InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). «LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.» Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Aquí mostramos que las células T reguladoras de Foxp3 ( + ) (células Treg) previnieron la colitis mediada por ILC3 de una manera independiente de la IL-10. Las células Treg inhibieron la producción de IL-23 e IL-1beta a partir de macrófagos CX3CR1(+) residentes en el intestino, pero no de células dendríticas CD103 (+). Además, las células Treg restringieron la producción de ILC3 de IL-22 mediante la supresión de la producción de IL-23 e IL-1beta en macrófagos CX3CR1 (+). Esta supresión dependía del contacto y estaba mediada por el gen de activación latente-3 (LAG-3)-un receptor de punto de control inmunitario-expresado en las células Treg. La participación de LAG-3 en MHC clase II condujo a una profunda inmunosupresión de macrófagos residentes en tejidos CX3CR1 (+). Nuestro estudio revela que la salud de la mucosa intestinal se mantiene mediante un eje impulsado por la comunicación de las células Treg con los macrófagos residentes que retienen los estímulos inflamatorios necesarios para la función ILC3.

Gordon, S. R., et al. (2017). «La expresión de PD-1 por macrófagos asociados a tumores inhibe la fagocitosis y la inmunidad tumoral.»Nature 545( 7655): 495-499. PubMed

La proteína 1 de muerte celular programada (PD-1) es un receptor de punto de control inmunitario que se regula al alza en las células T activadas para la inducción de tolerancia inmunitaria. Las células tumorales con frecuencia sobreexpresan el ligando para PD-1, ligando 1 de muerte celular programada (PD-L1), facilitando su escape del sistema inmunitario. Los anticuerpos monoclonales que bloquean la interacción entre PD-1 y PD-L1, al unirse al ligando o al receptor, han mostrado una eficacia clínica notable en pacientes con una variedad de cánceres, como melanoma, cáncer colorrectal, cáncer de pulmón de células no pequeñas y linfoma de Hodgkin. Aunque está bien establecido que el bloqueo de PD-1-PD-L1 activa las células T, se sabe poco sobre el papel que esta vía puede tener en los macrófagos asociados a tumores (TAMs). Aquí mostramos que tanto el ratón como el humano Tams expresan PD-1. La expresión de TAM PD-1 aumenta con el tiempo en modelos de cáncer de ratón y con el aumento del estadio de la enfermedad en cánceres humanos primarios. La expresión de TAM PD-1 se correlaciona negativamente con la potencia fagocítica contra las células tumorales, y el bloqueo de PD-1-PD-L1 in vivo aumenta la fagocitosis de macrófagos, reduce el crecimiento tumoral y alarga la supervivencia de ratones en modelos de ratón de cáncer dependientes de macrófagos. Esto indica que las terapias PD-1-PD-L1 también pueden funcionar a través de un efecto directo sobre los macrófagos, con implicaciones sustanciales para el tratamiento del cáncer con estos fármacos.

Moynihan, K. D., et al. (2016). «Erradicación de tumores grandes establecidos en ratones mediante inmunoterapia combinada que involucra respuestas inmunitarias innatas y adaptativas.»Nat Med. doi: 10.1038/nm.4200. PubMed

