Reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción: un pionero

Dado que el tratamiento contra la recurrencia, la metástasis y la resistencia del cáncer siguen siendo un desafío en las clínicas, la implementación de la terapia génica del cáncer ha seguido siendo una opción próspera y exigente que podría superar tales dificultades . Está bien reconocido que las células benignas pueden convertirse en células cancerosas después de una transición maligna, pero sigue sin estar claro si las células cancerosas pueden revertirse genética y epigenéticamente a un fenotipo benigno . La reprogramación mediada por factores de transcripción ha surgido recientemente como un enfoque in vitro para permitir que las células cancerosas recuperen funciones benignas.

Como se discutió anteriormente, la tecnología iPSC, como un enfoque sofisticado de reprogramación, no solo se ha explotado para inducir una transición somática de células somáticas diferenciadas terminales a pluripotencia, sino que también se ha utilizado para generar CSC para la caracterización oncogénica . Además, la tecnología iPSC también se ha utilizado con frecuencia para inducir la reprogramación de células cancerosas a células pluripotentes con un fenotipo benigno. En 2009, Utikal et al. se reprogramaron los melanocitos humanos y la línea celular de melanoma de ratón a células IPSC con un fenotipo benigno mediante la introducción de factores Yamanaka con una eficiencia que varía de 0,05 a 0,1%. Las células IPSC derivadas de líneas celulares de melanoma R545 mostraron expresión endógena de Oct4, Klf4 y c-Myc, desmetilación de los promotores Oct-4 y NANOG y pérdida de tumorigenicidad in vivo. Tras la interrupción de la expresión lentiviral inducible por doxiciclina de los factores Yamanaka mediante la retirada de doxiciclina, las quimeras de ratón derivadas de las células de melanoma reprogramadas mantuvieron su benignidad y no formaron un tumor visible a los 5 meses de edad, lo que indica que las células reprogramadas se sometieron a un proceso de diferenciación normal para producir células benignas in vivo.

En 2010, Miyoshi et al. se encontró que la expresión de genes asociados a pluripotencia, como NANOG, antígeno embrionario 4 específico de estadio (SSEA-4), TRA-1-60 y TRA-1-81, se elevó después de introducir factores Yamanaka en las células cancerosas pancreáticas, hepáticas y colorrectales. Reprogramar el ADN invertido y la metilación de histonas en regiones promotoras específicas para volver a expresar genes asociados a la pluripotencia de modo que las células cancerosas reprogramadas pudieran desarrollar patrones similares al ectodermo, mesodermo y endodermo. Además, las células cancerosas pluripotentes poseían una mayor sensibilidad al agente quimioterapéutico 5-fluorouracilo (5-Fu), lo que llevó a una posible importancia clínica para revocar la resistencia a la quimioterapia/radio adquirida a través de la reprogramación de células cancerosas. Además, las células cancerosas reprogramadas pudieron diferenciarse en varios linajes, incluidas las células epiteliales, mesenquimales y neuronales (denominadas colectivamente células cancerosas post pluripotentes). Las células cancerosas post pluripotentes eran menos malignas en comparación con las células cancerosas parentales in vitro y estaban libres de potencial tumorígeno según el ensayo de formación de tumores en ratones con NOD/SCID. Sin embargo, la eficiencia de reprogramación de células cancerosas a células cancerosas pluripotentes sigue siendo baja, lo que sugiere que solo una minoría de células tumorales podrían reprogramarse con éxito en células cancerosas pluripotentes. Estudios posteriores también demostraron que otros factores de transcripción combinatorios, como el homólogo Lin-28 (LIN28), Oct-4, SOX2 y NANOG, también fueron capaces de reprogramar el adenocarcinoma de pulmón y el cáncer gastrointestinal en CPI con carcinogenicidad tumoral aliviada y potencial metastásico . La reprogramación mediada por factores de transcripción puede ser dirigida, por una variedad de factores asociados a la diferenciación, para formar células funcionales de diversos linajes . Aunque tal enfoque de reprogramación es factible y éticamente aceptable para reactivar el estado post epigenético de las células cancerosas en un estado pluripotente benigno, la eficiencia y la seguridad de la reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción siguen siendo una tarea desafiante que debe resolverse antes de que se convierta en una terapia prometedora para el cáncer .

