IFNy: n, CD107: n ja CD137: n korrelaatiota Yksittäissolutasolla voidaan käyttää T-soluvasteen seuraamiseen potilailla immunoterapian jälkeen.

kun immunoterapioiden merkitys eri syöpien hoidossa kasvaa, myös immuunivasteen seuraaminen hoidon tehon mukaan tulee yhä tärkeämmäksi. Aiemmin tuumoriantigeenispesifiset humoraaliset vasteet potilailla, jotka saivat rokotteita low-grade follikulaarista lymfoomaa (FL) varten, korreloivat kliinisten tulosten kanssa, mukaan lukien kasvaimen regressio, molekylaarinen remissio, progressiovapaa elinaika (PFS) ja kokonaiselinaika (os). Sen sijaan T-solujen immuunivasteita on ollut vaikea vahvistaa. T-solujen proliferaatio määritykset mittaavat useimmiten CD4 T-solujen vasteita, kun taas CD8 T-solut voivat olla tärkeitä immunoterapioiden tuottamia efektoreita. Kuitenkin määritykset, jotka on suunniteltu mittaamaan CD8 T-soluja, ts. Kromi release CTL määritykset, ja IFN-γ elispot ja solunsisäinen virtaus sytometria määritykset, on vaikea tehdä toistettavissa. Tämän ongelman ratkaisemiseksi PBL saatiin FL-potilailta, kryopreservoitiin ja sulatettiin, jota sitten käytettiin suunnittelemaan standardoitu menetelmä solunsisäisen IFN-γ: n havaitsemiseksi virtaussytometrialla. Liukoisten anti-CD3-ja anti-CD28-vasta-aineiden yhdistetty ärsyke antaa vankan stimulaation, tyypillisesti noin 5% normaaleista PBL CD8+ T-soluista reagoi. Käyttämällä säteilytettyjen B-solujen lymfoomasolulinjojen paneelia stimulaattorina osoitimme, että keskimäärin 1 – 2% näistä T-soluista pystyi muodostamaan vasteen tässä määrityksessä. Yllättäen useiden FL-potilaiden CD8+ PBL T-solut reagoivat paremmin yhdistettyyn anti-CD3-ja anti-CD28-stimulaatioon sekä allo-stimulaatioon 15 – 22%: lla ja 2 – 6%: lla. Tähän vasteeseen liittyi CTL-degranulaation korvaava cd107: n pintaekspressio samassa solupopulaatiossa, joka on osoitettu monivärivirtaussytometrialla. Luokan I vasta-aine W6/32 esti sekä IFN-γ: n että CD107: n vasteet, mikä viittaa luokan I rajoitettuun T-solujen reseptorivälitteiseen vasteeseen. Lisäksi myöhemmissä ajankohdissa nämä T-solut myös säätelivät CD137: ää pinnallaan. Tämä aktivaatiomolekyyli regulatoituu CD8 T-soluissa spesifisen antigeenistraation seurauksena ja antaa soluille apoptoottisen antisignaalin. Yhteenvetona voidaan todeta, että FL-potilailta eristettyjen CD8 T-solujen immuunikykyä voidaan arvioida allo-stimulaatiolla B-solulymfooman solulinjoista koostuvan paneelin avulla. Mikä vielä tärkeämpää, yksittäisen solupopulaation kolmen riippumattoman vasteindikaattorin (IFN-γ, CD107 ja CD137) korrelaatio virtaussytometrialla sekä allo-stimulaatioon että tiettyyn kohteeseen voi johtaa T-solujen roolin parempaan ymmärtämiseen immuunivasteessa. Viime kädessä nämä vasteet on validoitava potilaiden tuloksilla lymfooman rokotetutkimuksissa.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.