Abstrakti

Tausta. Ihmisen CD133: n (ihmisen prominiini-1) ilmentyminen syöpäsoluissa on oletettu varren merkkiaineena, ja sitä pidetään syövän kantasolujen (CSCs) oletettuna merkkiaineena. Suunnittelimme tutkimuksen, jossa kuvataan CD133: n ilmentymämallia normaalissa ihossa ja epiteelikudoksissa. Menetelmä. Neljänkymmenen kolmen ekcriini-ja apokriinikasvaimen CD133-immunohistokemiallista ilmentymistä verrattiin muihin ihon epiteelikasvaimiin. Lisäksi virtaussytometriaa käytettiin neljän epiteelikasvaimen, muun muassa yhden porokarsinooman, CD133-ilmentymän havaitsemiseen. Tulos. Cd133-immunoreaktiota havaittiin rauhasrakenteita muodostavien solujen apikaalisessa tai apikolateraalisessa pinnassa. Hyvän-tai pahanlaatuisten kasvainten kiinteiden alueiden soluja ei värjätty. Porokarsinoomasta johdetut viljelmäsolut osoittivat 22% CD133-positiivisista soluista virtaussytometriaa käyttäen, kun taas okasolusyöpäviljelmät sisälsivät alle 0,1%. Päätelmä. Nämä havainnot viittaavat siihen, että CD133 on erityinen rauhasten erilaistumisen merkki, joka voitaisiin sisällyttää ihokasvainten diagnostiseen paneeliin, jossa on mahdollinen ekcriini-tai apokriininen erilaistuminen. Cd133: n käyttöä CSCs: n merkkiaineena on kuitenkin tulkittava varoen ihokokeissa.

1. Johdanto

viime vuosina on raportoitu lisääntyvästä todistusaineistosta, joka tukee käsitystä siitä, että kyky ylläpitää kasvaimen muodostumista ja kasvua on yksinomaan pienessä solupopulaatiossa, jota kutsutaan syövän kantasoluiksi (CSCs). Haku markkereita, jotka osoittavat kantasolujen kaltainen fenotyyppi näiden kasvaimen aloittavan solut on aktiivinen tutkimusala, ja useita kantasolujen markkereita on kuvattu viime aikoina ihon kasvaimia .

CD133 on hiiren prominiini-1: n, viiden transmembraanidomeenin solupinnan glykoproteiinin, ihmisen homologia, joka on saanut huomattavaa huomiota, koska sen ilmentyminen rajoittuu erilaisiin somaattisten kantasolujen alapopulaatioihin . Tämä pinta-antigeeni löydettiin monoklonaalisen vasta-aineen kohteena, joka on määritelty MAB AC133-merkkiaineeksi, joka ilmaistaan ihmisen sikiön maksasta ja luuytimestä peräisin olevien CD34-positiivisten hematopoieettisten kantasolujen alapopulaationa . Tämän jälkeen CD133: a havaittiin erilaisissa ihmisen normaaleissa kudoksissa, kuten munuaisissa, eturauhasessa, aivoissa ja haimassa, ja sen havaittiin liittyvän erityisesti mikrovilleihin ja muihin plasman kalvoprojektioihin . Lisäksi tämä antigeeni on tunnistettu myös hematologisissa maligniteeteissa ja useissa kiinteissä ihmisen kasvaimissa, mukaan lukien gliasyöpä, eturauhassyöpä, munuaissyöpä, maksakarsinooma, kolorektaalisyöpä ja maligni melanooma . Tavoitteena monet näistä tutkimuksista oli määrittää olemassaolo CSCs, määritelty pieni ryhmä syöpäsoluja, joilla on kyky itse uudistumista, kasvaimen aloittamista, ja kasvaimen kasvun ylläpito. Ac133-positiivisten solujen puhdistuksessa rutiininomaisesti käytettävät vasta-aineet kohdistuvat huonosti tunnettuihin glykosyloituneisiin epitoopeihin, joiden spesifisyys on epävarma. Vaikka CD133: n toiminnallinen aktiivisuus on edelleen kiistanalainen eikä sen fysiologista toimintaa ole vielä määritetty , on käymässä selväksi, että tämä solun pintaproteiini on ainutlaatuinen merkkiaine sekä plasmakalvon ulokkeissa että kalvomikrodomaaneissa . On ehdotettu, että tässä solukohdassa CD133 voi toimia kalvon lipidikoostumuksen säätelijänä tai se voi osallistua solujen napaisuuden ja migraation mekanismeihin .

