmentymä.

2, 6. Histologinen tutkimus

hiirten kudokset kiinnitettiin 10-prosenttiseen formaldehydiin, upotettiin parafiiniin ja leikattiin viipaleiksi hematoksyliini-ja eosiinivärjäystä varten. Dmlb (Leica Camera AG, Wetzlar, Saksa) arvioi osat silmämääräisesti; kustakin näytteestä valmistettiin kaksi osaa. Patologisten muutosten luokitteluun sovellettiin seuraavia kriteerejä.

”-” kohdunkaulan ja emättimen epiteelissä ei ole hyperplasiaa eikä tulehdusta ja kudokset ovat normaaleja.

”+” kohdunkaulan ja emättimen epiteelillä on lievä hyperplasia; sidekudoksella on lievä segmentaalinen tulehdus.

”++” kohdunkaula-ja vaginaepiteelillä on hyperplasiaa; sidekudokseen tunkeutuivat tulehdussolut.

”++ + ” kohdunkaula-ja vaginaepiteelillä on merkittävää hyperplasiaa ja ne tunkeutuivat tulehdussoluihin; sidekudosta ympäröi diffuusi tulehdus ja verisuonten tukkoisuus.

2, 7. Isäntäsoluinfektio ja Inkluusiotahra

HeLa-solut kylvettiin 6-kuoppalevyyn, jonka tiheys oli 2×105 solua / kuoppa, ja niitä viljeltiin 48 tunnin ajan. sitten solut inkuboitiin C. trachomatis n EBs sisälsi väliainetta. Levy sentrifugoitiin 32°C: ssa 1 tunnin ajan, ja sitä viljeltiin jatkuvasti 37°C: ssa 5% CO2: n läsnä ollessa 2 tunnin ajan. tartunnan saaneiden solujen väliaine korvattiin Fe: llä (500, 250 ja 125 µg/mL), joka sisälsi väliainetta, ja sitä inkuboitiin vielä 48 tunnin ajan. Tämän jälkeen solut pestiin PBS: llä, kiinnitettiin metanolilla ja värjättiin Giemsalla. Sulkeumat HeLa-soluissa vangittiin IX71: llä (Olympus, Tokio, Japani) ja luetteloitiin.

2, 8. Tilastollinen analyysi

tilastolliset analyysit tehtiin Grappad Prism v. 6: lla (Grappad Software, Kalifornia, USA). Kaikki tiedot jaettiin normaalisti (Kolmogorov-Smirnov testi). Inclusion number and histological scores were analysed with the Mann-Whitney U test; muut analysoitiin unpared t-test. Arvoa p < 0, 05 pidettiin merkittävänä.

3. Tulokset

3.1. FVG estää C. trachomatis N: n pitoisuuden kohdunkaulan limassa

EBs C. trachomatis itää ja muodostaa RBs: n hyökättyään isäntäsoluihin. RBS alkaa lisääntyä 7-21 päivän kuluttua. Entsyymi immunomääritys on yleisesti käytetty nonculture menetelmä diagnosoida klamydiatartunta . Analysoimme C. trachomatis N: n tason kohdunkaulan limassa arvioidaksemme hiirten infektion vakavuutta.

C. trachomatis n-infektion varhaisessa vaiheessa bakteerikuormassa ei havaittu merkittävää muutosta. 10 päivää ensimmäisen infektion jälkeen C: n nousu. trachomatis N hiirillä voitaisiin testata. Päivänä bakteerikuormitus oli huomattavasti suurempi kuin kontrolliryhmällä(kuva 2 (a)). Peräkkäisillä FVG-hoidoilla (2, 2, 1, 1, 0, 55 g/kg) C. trachomatis n: n pitoisuus hiirten kohdunkaulan limassa saattoi estyä voimakkaasti annosriippuvaisesti(Kuvat 2(c) ja 2 (d)).

(a)

(b)

(c)

(d)

(a)
(b)
(c)
(d)

Figure 2

The FVG inhibit the level of Chlamydia trachomatis N in cervical mucus. (a) The level change of C. trachomatis N kontrolliryhmässä ja malliryhmässä, (b-d) erityisyhteisöjen vaikutukset C. trachomatis N: n tasoon päivänä 6 (b), päivänä 10 (c) ja päivänä 14 (d). Tulokset ovat keskiarvo±sem, n=10, tilastollisesti merkitsevä ##p<0, 01: verrattuna kontrolliin; < 0, 01 ja < 0, 05: verrattuna malliin, määritetään parittomalla t-testillä.