Los factores de transcripción asociados a pluripotencia combinatoria mostraron capacidades comprobadas para reprogramar células cancerosas en UIPSC con el potencial de diferenciarse aún más en células normales. Además, los investigadores han encontrado recientemente que los factores específicos del linaje pueden reprogramar directamente las células cancerosas en células somáticas funcionales al pasar por alto el estadio pluripotente, lo que podría disminuir el riesgo de transformación maligna de las células cancerosas pluripotentes inducidas .

Región de grupo de punto de interrupción (BCR)-Leucemia murina Abelson el oncógeno viral homólogo 1 (ABL1)+ precursor de células B La leucemia linfoblástica aguda (LLA-B) se caracteriza por el bloqueo de la diferenciación de células B. Por lo tanto, la reprogramación de BCR-ABL1+ B-LLA en las células no leucémicas se ha considerado como una excelente estrategia para superar el bloqueo de diferenciación . Un estudio previo ha demostrado que la proteína alfa de unión al CCAAT/potenciador (C / EBPa), un factor de transcripción asociado con el desarrollo de la LLA, puede inducir una transición celular de las células del linaje B murino a los macrófagos con una eficiencia de aproximadamente el 100%. Este trabajo anterior llevó a considerar si la C/EBPa también se podría usar para reprogramar el cáncer con linajes de células B en macrófagos funcionales. En 2013, Rapino et al. se reprogramaron con éxito líneas de células B de linfoma y leucemia humanas a células similares a macrófagos mediante la introducción de C / EBPa. De acuerdo con el análisis de más de 20 líneas de células B de linfoma y leucemia humanas, el 80% de las células podrían reprogramarse parcial o totalmente en células similares a macrófagos. Las células B de leucemia linfoblástica reprogramadas mostraron menos carcinogenicidad in vitro, con una regulación ascendente de los marcadores asociados a macrófagos y una regulación descendente de los marcadores asociados a células B. Los experimentos en modelos murinos también confirmaron que no se formó ningún tumor después de la inyección de células leucémicas linfoides infectadas con C/EBPa en ratones inmunodeficientes. Aunque la mayoría de las líneas celulares de linfoma y leucemia analizadas se reprogramaron al menos de forma parcial o transitoria, solo dos líneas celulares con una expresión endógena más alta de C/EBPa sostuvieron efectivamente la transición celular a células similares a macrófagos, lo que indica que la tasa de éxito de la reprogramación de células cancerosas depende en gran medida de la expresión endógena de C/EBPa .

Los estudios anteriores se han centrado en la introducción de un único factor de transcripción nuclear para aliviar la origen tumoral no solo de las neoplasias malignas asociadas a células B, sino también del carcinoma hepatocelular (CHC) . Para reprogramar con éxito las células cancerosas en células con funciones normales, es necesario que varios factores de transcripción nuclear funcionen de forma cooperativa . Sigue siendo difícil determinar si existe una fórmula específica de factores de transcripción que pueda inducir eficazmente la transición del cáncer de malignidad a benignidad con alta eficiencia y seguridad. Los avances recientes en la secuenciación de ARN unicelular han permitido a los investigadores obtener perfiles más completos de diferentes células cancerosas, y se ha identificado y caracterizado un número cada vez mayor de candidatos a factores de transcripción para mejorar la eficiencia de la reprogramación de células cancerosas .