aiemmissa tutkimuksissa, joissa on raportoitu ihmisen rauhasten epiteelin CD133-immunohistokemiallista värjäytymistä, kuten sylkirauhasissa, kyynelrauhasissa, haiman tiehyissä, endokermisissä rauhasissa ja hikirauhasissa, on kuvattu cd133: n erikoinen ilmentymistapa . Näissä epiteelikudoksissa CD133: n on osoitettu lokalisoituvan polarisoituneiden solujen apikaalisten alueiden plasmakalvon ulokkeisiin. Samanlainen CD133-apinen sytoplasmainen värjäytymismalli lumenia ympäröivissä soluissa on havaittu myös munasarja -, paksusuoli-tai haimasyövissä .

hikirauhasen soluja värjäävän CD133-vasta-aineen löytyminen sai meidät suunnittelemaan tutkimuksen, josta nyt raportoimme, jotta voitaisiin arvioida CD133: n ilmentymistä ihon ekcriinissä ja apokriinisissä kasvaimissa.

2. Materiaalit ja menetelmät

2.1. Tapaukset

retrospektiivinen haku haki 43 aiemmin diagnosoitua ihon ekcriiniä ja apocrine adnexal-kasvainta Albaceten yliopistollisen sairaalan patologian osaston tiedostoista. Kaikista tapauksista saatiin lasilevyjä, parafiinilohkoja ja histopatologisia raportteja. Slides were reviewed and adnexal skin tumors were diagnosed according to the criteria of the World Health Organization (WHO) classification , including eccrine spiradenoma (), nodular hidradenoma (), eccrine hidrocystoma (), poroma (), porocarcinoma (), syringocystadenoma papilliferum (), chondroid syringoma (), syringoma (), cylindroma (), hidradenoma papilliferum (), apocrine hidrocystoma (), microcystic adnexal carcinoma (), and apocrine carcinoma (). Tähän tutkimukseen otettiin mukaan myös tyvisolusyöpä () ja okasolusyöpä (), jotta näissä kasvaimissa saatuja tuloksia voitiin verrata hikirauhasen kasvaimissa saatuihin tuloksiin. Arvioidaksemme cd133: n ilmentymistä normaalilla iholla analysoimme ihoa eri alueilta, jotka saatiin kuuden kirurgisesti poistetun ihokasvaimen marginaaleista ja kolmesta ruumiinavauksesta.

ihosyöpäsoluviljelmästä saatiin seitsemän näytettä ihmisen ihokasvaimista, jotka vastasivat yhtä ekcriiniporokarsinoomaa ja kuutta okasolusyöpää. Näistä tapauksista saatu tuore kudos sisällytettiin dulbeccon modifioituun Eagle ’ s Mediumiin (dmem), jota täydennettiin penisilliinillä/streptomysiinillä ja fungitsonilla heti kirurgisen resektion jälkeen.