El bloqueo de puntos de control con anticuerpos específicos para la proteína asociada a linfocitos T citotóxicos (CTLA)-4 o muerte celular programada 1 (PDCD1; también conocida como PD-1) provoca una regresión tumoral duradera en el cáncer metastásico, pero estas respuestas dramáticas se limitan a una minoría de pacientes. Este resultado subóptimo probablemente se deba en parte a la compleja red de vías inmunosupresoras presentes en los tumores avanzados, que es poco probable que se superen con una intervención en un único punto de control de señalización. Aquí describimos una inmunoterapia combinada que recluta una variedad de células inmunitarias innatas y adaptativas para eliminar grandes cargas tumorales en modelos tumorales singenéticos y un modelo de melanoma de ratón modificado genéticamente; hasta donde sabemos, los tumores de este tamaño no han sido curables previamente mediante tratamientos basados en inmunidad endógena. La máxima eficacia antitumoral requería cuatro componentes: anticuerpo dirigido al antígeno tumoral, interleucina-2 recombinante con semivida prolongada, anti-PD-1 y una potente vacuna de células T. Los experimentos de agotamiento revelaron que se necesitaban células T CD8+, células dendríticas de presentación cruzada y varios otros subconjuntos de células inmunitarias innatas para la regresión tumoral. El tratamiento eficaz indujo la infiltración de células inmunitarias y la producción de citoquinas inflamatorias en el tumor, aumentó la captación de antígenos tumorales mediados por anticuerpos y promovió la diseminación de antígenos. Estos resultados demuestran la capacidad de una respuesta inmunitaria endógena inducida para destruir tumores grandes y establecidos y dilucidar las características esenciales de las inmunoterapias combinadas que son capaces de curar la mayoría de los tumores en entornos experimentales que normalmente se consideran intratables.

Arnold, I. C., et al. (2015). «Los monocitos/macrófagos CD11c promueven la inflamación intestinal inducida por Helicobacter hepático crónica a través de la producción de IL-23.»Inmunol de la mucosa. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

En las enfermedades intestinales inflamatorias, una ruptura en las interacciones microbianas del huésped acompaña la activación sostenida de las células inmunitarias en el intestino. Los estudios funcionales sugieren un papel clave de la interleucina-23 (IL-23) en la orquestación de la inflamación intestinal. La IL-23 puede ser producida por varios fagocitos mononucleares (MNPs) después de la estimulación microbiana aguda, pero se sabe poco sobre las fuentes celulares clave de IL-23 que impulsan la inflamación intestinal crónica. Aquí hemos abordado esta pregunta utilizando un modelo fisiológico de colitis impulsada por bacterias. Al combinar la ablación condicional de genes y el perfil de expresión génica, encontramos que la producción de IL-23 por parte de las MNPs CD11c+ era esencial para desencadenar la inmunopatología intestinal e identificamos los monocitos y macrófagos MHCII+ como la principal fuente de IL-23. La expresión de IL-23 por los monocitos se adquirió durante su diferenciación en el intestino y se correlacionó con la expresión del complejo de histocompatibilidad mayor clase II (MHCII) y CD64. En contraste, las células dendríticas CD103+ CD11b dependientes de Batf3 fueron prescindibles para la colitis inducida por bacterias en este modelo. Estos estudios refuerzan el papel patógeno de los monocitos en las respuestas desreguladas a las bacterias intestinales e identifican la producción de IL-23 como un componente clave de esta respuesta. Una mayor comprensión de las fuentes funcionales de la IL-23 en diversas formas de inflamación intestinal puede conducir a nuevas estrategias terapéuticas dirigidas a interrumpir la patología inmune impulsada por la IL-23.Publicación en línea de Mucosal Immunology advance, 5 de agosto de 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., et al. (2015). «Los Macrófagos CON SIGNO DC(+) Controlan la Inducción de Tolerancia al Trasplante.»Immunity 42( 6): 1143-1158. PubMed

Las células efectoras de tejidos del linaje monocitario pueden diferenciarse en diferentes tipos de células con función celular específica dependiendo de su entorno. El fenotipo, los requisitos de desarrollo y los mecanismos funcionales de los macrófagos inmunoprotectores que median en la inducción de la tolerancia al trasplante siguen siendo esquivos. Aquí, demostramos que el bloqueo costimulatorio favoreció la acumulación de macrófagos con expresión de SIGNOS DC que inhibieron la inmunidad de las células T CD8 (+) y promovieron la expansión numérica de las células Treg CD4 (+) Foxp3 (+). Mecánicamente, ese compromiso simultáneo del SIGNO DE CC por ligandos fucosilados y señalización TLR4 fue necesario para la producción de IL-10 inmunorreguladora asociada con una supervivencia prolongada del aloinjerto. Supresión de macrófagos que expresan SIGNOS de CC in vivo, interfiriendo con su desarrollo dependiente de CSF1, o previniendo la tolerancia abrogada de la vía de señalización de SIGNOS de CC. En conjunto, los resultados proporcionan nuevos conocimientos sobre los efectos tolerogénicos del bloqueo costimulatorio e identifican a los macrófagos supresores del SIGNO DC(+) como mediadores cruciales de la tolerancia inmunológica con las implicaciones terapéuticas concomitantes en la clínica.