En 2014, Huang et al. se encontró que una combinación de factores de transcripción que incluyen el factor nuclear 1 alfa de hepatocitos (HNF1A), el factor nuclear 3 alfa de hepatocitos (HNF3A) y la proteína A3 de caja forkhead (FOXA3) jugaron un papel importante en la reprogramación de fibroblastos humanos en células similares a los hepatocitos. Luego, en 2019, Cheng et al. demostró que la combinación de HNF1A, HNF4A y FOXA3 también podía inducir la reprogramación directa de HCC en células similares a hepatocitos con funciones normales, incluida la secreción de albúmina, la síntesis de glucógeno, la captación de lipoproteínas de baja densidad, así como el control del metabolismo y la desintoxicación. En este estudio, se utilizó adenovirus para introducir sinérgicamente HNF1A, HNF4A y FOXA3 en líneas celulares HCCLM3 y Huh7. Basándose en su hepatotropismo intrínseco, en comparación con la reprogramación iPSC, la infección mediada por adenovirus indujo aproximadamente un 100% de células HCC para expresar los factores de transcripción seleccionados, lo que mejoró significativamente la eficacia de la infección y la reprogramación. Los factores de transcripción combinatorios indujeron la expresión de genes asociados a hepatocitos y cambios morfológicos en las líneas celulares HCCLM3 y Huh7, lo que indica un efecto simultáneo de HNF1A, HNF4A y FOXA3 en la reprogramación de HCC. Los hepatocitos reprogramados mostraron un aumento gradual de las funciones de los hepatocitos y una pérdida de características tumorígenas in vitro. Por ejemplo, los hepatocitos reprogramados de líneas celulares HCCLM3 mostraron un aumento significativo de la expresión de albúmina (ALB) y una disminución de la expresión de alfafetoproteína (AFP). Los resultados del ensayo de formación de colonias, el ensayo de migración y el ensayo de formación de esferoides también indicaron que disminuyeron las capacidades de proliferación y migración, así como el número de CSC hepáticas. Los resultados del microarray de ADNc confirmaron que las células similares a los hepatocitos reprogramados eran genéticamente similares a los hepatocitos humanos primarios. Los modelos murinos también mostraron que las células similares a los hepatocitos reprogramadas perdieron sustancialmente tumorigenicidad in vivo y fueron capaces de reconstruir la estructura hepática durante la regeneración. Además, la molécula de adhesión de células epiteliales (EpCAM)+ subpoblación en las células similares a hepatocitos reprogramadas disminuyó significativamente, lo que sugiere que la reprogramación de células cancerosas a través de HNF1A, HNF4A y FOXA3 podría eliminar eficazmente las CCC para prevenir la recurrencia, la recaída y la resistencia del cáncer en el CHC.

La reprogramación mediada por factores de transcripción se basa en modificaciones genéticas y epigenéticas a través de la entrega de genes específicos . Desde Yamanaka et al. explotado con éxito los factores de transcripción para reprogramar fibroblastos de ratón y humanos en IPSC, la técnica de reprogramación se ha desplegado aún más en el desarrollo de posibles tratamientos contra el cáncer . Sin embargo, se mantuvo la controversia con respecto a la reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción . Varios estudios han demostrado que la reprogramación de células cancerosas a células pluripotentes no siempre produce efectos positivos. Por ejemplo, debido a la presencia de oncogenes como c-Myc, KLF4 y SOX2, las células cancerosas pluripotentes tienen problemas de seguridad en la oncogénesis debido a la diferenciación aberrante . Además, la reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción tiene limitaciones adicionales en términos de costo, eficiencia de introducción y entrega in vivo, lo que ha obstaculizado su potencial en la traducción clínica . El inicio y la progresión del cáncer se relacionan principalmente con mutaciones genéticas y alternaciones epigenéticas complicadas, como la regulación del microRNA, la metilación del ADN, las modificaciones de las histonas y el remodelado cromosómico . La reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción está muy involucrada en estas complejas redes moleculares y el mecanismo subyacente permanece en gran medida inexplorado.