2, 2. Immunohistokemia

Formaliini kiinteä, parafiiniin upotettu kudososa, jonka leveys oli 4 µm, leikattiin, parafinoitiin ksyleeniin ja nesteytettiin lajitellussa etanolisarjassa. Endogeeninen peroksidaasiaktiivisuus estyi 3% H2O2: lla 5 minuutin ajan. Dioja hoidettiin lämmön indusoimalla epitooppihaulla ja immunostroitiin kolmella eri anti-CD133 monoklonaalisella vasta-aineella: AC133 monoklonaalinen vasta-aine, 293c3 monoklonaalinen vasta-aine ja AC141 monoklonaalinen vasta-aine (kaikki miltenyi Biotecista Saksasta). Vasta-aineita testattiin eri laimennoksilla ja inkubaatiohetkillä. CD133-tunnistus tehtiin EnVision system-HRP: n (Dako, Glostrup, Tanska) avulla Dakocytomation-Autostainer-alustalla valmistajan ohjeiden mukaisesti. Diaminobentsidiiniä (Dab-substraattijärjestelmä, Dako, Glostrup, Tanska) käytettiin kromogeenina. Testatuista kolmesta eri anti-CD133-vasta-aineesta vain yksi, monoklonaalinen AC133-vasta-aine, toimi parafiinissa. Kaksi muuta testattua vasta-ainetta eivät tuottaneet tulosta, koska näillä vasta-aineilla inkuboiduissa kohdissa ei havaittu värjäytymistä tai koska immunosisältöä pidettiin epäspesifisenä, kun käytettiin suuria vasta-ainepitoisuuksia (samanlaisia värjäytymiä havaittiin negatiivisilla kontrolleilla). Monoklonaalinen ac133-vasta-aine antoi luotettavia tuloksia testatuista parafiiniin upotetuista osista. Asetamme tälle vasta-aineelle 1 : 10 laimennuksen ja 40 minuutin inkubaation huoneenlämmössä ensisijaisiksi työolosuhteiksi. Tämän jälkeen kaikki kokeet tehtiin kyseisissä olosuhteissa.

ihon osia, joissa oli normaalit hikirauhaset, käytettiin positiivisina kontrolleina. Lisäksi sektioissa käytettiin normaaleja hikirauhasia kasvaimien viereisestä ihosta sisäisinä positiivisina kontrolleina. Negatiiviset kontrollit tehtiin jättämällä anti-CD133-vasta-aine pois primaarisen vasta-ainehedelmöityksen aikana.

kasvainten kiinteiden alueiden ja akinaari-tai duktaalirakenteiden Immunohistokemiallinen värjäytyminen arvioitiin erikseen. Cd133-värjäys luokiteltiin puolikvantitatiivisella asteikolla. Akinaari – tai duktaalirakenteet arvioitiin seuraavasti: ( − ) ei värjäytymistä; ( + ) eritysmateriaalin värjäytyminen eristettyjen tiehyiden tai akinien lumenissa ja/tai muutamien tiehyiden tai akinien apikaalisen tai luminaalisen rajan heikko värjäytyminen; ( ++ ) useimpien kasvaimessa esiintyvien tiehyiden tai akinien apikaalisen tai luminaalisen rajan selkeä värjäytyminen; ( + + + ) kaikkien kasvaimessa esiintyvien tiehyiden tai akinien apikaalisen tai luminaalisen rajan värjäytyminen. Kaksi vanhempaa patologia (EP ja SYNC) arvioi CD133-ilmaisun sokkona ilman kliinistä ja patologista tietoa. Ristiriitaisissa arvioinneissa molemmat patologit arvioivat diakuvat uudelleen monipään mikroskoopilla, ja sopimukseen päästiin.

2, 3. Syöpäviljely Ihokasvaimista

kasvaimen fragmentit eriteltiin mekaanisesti ja entsymaattisesti pilkkoutumalla tyypin IA kollagenaasilla (2 mg / mL) (Gibco, Invitrogen) Hank: n tasapainotetussa suolaliuoksessa (HBSS) 37°C: ssa 2 tunnin ajan. Solut suodatettiin 40 µm: n nailonverkon läpi, ja ne dissosioitiin edelleen serologisten pipettien avulla. Pilkottu kudos sentrifugoitiin 1000 ×g: n kokoon 10 minuutin ajan ja pelletti pestiin useita kertoja, jotta saatiin yksisolususpensio. Eristetyt solut pinnoitettiin viljelmäpulloihin ja kasvatettiin 37°C: n lämpötilassa dmem/F12-väliaineessa, joka sisälsi 10% sikiäin-nautaseerumia ja jota täydennettiin penisilliinillä/streptomysiinillä ja fungitsonilla.