3, 2. FVG estää C: n kuormituksen. trachomatis N kohdunkaulassa

klamydiainfektion diagnosoinnissa nukleiinihapon monistustekniikka, mukaan lukien polymeraasiketjureaktio (PCR), on herkempi ja spesifisempi kuin entsyymi-immunomääritys . Siksi testasimme edelleen C. trachomatis N: n kuormitusta hiirten kohdunkaulassa RT-PCR-menetelmällä. Päivänä 15 C. trachomatis n: n 16S rRNA: n ilmentyminen hiirillä oli huomattavasti suurempi kuin kontrolliryhmässä (kuva 3). FVG: n (2, 2-1, 1 g/kg) hoito 12 päivän ajan saattaa voimakkaasti estää C. trachomatis N: n kuormitusta kohdunkaulassa (kuva 3).

3, 3. FVG vähentää C: tä. trachomatis n aiheuttama kohdunkaulan ja emätintulehdus

C. trachomatis-bakteerin aiheuttama infektio hiirillä on sopiva malli sukupuolielinten infektioiden tutkimiseen. Infektio ei aiheuta vakavaa ylemmän ruoansulatuskanavan sukupuolielinten patologiaa . Kohdunkaulan ja emättimen patologia analysoitiin C. trachomatis n-infektion vakavuuden luonnehtimiseksi.

kuten kuvassa 4 esitetään, verrokkiryhmässä kohdunkaulan epiteelisolut ja sidekudos olivat normaalit, hyperplasiaa tai tulehdusta ei havaittu. Malliryhmässä kohdunkaulan epiteelikerroksissa on hyperplasiaa ja tulehdussolut olivat soluttautuneet epiteeliin ja sidekudokseen. FVG-hoidon (1, 1 g/kg) jälkeen kohdunkaulan patologinen vamma voi vähentyä merkittävästi (Kuva 4).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figure 4

The FVG diminishes the Chlamydia trachomatis N-induced cervicitis. (a) Control group, (b) model group, (c) PS group, (d) FVG (2.2 g/kg) group, (e) FVG (1.1 g/kg) group, (f) FVG (0.55 g/kg) group, and (g) statistical analysis of histological examination. n=20, statistically significant ##p<0.01: compared with control; < 0.01 and < 0.05: compared with model, determined by the Mann-Whitney U test.

kuten kuviosta 5 käy ilmi, kontrolliryhmässä vaginan epiteeli oli normaali, hyperplasiaa tai tulehdusta ei havaittu. Malliryhmässä vaginan epiteelikerroksissa on hyperplasiaa ja tulehdussolut tunkeutuivat epiteelikudokseen. FVG-hoidon (2.2, 1.1 g/kg) jälkeen emättimen vamma voi vähentyä merkittävästi (kuva 5).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figure 5

The FVG diminishes the Chlamydia trachomatis N-induced vaginitis. (a) Control group, (b) model group, (c) PS group, (d) FVG (2.2 g/kg) group, (e) FVG (1.1 g/kg) group, (f) FVG (0.55 g/kg) group, and (g) statistical analysis of histological examination. n=20, statistically significant ##p<0.01: compared with control; < 0.01 and < 0.05: compared with model, determined by the Mann-Whitney U test.

3, 4. FVG vähentää C. trachomatis n-infektion seerumin Sytokiinivastetta

epiteelisolut ja immuunisolut voivat vapauttaa sytokiineja C. trachomatis-infektion jälkeen, joista suurin osa tulee Th1-soluista. Nämä sytokiinit edistävät immuunivastetta, mutta aiheuttavat patologisia vaurioita . Seerumin sytokiinipitoisuudet testattiin histologisten tutkimustulosten tueksi. Päivänä IL-2: n, IL-17: n ja MCP-1: n tasoja säädeltiin merkittävästi ylöspäin (kuva 6). Kolme annosta FVG: tä voisi tehokkaasti estää IL-17: n ja MCP-1: n vapautumisen. IL-2: n tuotantoa voitiin vähentää FVG: llä pieninä annoksina (1,1 ja 0,55 g/kg).

(a)

(b)

(c)

(a)
(b)

3, 5. FVG vähentää C. trachomatis N: n indusoimaa in vitro-määrää

C: n proliferaatiota.trachomatis esiintyy isäntäsoluissa RBs: n muodostuessa. Inclusive voidaan muodostaa noin 12 h tartunnan jälkeen, joka sisältää määrä RBs . FVG: n inhibitiota C. trachomatis N-bakteerin infektiossa in vitro arvioitiin osallistuneiden lukumäärällä. Kun HeLa-soluja inkuboitiin C. trachomatis N: llä 48 tunnin ajan, sulkeumia voitiin havaita Giemsa-tahralla. FVG-hoidon jälkeen hoitoon otettujen määrä väheni merkitsevästi annosriippuvaisesti (Kuva 7).