Reprogramación de células cancerosas mediadas por moléculas pequeñas: un cambio de juego

El advenimiento de la reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción ha proporcionado resultados innovadores para demostrar la viabilidad de reprogramar el destino del cáncer . Aunque la reprogramación de células cancerosas mediada por transcripción es ampliamente reconocida como una estrategia potencialmente prometedora contra las neoplasias malignas, las preocupaciones de seguridad y eficacia causadas por las modificaciones transgénicas siguen siendo un bloqueo no despreciable . Las anomalías genéticas, como la activación de oncogenes o el silenciamiento de genes supresores de tumores causados por la inserción de secuencias de ADN exógenas, pueden poner en peligro la traducción clínica futura de la terapia de reprogramación de células cancerosas. Ha habido un enfoque alternativo para reemplazar la infección viral con la entrega de genes transitorios utilizando micropartículas especialmente diseñadas , pero la reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción sigue siendo riesgosa y técnicamente desafiante . Por lo tanto, existe una demanda urgente de establecer estrategias alternativas para inducir una reprogramación eficiente de células cancerosas. Recientemente, la reprogramación de células cancerosas mediada por moléculas pequeñas ha demostrado ser capaz de reprogramar células diferenciadas terminales en un estado pluripotente . Más significativamente, también hay varios estudios que indican que el uso de moléculas pequeñas para inducir la reprogramación de células cancerosas de malignidad a benignidad puede eludir algunas de las limitaciones en la reprogramación de células cancerosas mediada por factores de transcripción .

La reprogramación mediada por moléculas pequeñas tiene ventajas distintivas, que incluyen un costo relativamente bajo, una técnica simple, versatilidad fácilmente sintonizable, permeabilidad y reversibilidad . Las moléculas pequeñas también pueden servir como un excelente candidato para regular eficientemente los procesos celulares a través de vías de señalización dirigidas directamente como las vías Wnt, Erizo e hipopótamo . Es conveniente fabricar moléculas pequeñas y escalar su rendimiento para inducir la reprogramación con diferentes linajes . Además, estas moléculas se pueden utilizar como sondas moleculares para investigar los cambios subyacentes en la señalización molecular durante la reprogramación de células cancerosas, lo que podría conducir a una mejora en la eficiencia de reprogramación y la reducción del efecto fuera del objetivo . Para que la reprogramación de células cancerosas mediada por moléculas pequeñas tenga éxito, es necesario identificar y desarrollar moléculas bioquímicas pequeñas que puedan ayudar a las células cancerosas a superar las barreras epigenéticas y los bloqueos en varias vías de señalización celular . Dado que el uso de la reprogramación independiente de células cancerosas mediadas por moléculas pequeñas para convertir la malignidad en benignidad sigue siendo un desafío hasta el momento, hay un número limitado de estudios en la frontera en expansión .

Mediante la introducción de C / EBPa, Rapino et al. reprogramó con éxito líneas de células B de linfoma y leucemia humanas a células similares a macrófagos. El hallazgo lleva a una idea teórica de si las moléculas pequeñas también pueden ejercer efectos en la reprogramación de la leucemia linfoblástica. En el año 2015, McClellan et al. se encontró que las citocinas inductoras de diferenciación mieloide, como el ligando de tirosina quinasa similar al FMS (FLT3L), la interleucina 7 (IL-7), la interleucina 3 (IL-3), el factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), el factor estimulante de colonias de macrófagos (MCSF) y los factores de transcripción mieloide como C/EBPa y UP.1 podría reprogramar eficientemente células BCR-ABL1 + B-ALL humanas primarias en células similares a macrófagos. Después de 2 semanas de exposición a citocinas inductoras de diferenciación mieloide, se encontró que el 53% de los blastos leucémicos CD19+/CD34+ aumentaban significativamente la expresión de CD14 y disminuían la expresión de CD19. La subpoblación CD14+ / CD19 se clasificó y purificó para producir > 98% de células similares a macrófagos con expresión estable de CD14. Las células reprogramadas poseían morfología similar a macrófagos, inmunofenotipos de superficie, perfil de expresión génica, generación de ráfagas oxidativas y capacidad fagocítica. Además, las células reprogramadas podrían aliviar significativamente la leucemogenicidad, manifestada por la pérdida de la capacidad de formar xenoinjertos malignos en modelos animales. Los resultados podrían conducir a una estrategia viable que aproveche la reprogramación de células cancerosas para tratar BCR-ABL1+ B-ALL in vivo. Sin embargo, los resultados generados por la reprogramación leucémica sugerida en la reprogramación in vivo se encontraban en una etapa preliminar, ya que las aberraciones genéticas subyacentes causadas por la inducción de citoquinas siguen sin explorarse. Además, 5 de cada 12 casos clínicos mostraron resistencia a la reprogramación de CD14+. Por lo tanto, no está claro cómo elegir prospectivamente a los pacientes que se beneficiarían de la reprogramación leucémica. Se requiere más investigación para superar estas limitaciones antes de que pueda convertirse en una estrategia terapéutica eficiente contra las neoplasias malignas asociadas a células B.