2, 4. Virtaussytometrinen analyysi

kaikki kokeet tehtiin solususpensioilla, jotka oli valmistettu primaariviljelmän ensimmäisessä siirrossa kasvaimista. Solut irrotettiin 0, 02% EDTA: lla fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) 15 minuutin ajan 37°C: ssa ja pestiin PBS: llä ennen värjäystä. Solususpensiot säädettiin tasolle soluja / mL, ja niitä inkuboitiin suositellulla vasta-ainelaimennoksella (1/10) 20 minuutin ajan pimeässä (4°c). Negatiivisina kontrolleina käytettiin näytteitä, joissa ei ollut primaarista vasta-ainetta. Käytetty vasta-aine oli anti-CD133/1 (AC133) – APC (Miltenyi Biotec). Sitoutumattomat vasta-aineet poistettiin pesemällä PBS: llä, ja solut suspendoitiin uudelleen sopivaan puskurimäärään. Analyysi tehtiin lsrii-virtaussytometrillä (BD Biosciences). Tiedot analysoitiin Summit V5.0.1: n avulla. 5170 ohjelmisto (Dako).

3. Tulokset

3.1. Kliiniset löydökset

Potilaskohortti koostui 29 miehestä ja 23 naisesta, joiden ikä vaihteli 24-90 vuodesta (mediaani 49 vuotta). Esiintymispaikat olivat vaihtelevia, useimmat paikoittaisia pään ja kaulan alueella. Kliiniset tiedot on esitetty taulukossa 1. Kaikille potilaille tehtiin poikkeava ihobiopsia.

3, 2. Immunohistokemialliset löydökset

kolmesta eri monoklonaalisesta vasta-aineesta, joita testattiin formaliinikiinnitetyillä parafiiniin upotetuilla kudososuuksilla, ja edellisten raporttien mukaisesti vain AC133 antoi herkkiä ja luotettavia tuloksia. Tällä vasta-aineella havaittu immunohistokemiallinen värjäytymismalli liittyi läheisesti kudosarkkitehtuuriin. Värjäytyminen paikantui lähinnä duktaali-tai rauhasrakenteita muodostavien solujen apikaaliselle pinnalle. Näissä rakenteissa anti-CD133-vasta-ainetta käytettäessä havaitut immunohistokemialliset löydökset on esitetty taulukossa 1 ja kuvattu alla. Cd133-positiivisuutta ei voitu osoittaa kiinteillä alueilla, jotka olivat peräisin tutkituista adnexal-kasvaimista tai tyvisolusyövistä ja okasolusyövistä.

3, 2, 1. Normaalin kudoksen

CD133 ilmentymistä havaittiin normaalien ekcriinirauhasten akiinin ja terminaalisten tiehyeiden solujen endoluminaalisella tai apikaalisella pinnalla (Kuva 1 a). Normaalien hikirauhasten eritysosassa sijaitsevien eccrine-solujen lateraalikalvossa muodostuneet solunväliset canaliculit värjäytyivät selvästi(Kuva 1 (b)), samoin kuin eccrine-tiehyjen lumenissa esiintyvä eritys. Normaalien apokriinisten rauhasten värjäytymistä terminaalitiehyissä havaittiin solujen apikaalisella rajalla, vaikkakin hajanaisella jakautumisella. Näiden rauhasten asinaarisilla alueilla, joilla apokriininen mestauseritys oli ilmeistä, CD133: ssa näkyi vain heikko tai negatiivinen värjäytyminen.

(a)

(b)

(a)
(b)

3.2.2. Kasvaimia

CD133 ei ilmennyt yhdessäkään tutkitussa levyepiteelis-tai tyvisolusyövässä. Ac133-vasta-aineen avulla tässä työssä analysoidut adnexal-kasvaimet osoittivat seuraavan värjäyskuvion (yhteenveto taulukossa 1).