3, 6. FVG vähentää E. colin ja S. aureuksen aiheuttamaa kohdunkaulan patologista vammaa

, vaikka C. trachomatis on raportoitu olevan yleisin kohdunkaulan taudinaiheuttaja, anaerobeja kuten E. coli, S. aureus, ja Klebsiella pneumoniae voidaan eristää kohdunkaulan potilailla . Rotan kohdunkaulan malli, johon oli tarttunut E. coli -, S. aureus-ja N. gonorrhea-bakteerien seos, oli vahvistettu aiemmassa työssämme . Nykyisessä tutkimuksessa optimoitiin E. colin ja S. aureuksen seoksella infektoitu hiirimalli. 14 päivää ensimmäisen infektion jälkeen kohdunkaula osoittautui vakavasti tartutetuksi.

verrokkiryhmässä kohdunkaulan epiteeli oli normaali eikä hyperplasiaa tai tulehdusta havaittu. Malliryhmässä kohdunkaulan epiteelin sisäkerroksissa on hyperplasiaa, ja tulehdussolut (neutrofiilit ja eosinofiilit) tunkeutuivat pahasti epiteelikudokseen. FVG-hoidon (2, 2 ja 1, 1 g/kg) jälkeen kohdunkaulatulehdus voi estyä merkitsevästi (Kuva 8).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)

Figure 8

The FVG reduce the pathological injury of cervix induced by Escherichia coli and Staphylococcus aureus. (a) Control group, (b) model group, (c) PS group, (d) FVG (2.2 g/kg) group, (e) FVG (1.1 g/kg) group, (f) FVG (0.55 g/kg) group, and (g) statistical analysis of histological examination. n=20, statistically significant ##p<0.01: compared with control; < 0.01 and < 0.05: verrattuna malliin, määritettynä Mann-Whitney U-testillä.

4. Keskustelu

kohdunkaulan diagnosointi on vaikeaa, koska selvää oiretta ei ole. Joillakin potilailla havaittiin epänormaalia mukopurulenttista eritettä ja kohdunkaulan ektopiaa . Viime vuosikymmeninä oli perustettu monia kohdunkaulan nisäkäsmalleja. Makakeja, rottia ja hiiriä voitaisiin käyttää kohdunkaulan malli. Sekä bakteereja (C. trachomatis) ja kemiallisia yhdisteitä (fenoli, etikkahappo) voidaan käyttää aiheuttamaan kohdunkaulan . Tässä tutkimuksessa optimoitiin kaksi hiirimallia. C. trachomatis N: n aiheuttaman infektion jälkeen C. trachomatis n: n bakteerikuorma kohdunkaulan limassa kasvoi jatkuvasti ajan myötä. C. trachomatis n-infektio voi johtaa sytokiinien säätelyyn seerumissa ja tulehdukseen emättimen ja kohdunkaulan kudoksissa. E. colin ja S. aureuksen seoksella saadun infektion jälkeen kohdunkaulan vamma voitiin havaita patologisessa diagnoosissa.

kliinisesti antibiootit olivat ensimmäinen valinta kohdunkaulan hoitoon eri taudinaiheuttajien mukaan. Mutta syntyminen antibiooteille vastustuskykyisten kuten kinoloniresistentti C. trachomatis ja N. tippurista, metisilliinille vastustuskykyisestä S. aureus-bakteerista ja vankomysiinille vastustuskykyisestä E. coli-bakteerista tulee vakava ongelma maailmanlaajuisesti antibioottien väärinkäytön vuoksi . TCM voi edistää vaihtoehtoisia strategioita kohdunkaulan hoitoon. Tässä tutkimuksessa testattiin FVG: n vaikutuksia kohdunkaulan tulehdukseen.