En el año 2019, Ishay-Ronen et al. convirtió con éxito células invasivas de cáncer de mama en adipocitos funcionales para prevenir la metástasis a través de la inducción de moléculas pequeñas de transición epitelial–mesenquimal (EMT) y re-diferenciación. La EMT es un proceso de reprogramación bien reconocido que puede mejorar la plasticidad celular . Como se mostró anteriormente, el proceso de reprogramación para generar células cancerosas pluripotentes generalmente se asocia con el potencial de diferenciarse aún más en varios linajes con funciones celulares normales a través del factor de transcripción o la inducción de moléculas pequeñas . Por lo tanto, Ishay-Ronen et al. TME inducida mediante el tratamiento in vitro de células de cáncer de mama Pi2T con factor de crecimiento transformante beta (TGF-β) y re-diferenciadas las células PI2T reprogramadas en adipocitos funcionales mediante el uso de insulina, dexametasona, rosiglitazona y proteína morfogenética ósea 2 (BMP2). Los resultados revelaron que las células Py2T reprogramadas podrían ser inducidas a someterse a adipogénesis con un cóctel de pequeñas moléculas. Después de al menos 20 días de tratamiento con TGF-β y factores inductores de adipogénesis, las células Py2T reprogramadas con características mesenquimatosas expresaron significativamente mayores C/EBPa y CCAAT/proteína beta de unión al potenciador (C/EBPß), que eran reguladores de la adipogénesis, en comparación con sus contrapartes con características epiteliales. La pluripotencia versátil de las células de cáncer de mama reprogramadas se confirmó mediante otras diferenciaciones relacionadas con el mesénquima, como la osteogénesis y la condrogénesis, con detección de marcadores específicos de osteo y condro, como el factor de transcripción Sp7 (Osterix), el colágeno tipo II y la región Y-box 9 (SOX9) que determina el sexo. Además, utilizaron modelos murinos MTflECad (epiteliales) y MTΔCad (mesenquimales) para probar la eficiencia y especificidad de los procesos de reprogramación y re-diferenciación relacionados con la EMT. La reprogramación inducida por TGF-β in vitro y la reprogramación mediada por la recombinasa Cre in vivo mostraron que aproximadamente el 60% de las células cancerosas de mama expresaban C/EBPa+. Los resultados confirmaron que el TGF-β desempeñó un papel vital en la regulación del proceso de reprogramación relacionado con la EMT y las características mesenquimatosas de las células cancerosas tanto in vitro como in vivo. Además, el tratamiento combinatorio con trametinib y rosiglitazona en el modelo de ratón condujo a una adipogénesis eficiente in vivo de las células de cáncer de mama reprogramadas. Dado que trametinib y rosiglitazona son estadounidenses Medicamentos aprobados por la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) para inducir la EMT y la adipogénesis, usarlos como mediadores en la terapia de reprogramación de células cancerosas es clínicamente más factible en comparación con los enfoques que usan otros mediadores . Los beneficios significativos de este estudio no son solo para la identificación de las moléculas pequeñas en la regulación de la reprogramación y re-diferenciación de células de cáncer de mama, sino también para el establecimiento de un modelo replicable que puede ser explotado en la evaluación de la reprogramación de células de cáncer en muchos otros tipos de cáncer con diferentes linajes. La eliminación de células cancerosas mesenquimales invasivas mediante terapia de reprogramación de células cancerosas mediada por moléculas pequeñas puede tratar la resistencia a la quimioterapia/radio adquirida y la metástasis del cáncer, pero la especificidad del tratamiento con trametinib más rosiglitazona y la prevención de efectos secundarios se deben investigar más en estudios posteriores .