hyvänlaatuiset kasvaimet, joissa on Ekcriiniä tai Apokriinistä erilaistumista. Kaikissa eccrine spiradenoma tapauksissa esiintyi CD133 immunoreaktiivisuutta apical kalvo kanavan kaltaisia rakenteita läsnä tuumorikyhmyt. Kaikkien analysoitujen eccrine hidrocystoma-tapausten unilokulaarisia kystia muodostavien epiteelisolujen luminaalipinta oli myös positiivinen. Kolmessa kuudesta eccrine poroma-tapauksesta esiintyneet kanavat ja pienet kystat osoittivat sisäisen solukerroksen voimakasta värjäytymistä proliferoituneista tubuluksista, ja tämä värjäys sijaitsi solujen endoluminaalirajalla. Kolme muuta analysoitua poroma-tapausta osoittivat samaa värjäyskuviota useimmissa tubuluksissa, mutta cd133-positiivisuuden ( ++ ) tai ( + ) värjäyskuviolla. Kanavamaiset rakenteet, joita oli neljässä cylindroomatapauksessa, osoittivat myös immunoreaktiivisuutta epiteelisolujen apikaalisessa kalvossa. Neljän kondroidisyringooman värjäytyminen oli huomattavaa, ja kaikki läsnä olevat tiehyt, jotka muodostivat satunnaisia haarautuvia rakenteita, osoittivat voimakasta positiivisuutta apikaalisessa kalvossa (kuva 2). Laajentuneet ja mutkaiset kanavat, jotka johtavat kaikkien syringokystoadenoma papilliferum-tapausten kystisiin tiloihin, osoittivat immunoreaktiivisuutta epiteelisolujen apikaalisessa osassa tai kystien luminaalipinnalla voimakkuudella, joka vaihteli välillä (++) ja (+++) (kuva 3). Nodulaariseksi hidradenoomaksi diagnosoiduissa viidessä tapauksessa havaittiin eristettyjä kanavamaisia rakenteita, jotka olivat positiivisia CD133: lle, ja tubulusten muodostavien solujen apikaalista värjäytymistä (Kuva 4), joiden voimakkuus vaihteli välillä (++) ja (+++). Kahdessa hidradenoma papilliferum-tapauksessa ilmeni myös CD133: n ilmentyminen rauhasrakenteiden apikaalisessa osassa. Vain kahdessa testatuista kuudesta syringoomatapauksesta havaittiin yhdenmukaista värjäytymistä kasvainten muodostaneiden pienten tiehyjen luminaalipinnalla, joita reunustivat tavallisesti kaksi kerrosta kuutiollisia epiteelisoluja. Apocrine hidrocystoma tapauksissa ei ole osoittanut mitään positiivista immunoreaktiivisuutta.

pahanlaatuiset kasvaimet, joissa on Ekcriiniä tai Apokriinistä erilaistumista. Apokriiniseksi karsinoomaksi diagnosoidun kystan luminaalipinnalla ei voitu osoittaa immunoreaktiivisuutta. Tässä tutkimuksessa analysoidut kaksi mikrokystistä adnexal-karsinoomaa osoittivat vahvaa CD133-positiivisuutta solujen apikaalisella pinnalla, jotka muodostivat putkimaisten rakenteiden pienen ja suuren Luminan. CD133-immunosäilytys voidaan osoittaa hyvin epätyypillisissä soluissa, jotka ympäröivät porokarsinoomatapauksen putkimaisia rakenteita (kuva 5).

(a)

(b)

(a)
(b)

Figure 5

Ductal structures of porocarcinoma seen in H&E sections (a) are CD133 positive (b).

3.3. Primaariviljelmien Luonnehdinta ihmisen Ihokasvaimista ja Virtaussytometriatutkimus

seitsemän ihmisen ihokasvaimista johdettua näytettä käsiteltiin tavoitteena saada yhden solun suspensioita. Kasvaimista saatujen solujen riittämättömän määrän tai sieni-tai bakteerikontaminaation vuoksi vain neljä näytettä onnistuttiin viljelemään ja analysoimaan solujen pinnan CD133/1 epitooppiekspressiota varten. Nämä onnistuneesti viljellyt koepaloja ovat yksi eccrine porokarsinooma ja kolme okasolusyöpää. Mikroskooppinen tutkimus viljellyistä soluista paljasti erilaisia morfologioita, jotka vaihtelivat johdonmukaisesti histologiseen kasvaintyyppiin. Solut okasolusyöpä osoitti epitelioidi tai kara solujen ulkonäkö, kun taas ekcriini porokarsinooma johdettu solut olivat enemmän pyöristetty muoto ja ryhmitelty saarekkeet pienten ja epätyypillisten solujen. Epiteelisolujen esiintyminen näissä viljelmissä vahvistettiin e-cadherinin ja EpCam-positiivisen ilmentymän kautta epiteelimarkkereina.