Kaminsky, L. W., et al. (2015). «Se Requiere una Función Redundante de las Células Plasmacitoides y Dendríticas Convencionales Para Sobrevivir a una Infección Vírica Natural.»J Virol 89( 19): 9974-9985. Los virus PubMed

que se propagan sistémicamente desde un sitio periférico de infección causan morbilidad y mortalidad en la población humana. Las células mieloides innatas, incluidos los monocitos, los macrófagos, las células dendríticas derivadas de monocitos (mo-DC) y las células dendríticas (DC), responden temprano durante la infección viral para controlar la replicación viral, lo que reduce la propagación del virus desde el sitio periférico. El virus de la ectromelia( ECTV), un ortopoxvirus que infecta naturalmente al ratón, se propaga sistémicamente desde el sitio periférico de la infección y provoca la muerte de ratones susceptibles. Si bien las células fagocíticas desempeñan un papel necesario en la respuesta a la TVEC, no está claro el requisito de poblaciones individuales de células mieloides durante las respuestas inmunitarias agudas a infecciones virales periféricas. En este estudio, se utilizaron una variedad de métodos de depleción específicos de mieloides para diseccionar las funciones de los subconjuntos individuales de células mieloides en la supervivencia de la infección por TVC. Se demostró que los DC son los principales productores de interferones tipo I (T1-IFN), citocinas necesarias para la supervivencia, tras la infección por TVEC. Se requirió DC, pero no macrófagos, monocitos o granulocitos, para el control del virus y la supervivencia de ratones después de la infección por TVC. La depleción de DC plasmocitoide (pDC) sola o del subconjunto de DC residente linfoide (CD8alpha (+) DC) sola no confirió susceptibilidad letal a la TVEC. Sin embargo, la función de al menos uno de los subconjuntos de CC pDC o CD8alpha(+) es necesaria para la supervivencia de la infección por TVC, ya que los ratones agotados de ambas poblaciones fueron susceptibles a la exposición a la TVC. La presencia de al menos uno de estos subconjuntos de DC es suficiente para la producción de citoquinas que reduce la replicación de la TVEC y la propagación del virus, facilitando la supervivencia después de la infección. IMPORTANCIA: Antes de la erradicación del virus de la variola, el ortopoxvirus que causa la viruela, un tercio de las personas infectadas sucumbieron a la enfermedad. Tras la erradicación exitosa de la viruela, las tasas de vacunación con la vacuna contra la viruela han disminuido significativamente. En la actualidad, hay una incidencia cada vez mayor de infecciones zoonóticas por ortopoxvirus para las que no hay tratamientos eficaces. Por otra parte, la seguridad de la vacuna contra la viruela es motivo de gran preocupación, ya que pueden surgir complicaciones que produzcan morbilidad. Al igual que muchos virus que causan enfermedades humanas significativas, los ortopoxvirus se propagan desde un sitio periférico de infección para convertirse en sistémicos. Este estudio aclara la necesidad temprana de células inmunitarias innatas para controlar una infección periférica con TVC, el agente causal de mousepox. Informamos que hay redundancia en la función de dos subconjuntos de células inmunitarias innatas en el control de la propagación del virus temprano durante la infección. El control viral mediado por estos subconjuntos celulares presenta un objetivo potencial para terapias y diseño racional de vacunas.