Como se ha señalado, durante la reprogramación de células cancerosas, la apoptosis celular parece no verse afectada por las moléculas pequeñas, al igual que la proliferación celular. Por ejemplo, el tiempo de la fase G0/G1 se prolonga, y los genes promotores del ciclo celular se suprimen, lo que indica que se ha producido una mejora de la benignidad . La reprogramación de células cancerosas mediada por moléculas pequeñas proporciona un enfoque no viral y no integrado para inducir la transición de células cancerosas a células benignas. Como una de las estrategias potenciales, este enfoque de reprogramación es muy prometedor para suprimir de manera efectiva el desarrollo y la recaída de varias neoplasias malignas.

Hasta ahora, los avances en la reprogramación de células cancerosas se enfrentan a muchos desafíos. En primer lugar, algunos tipos de cáncer (como el carcinoma de nasofaringe) comprenden una gran subpoblación de células cancerosas indiferenciadas, lo que dificulta la reprogramación de dichas células cancerosas en células benignas debido a la heterogeneidad del tumor in situ . La reprogramación directa podría ser un enfoque potencialmente factible que se pueda aplicar a estos tipos de cáncer, pero hasta ahora no ha habido pruebas prometedoras . En segundo lugar, hay muchas moléculas pequeñas que pueden servir como excelentes candidatos en la reprogramación de células cancerosas in vitro, pero solo unas pocas de ellas han sido aprobadas oficialmente por los Estados Unidos. FDA, ya que cada medicamento molecular pequeño debe revisarse estrictamente en función de sus beneficios y riesgos potenciales para los pacientes previstos . Las investigaciones futuras deben concentrarse en el desarrollo de reprogramación de células cancerosas mediada por agentes farmacológicos para minimizar las preocupaciones de seguridad y eficiencia. Además, las funciones de las moléculas bioquímicas pequeñas no son suficientemente específicas, lo que sugiere que a veces pueden ocurrir efectos potenciales fuera del objetivo durante la reprogramación . Además, la dosis de moléculas pequeñas para inducir la reprogramación y diferenciación de células cancerosas in vivo debe examinarse cuidadosamente para evitar efectos adversos potencialmente perjudiciales en los pacientes. Por lo tanto, es urgente descifrar con precisión los mecanismos moleculares de la reprogramación de células cancerosas para aliviar los efectos secundarios. Se considera necesario emplear un método de administración eficiente para reprogramar moléculas pequeñas asociadas, ya que muchos fracasos del tratamiento no han sido el resultado de la ineficiencia de los medicamentos en sí, sino de la ineficiencia de la administración de medicamentos .

Reprogramación de células cancerosas mediadas por microARN y exosomas: alternativas emergentes

Se ha informado de que los microARN, incluidos los miRNA302s , miRNA200c , miRNA369 , miRNA34a y miRNA30b, son cruciales para mejorar la expresión de genes asociados a pluripotencia. El microRNA ha sido considerado como biomarcadores y sondas moleculares útiles para apuntar a tipos celulares específicos y manipular la reprogramación celular. Sin embargo, regular de manera precisa y eficiente la transición celular para tratar las neoplasias mediante la explotación del microRNA sigue siendo un desafío hasta el momento.