selvittääksemme, sisälsivätkö ihon kasvainsoluviljelmät cd133-positiivisten solujen populaation, käytimme virtaussytometriaa tutkiaksemme cd133 / 1-pintamarkkerin ilmentymistä AC133-vasta-aineella. Kaikissa okasolusyövän näytteissä oli alle 0,1% positiivisia soluja, kun taas lähes 22% positiivisista soluista todettiin ekcriiniporokarsinoomassa. Kuvassa 6 on edustava histogrammi kahdesta arvioidusta ihokasvaintyypistä.

(a)

(b)

(a)
(b)

Figure 6

CD133 expression profiles in human skin primary tumour cells. Analysis of CD133/1 expression in samples from eccrine porocarcinoma (b) and from squamous cell carcinoma (a). Flow cytometry of porocarcinoma derived cell cultures show a 22% of CD133/1 epitope positive cells and CD133 immunostaining. Okasolusyöpä osoittaa negatiivista värjäytymistä CD133: lle ja 0% positiivisille CD133-soluille virtaussytometriassa.

4. Keskustelu

ihon kantasolubiologian ja karsinogeneesin ymmärtämisen edistyminen riippuu suuresti sille ominaisten kantasolupopulaatioiden merkkiaineiden saatavuudesta . Tunnettuja merkkejä ihon kantasolujen tai kantasolujen, jotka on tunnistettu muissa elimissä tai kasvaimia voidaan käyttää havaitsemiseen ihon CSCs. Yksi näistä iholta testattavista merkkiaineista on CD133-proteiini (prominin-1). Ensimmäiset tiedot CD133: n ilmentymisestä käyttäen monoklonaalista vasta-ainetta AC133, joka on tuotettu uutta kantasolujen glykoproteiini-antigeenia vastaan, osoittivat, että CD133 ilmentyi selektiivisesti ihmisen sikiön maksasta ja luuytimestä sekä verestä saaduissa CD34-hematopoieettisissa kantasoluissa ja progenitorisoluissa . Sen jälkeen useat raportit ovat osoittaneet, että prominiini-1: tä voidaan käyttää ihmisen kantasolujen tunnistamiseen ja eristämiseen eri lähteistä , kuten hematopoieettisesta järjestelmästä , eturauhasesta , haimasta tai munuaisesta . Lisäksi monoklonaalisia vasta-aineita CD133: a vastaan on käytetty tuumoria käynnistävien solujen tai CSCs: n oletetun populaation tunnistamiseen ja eristämiseen useissa ihmisen karsinoomissa ja malignissa melanoomassa . Glioomassa CD133-positiivisten syöpäsolujen määrän lisääntymistä sekä näiden soluryppäiden esiintymistä on ehdotettu merkittäväksi ennustavaksi tekijäksi riippumatta muista tekijöistä, kuten kasvaimen laadusta . Toisissa tutkimuksissa, joissa käytettiin erilaisia ja uusia anti-CD133-klooneja, on kuitenkin esitetty, että CD133: n ilmentyminen ei rajoitu kantasoluihin ja progenitorisoluihin, vaan näyttää ilmenevän hiiren ja ihmiskudosten aikuisten epiteelisoluissa . Esimerkiksi käyttämällä CD133 klooni, nimeltään 13A4, johdettu hiiren prominin-1, Weigmann et al. osoitettu prominiini-1: n ilmentyminen neuroepiteelisolujen ja aikuisten munuaisten proksimaalisten tubulusten apikaalisella pinnalla sekä Karbanová et al. ihmisen prominiini-1-polypeptidiä vastaan tuotetulla monoklonaalisella vasta-aineella (80B258) havaittiin immunoreaktiivisuutta aikuisten ihmiskudoksissa, erityisesti rauhasten epiteelissä. Nämä tulokset