Naik, S., et al. (2015). «La interacción comensal-dendrítica-celular especifica una firma inmune protectora única de la piel.»Nature 520( 7545): 104-108. PubMed

La piel representa la interfaz principal entre el host y el entorno. Este órgano también alberga billones de microorganismos que desempeñan un papel importante en la homeostasis de los tejidos y en la inmunidad local. Las comunidades microbianas de la piel son muy diversas y se pueden remodelar con el tiempo o en respuesta a los desafíos ambientales. Cómo, en el contexto de esta complejidad, los microorganismos comensales individuales pueden modular diferencialmente la inmunidad de la piel y las consecuencias de estas respuestas para la fisiología de los tejidos siguen sin estar claras. Aquí mostramos que los comensales definidos afectan predominantemente la inmunidad de la piel e identifican los mediadores celulares involucrados en esta especificación. En particular, la colonización con Staphylococcus epidermidis induce células T IL-17A(+) CD8 ( + ) que albergan la epidermis, mejoran la inmunidad de barrera innata y limitan la invasión de patógenos. Las respuestas de células T comensales específicas son el resultado de la acción coordinada de subconjuntos de células dendríticas residentes en la piel y no están asociadas con la inflamación, lo que revela que las células residentes en el tejido están preparadas para detectar y responder a las alteraciones en las comunidades microbianas. Esta interacción puede representar un medio evolutivo por el cual el sistema inmunitario de la piel utiliza señales comensales fluctuantes para calibrar la inmunidad de barrera y proporcionar protección heteróloga contra patógenos invasores. Estos hallazgos revelan que el paisaje inmune de la piel es un entorno altamente dinámico que puede remodelarse rápida y específicamente mediante encuentros con comensales definidos, hallazgos que tienen profundas implicaciones para nuestra comprensión de la inmunidad y las patologías específicas de los tejidos.

Sheng, K. C., et al. (2014). «IL-3 y CSF-1 interactúan para promover la generación de macrófagos productores de IL-10 CD11c+.»PLoS One 9 (4): e95208. PubMed

Desentrañar los mecanismos de la hematopoyesis regulados por múltiples citoquinas sigue siendo un desafío en hematología. La IL-3 es una citocina alérgica con potencial multilinaje, mientras que el CSF-1 se produce en estado estacionario con cobertura de linaje restringida. Aquí, descubrimos un papel instructivo del LCR-1 en la hematopoyesis mediada por IL-3. CSF-1 promovió significativamente la expansión celular CD11c+ impulsada por IL-3 y amortiguó la generación de basófilos y mastocitos a partir de médula ósea C57BL/6. Otros estudios indicaron que el eje CSF-1/CSF-1R contribuyó significativamente a la generación celular CD11c+ inducida por IL-3 a través de la mejora de la monopoyesis asociada a c-Fos. Las células CD11c + inducidas por IL-3 o IL-3/CSF-1 fueron competentes en maduración celular y endocitosis. Tanto las células de IL-3 como de IL-3 / CSF-1 carecían de la apariencia clásica de las células dendríticas y se parecían a los macrófagos en morfología. Ambas poblaciones produjeron un alto nivel de IL-10, además de IL-1, IL-6 y TNFalpha, en respuesta a LPS, y fueron estimuladores de células T relativamente pobres. En conjunto, estos hallazgos revelan un papel del LCR-1 en la mediación de la vía hematopoyética de la IL-3 a través de la monopoyesis, que regula la expansión de los macrófagos CD11c+.