Lin et al. primero mostró que las células de cáncer de piel humano podían reprogramarse en iPSCs usando microRNA-302, que se expresan abundantemente en ESC humanos, pero desaparecieron rápidamente después de la diferenciación. Se ha notificado que las células cancerosas pluripotentes con transfección de microRNA-302s presentan una disminución de la carcinogenicidad, desmetilación genómica y expresiones elevadas de SSEA-3/4, SOX2, NANOG y Oct-3/4. Dado que el tamaño del microRNA-302s era de solo aproximadamente 1 kb, la eficiencia de transfección alcanzó > 99% según los análisis de citometría de flujo, lo que sugiere que el tamaño de un factor exógeno desempeñó un papel importante en la eficiencia de la transfección . Sin embargo, solo el 2% -5% de las células cancerosas se reprogramaron con éxito en células pluripotentes tipo ES. El análisis de expresión génica reveló que las células pluripotentes tipo ES mostraban más de un 86% de similitud con las líneas de células ES humanas H1 y H9. Bajo medios inductores de diferenciación específicos del linaje, las células tipo ES derivadas del cáncer se diferenciaron aún más en células benignas, incluidas neuronas, condrocitos y fibroblastos. También se ha demostrado que la familia microRNA-200 mejora la EMT a través de la orientación del eje homeobox 1 (ZEB1) de unión a la caja electrónica con dedos de zinc, que se sabe que inhibe el gen supresor tumoral E-cadherina . En las células humanas de cáncer de colon, se ha demostrado que los miembros que pertenecen a la familia del microRNA34 son nuevos blancos de transcripción del gen supresor tumoral p53 .

Los exosomas tienen la capacidad de albergar componentes que imitan la constitución del microambiente embrionario . Los factores de reprogramación relacionados con el ESC están encerrados en exosomas derivados del ESC humano y se pueden administrar a las células cancerosas para inducir la transición de la malignidad a la benignidad. En 2017, Zhou et al. se demostró que los exosomas derivados de ESC humanos podrían inhibir la proliferación del cáncer in vitro y aliviar la carcinogenicidad in vivo. Cuando las líneas celulares de cáncer Colo-320 y MCF-7 se cultivaron en medio condicionado por ESC, mostraron una reexpresión de marcadores asociados a la pluripotencia, incluidos Oct-4, NANOG y SOX2, y reducción de la carcinogenicidad in vitro, lo que indica la reprogramación exitosa de malignidad a benignidad. Aproximadamente 90% de las células de cáncer de mama perdieron la expresión de vimentina después de la exposición al medio acondicionado ESC, mientras que no se determinó la eficiencia de reprogramación de las células de cáncer colorrectal. Los resultados sugirieron que los exosomas podrían suprimir la oncogénesis al promover los niveles de expresión de marcadores críticos asociados a la pluripotencia. Después de eso, las células cancerosas podrían revertirse a un estado pluripotente y restaurar las vías de diferenciación benignas. Sin embargo, las células tipo ES derivadas del cáncer no estuvieron libres de formación tumoral in vivo, y se observó una reducción del tamaño tumoral de 60% con las células cancerosas tratadas con exosomas derivados de ESCs. El medio condicional que contenía exosomas inhibió la proliferación del cáncer al prolongar el tiempo en la fase G1, mientras que redujo el tiempo en las fases S y G2/M. Zhou et al. también se encontró que el nivel de expresión de ciclina D1 se redujo para mantener la hipofosforilación del retinoblastoma después del tratamiento del medio acondicionado, lo que condujo a la inhibición de la transición de fase G1/S. Además, la fosforilación en el residuo de serina 10 en la histona H3, como una de las modificaciones epigenéticas vitales durante la fase G2, se redujo significativamente . De acuerdo con hallazgos anteriores, varias sustancias del microambiente embrionario humano tienen el potencial de inhibir la progresión del cáncer y aliviar la carcinogenicidad in vivo .