FVG on emätingeeli, jonka geelipohja on karbopol 941: n ja ksantaanikumin seos . Viime vuosina monet kaupalliset emättimen geeli valmisteet Kiinan kasviperäisten kaava on käytetty hoitoon kohdunkaulan . Emätinlääkejakelu on perinteinen limakalvolääkejakelureitti, jota voidaan käyttää sekä paikallisten että systeemisten sairauksien hoitoon . Emätinvalmisteina voidaan käyttää perinteisiä valmisteita, kuten peräpuikkoja, geelejä, tabletteja, emätinkalvoja, kasteluja ja pessaareja . Yhtenä yleisimmin käytetyistä lääkkeiden annostelujärjestelmistä emätingeelejä on käytetty mikrobisidien, ehkäisyvälineiden, työn induktoreiden ja sukupuolihormonien valmistukseen. Verrattuna muihin lääkkeiden jakelujärjestelmiin emättimen geeli on turvallisempi ja sillä on suurempi hyötyosuus .

kaikkia FVG: n kuutta rohdosvalmistetta voidaan käyttää gynekologisten sairauksien hoidossa TCM: ssä . TCM: n teorian mukaan tässä kaavassa gentianae radix et rhizom on ”monarkkilääke” tai ”päälääke”, stemonae radix ja Fraxini cortex ovat ”ministerilääke” tai ”apulääke”, Paeoniae radix rubra ja Dictamni cortex ovat ”adjuvanttilääke” ja Glycyrrhizae radix et rhizom on ”ohjaava lääke”. Gentianae radix et rhizom saattaa vaikuttaa eniten FVG: n vaikutuksiin. Iridoidit ja pionin kokonaisglukosidit eristetään pääasiassa gentianae radix et rhizomasta ja Paeoniae radix rubrasta. Näillä yhdisteillä on merkittäviä anti-inflammatorisia vaikutuksia . Alkaloidit ja limonoidit edistävät dictamni Cortexin antibakteerista aktiivisuutta . Kumariineilla fraxini cortexissa ja flavoneilla Glycyrrhizae radix et rhizomessa on antibakteerisia ja tulehdusta ehkäiseviä vaikutuksia . Alkaloidit edistävät stemonae radix-bakteerin hyönteismyrkkyä . Näiden rohdosvalmisteiden bioaktiiviset yhdisteet voivat tukea FVG: n hoitoa kohdunkaulan tulehduksessa.

IL-17: ää tuottavat tyypillisesti Th17-solut. Kliinisesti IL-17: n pitoisuus C. trachomatis-tartunnan saaneiden potilaiden sukupuolielinten eritteissä on huomattavasti suurempi kuin tartunnan saaneiden naisten . Suuri IL-17-pitoisuus hiiren kohdunkaulan mallissa oli sopusoinnussa kliinisen tuloksen kanssa. IL-2: n ja MCP-1: n tasot liittyvät Th1: n vastauksiin. IL-2 erittyy Th1-soluista ja stimuloi sytokiinien tuotantoa. MCP-1: n ja Th1: n vasteiden välillä on käänteinen korrelaatio. MCP-1: n inhibitio voi lisätä IFN-γ: n tuotantoa . FVG voisi alentaa IL-2: n, IL-17: n ja MCP-1: n pitoisuuksia. Nämä tulokset viittasivat siihen, että FVG voisi estää kohdunkaulansyöpää säätelemällä isäntäimmuniteettivasteita.

C. trachomatis-infektiosyklin alkuvaiheessa tyypin III eritysjärjestelmä mahdollistaa EBs: n tunkeutumisen isäntäsoluihin . C. trachomatisin sisäistämistä seuraa RBS: n ja sulkeumien kehittyminen. Tyypin III eritysjärjestelmän inhibiittori voisi estää sulkeumien muodostumisen . In vitro-tutkimus osoitti, että FVG saattaa estää hela-soluihin sisällyttämisen.

yhteenvetona totean, että onnistuimme luomaan kaksi hiiren kohdunkaulan mallia, joissa oli C. trachomatis N, S. aureus ja E. coli. Todistimme, että FVG voi merkittävästi estää kohdunkaulan. FVG voisi vähentää bakteerikuormitusta, lieventää patologista vammaa ja vähentää sisällyttämisen määrää. FVG: n vaikutukset liittyivät taudinaiheuttajien estymiseen ja isäntäimmuniteettivasteen säätelyyn. Tämä tutkimus antaa näyttöä siitä, että FVG: tä voitaisiin käyttää uutena vaihtoehtoisena aineena, joka lievittää antibioottiresistenssiongelmaa kohdunkaulan hoidossa.

tietojen saatavuus

tämän tutkimuksen tulosten tueksi käytetyt tiedot on sisällytetty artikkeliin.

eturistiriidat

tekijöillä ei ole tähän teokseen liittyviä eturistiriitoja.

kirjoittajien osuudet

Xin Mao ja Ronghua Zhao osallistuivat yhtä lailla tähän teokseen.

kiitokset

tätä tutkimusta tuki Kiinan kansallinen Luonnontieteellinen säätiö (nos. 81773977 ja 81774204).