osoittavat, että tarvitaan lisätutkimuksia sen selvittämiseksi, onko AC133-antigeeni, jonka on aiemmin todettu virtaussytometriassa rajoittuvan CD34-positiivisiin progenitorisoluihin, aikuisten epiteelisoluissa . On esitetty, että havaittu muuttuva CD133-ilmentymä liittyy erilaisten vasta-aineiden erilaiseen affiniteettiin CD133: n eri glykosyloituneisiin muotoihin . Monoklonaalinen vasta-aine AC133 tunnistaa prominiini-1: n glykosyloidun epitoopin , ja mielenkiintoista on, että tämän proteiinin glykosylaatio voi muuttua solujen erilaistumisen tilasta riippuen tai sitä voidaan muuttaa pahanlaatuisen transformaatioprosessin aikana . Ihmisen ihokasvaimia koskevassa tutkimuksessamme olemme havainneet, että CD133: n ilmentyminen riippuu suuresti hikirauhasten tiehyiden ja hikirauhasten erityksen muodostumisesta. CD133-immunoreaktiivisuutta havaittiin pääasiassa useimpien hyvän-ja pahanlaatuisten ekcriinikasvainten kanavamaisten rakenteiden tai kystien apikaalisella/endoluminaalisella pinnalla. Yhdessäkään tutkituista kasvaimista, ei hyvän-eikä pahanlaatuisessa, ei ollut yksittäisiä tai pieniä cd133-positiivisten neoplastisten solujen ryppäitä kiinteillä alueilla. Vastaavaa cd133-värjäytymismallia erityssolujen apikaalisessa solukalvossa on aiemmin raportoitu normaaleissa putkimaisissa rakenteissa, kuten munuaisten proksimaalisissa tubuluksissa tai paksusuolen syövän kasvainrauhasissa . CD133-värjäystä havaittiin myös munasarjasyövän lumenia muodostavien solujen apikaalisessa/endoluminaalisessa pinnassa . Näissä tapauksissa CD133: n apinen sijainti on yhdistetty tämän molekyylin mahdolliseen eritystoimintaan. CD133-värjäyksen morfologinen jakautuminen osoittaa korrelaatiota normaalien kudosten ja rauhasten hyvin tunnistettujen eritysrakenteiden kanssa, mikä viittaa cd133: n toiminnalliseen suhteeseen erityksen kanssa. Itse asiassa tutkimuksessamme kasvaimet, joiden epäiltiin olevan peräisin hikirauhasten duktaalialueilta, kuten syringoomat, osoittivat vähemmän voimakasta värjäytymistä kuin ne, jotka olivat peräisin akinaarisista osista.

CD133: n ilmentyminen erilaistuneiden kasvainsolujen solupinnalla on argumentti CD133: a vastaan spesifisenä syövän kantasolumarkkerina iholla. Pienen CD133+ CSC-populaation olemassaoloa ei kuitenkaan voida täysin sulkea pois, sillä se on osoitettu muissa elimissä, joissa CD133 ilmaistaan molempien, CSCs: n ja erilaistuneiden kasvainsolujen solupinnalla .

yhdessä löydöksemme osoittavat ac133-vasta-aineen spesifisen immunohistokemiallisen ilmentymän ekcriinirauhasten erilaistuneiden normaalien ja neoplastisten solujen erityspinnalla. Kokeita, joissa tätä vasta-ainetta käytetään CSCs: n merkkiaineena ihossa, on tulkittava varoen. AC133 vasta-aine on herkkä ja spesifinen merkki ihon rauhasten erilaistumista, hyödyllinen diagnoosi kasvaimia mahdollisesti eccrine tai apocrine erilaistumista.

kiitokset

kirjoittajat ovat kiitollisia Pedro Javier Benito Castellanosille ja Laura Abendañolle teknisestä tuesta.