Tausta & tavoitteena: keliakiaa voitaisiin hoitaa ja mahdollisesti parantaa palauttamalla t-solutoleranssi gliadiinille. Tutkimme negatiivisesti varautuneiden 500 nm poly(laktidi-ko-glykolidi) nanopartikkeleiden kapseloivan gliadiiniproteiinin (timp-GLIA) turvallisuutta ja tehoa 3 hiirimallissa keliakiassa. Näiden nanohiukkasten soluunoton antigeenia esitteleviin soluihin osoitettiin aiheuttavan immuunitoleranssia muissa autoimmuunisairauksien eläinmalleissa.
menetelmät: teimme tutkimuksia C57BL/ 6; RAG1 -/ – (C57BL / 6); ja HLA-DQ8, huCD4 transgeenisillä Ab0 NOD hiirillä. Hiirille annettiin 1 tai 2 timp-GLIA-tai kontrollinanopartikkeliruisketta pyrstölaskimoon. Joillekin hiirille annettiin ihonsisäisiä injektioita gliadinia täydellisenä Freundin adjuvanttina (immunisaatio) tai liukoista gliadiinia tai ovalbumiinia (korvahaaste). RAG -/-hiirille annettiin gliadin-immunisoidun c57bl / 6-hiiren CD4+CD62L-CD44hi T-soluja vatsaonteloon pistoksina, ja niitä ruokittiin Ain-76A-pohjaisella ruokavaliolla, joka sisälsi vehnägluteenia (oraalinen haaste) tai ei gluteenia. Pernan tai imusolmukkeen soluja analysoitiin proliferaatio-ja sytokiinierityksen määrityksissä tai virtaussytometrialla, RNA-sekvensoinnilla tai reaaliaikaisella kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiolla. Seeruminäytteet analysoitiin gliadin-vasta-aineentsyymeihin liittyvällä immunosorbenttimäärityksellä ja suolistokudokset histologialla. Ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisoluja tai ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisoluista johdettuja epäkypsiä dendriittisoluja viljeltiin timp-GLIA, anti-CD3-vasta-ainetta tai lipopolysakkaridia (kontrolleja) sisältävässä väliaineessa ja analysoitiin proliferaatio-ja sytokiinieritysmäärityksissä tai virtaussytometrialla. Terveiden vapaaehtoisten kokoverta tai plasmaa inkuboitiin TIMP-GLIA: lla, ja hemolyysi, verihiutaleiden aktivaatio ja aggregaatio sekä komplementin aktivaatio tai hyytyminen analysoitiin.
tulokset: TIMP-GLIA ei lisännyt viljellyissä ihmisen dendriittisoluissa kypsymisen merkkiaineita eikä indusoinut T-solujen aktivoitumista aktiivisilla tai hoidetuilla keliakiapotilailla. Timp-GLIA-valmisteen laskimonsisäiset injektiot vähensivät merkitsevästi gliadiinispesifistä T-solujen proliferaatiota (malleissa 1 ja 2), tulehduksellista sytokiinieritystä (malleissa 1, 2 ja 3), kiertävää gliadiinispesifistä IgG/IgG2c: tä (malleissa 1 ja 2), korvien turpoamista (mallissa 1), gluteenista riippuvaista enteropatiaa (mallissa 3), ja painon lasku (mallissa 3). Mallissa 1 vaikutukset olivat annosriippuvaisia. HLA-DQ8-siirtogeenisten hiirten splenosyyttien, joille annettiin TIMP-GLIA-nanohiukkasia, mutta ei kontrollinanohiukkasia, foxp3-ja geeniekspressiosignaaleja, jotka liittyivät toleranssi-induktioon.
päätelmät: hiirillä, joilla oli gliadiiniherkkyys, timp-GLIA-nanohiukkasten ruiskutus aiheutti gliadiinireseptin vasteen puuttumisen ja vähensi tulehduksen ja enteropatian merkkiaineita. Tätä strategiaa voitaisiin kehittää keliakian hoitoon.