Greter, M., et al. (2012). «GM-CSF controla la homeostasis de células dendríticas de tejido no linfoide, pero es prescindible para la diferenciación de células dendríticas inflamatorias.»Immunity 36( 6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) es una citocina crítica para la generación in vitro de células dendríticas (CDs) y se cree que controla el desarrollo de CDs inflamatorias y CDs CD103 (+) residentes en algunos tejidos. Aquí mostramos que, en contraste con la comprensión actual, el receptor de Csf-2 actúa en el estado estacionario para promover la supervivencia y la homeostasis de CD103(+) y CD11b(+) residentes en el tejido no linfoide. La ausencia de receptores de LCR-2 en los DCs pulmonares anuló la inducción de la inmunidad de células T CD8(+) después de la inmunización con antígenos particulados. Por el contrario, el receptor de Csf-2 era prescindible para la diferenciación y la función innata de los SCd inflamatorios durante las lesiones agudas. En su lugar, el DCs inflamatorio requería un receptor Csf-1 para su desarrollo. Por lo tanto, el LCR-2 es importante en la inmunidad de células T CD8(+) inducida por la vacuna a través de la regulación de la homeostasis de CC de tejido no linfoide en lugar del control de la CC inflamatoria in vivo.

Li, W., et al. (2012). «Intravital 2-photon imaging of leukocyte trafficking in beating heart.»J Clin Invest 122( 7): 2499-2508. La microscopía intravital de dos fotones PubMed

ha ampliado sustancialmente nuestra comprensión de las diferencias específicas de tejidos y órganos en la regulación de las respuestas inflamatorias. Sin embargo, se sabe poco sobre la regulación dinámica del reclutamiento de leucocitos en el tejido cardíaco inflamado, en gran parte debido a las dificultades técnicas inherentes al tejido móvil de imágenes. Aquí, reportamos un método para obtener imágenes de corazones murinos latiendo utilizando microscopía intravital de 2 fotones. Usando este método, visualizamos el tráfico de neutrófilos al inicio y durante la inflamación. La lesión por reperfusión de isquemia inducida por trasplante o ligadura transitoria de arterias coronarias llevó al reclutamiento de neutrófilos al corazón, su extravasación de las venas coronarias e infiltración del miocardio donde formaron grandes grupos. El injerto de corazones que contienen ICAM-1 mutante, un ligando importante para el reclutamiento de neutrófilos, redujo las velocidades de arrastre de los neutrófilos dentro de los vasos e inhibió notablemente su extravasación. Se observó un deterioro similar con la inhibición de Mac-1, un receptor de ICAM-1. El bloqueo de LFA-1, otro receptor ICAM-1, impidió la adherencia de los neutrófilos al endotelio y la extravasación en injertos cardíacos. Dado que las respuestas inflamatorias en el corazón son de gran relevancia para la salud pública, este enfoque por imágenes es prometedor para estudiar los mecanismos específicos del corazón del reclutamiento de leucocitos e identificar nuevas dianas terapéuticas para el tratamiento de enfermedades cardíacas.

Tagliani, E., et al. (2011). «Coordinate regulation of tissue macrophage and dendritic cell population dynamics by CSF-1.»J Exp Med 208(9): 1901-1916. PubMed

Los macrófagos tisulares (Mphis) y las células dendríticas (DCs) desempeñan un papel esencial en la homeostasis tisular y la inmunidad. No está claro cómo se mantienen estas células en sus densidades características en diferentes tejidos. Con la ayuda de una nueva técnica citométrica de flujo para evaluar las tasas relativas de reclutamiento de precursores transmitidos por la sangre, examinamos la dinámica de la población de Mphi y DC en el útero de ratón embarazada, donde el rápido crecimiento tisular facilitó una disección de los mecanismos reguladores subyacentes. Demostramos cómo la dinámica de la Mphi y, por lo tanto, las densidades tisulares de la Mphi, son controladas localmente por el LCR-1, un factor de crecimiento pleiotrópico cuyo nivel de actividad in situ varió ampliamente entre las capas de tejido uterino. El CSF-1 actuó en parte induciendo la proliferación de Mphi y en parte estimulando la extravasación de los monocitos Ly6C(hi) (Mos) que sirvieron como precursores de Mphi. El reclutamiento de Mo dependió de la producción de ligandos de receptores de quimiocinas CCR2 por Mphis uterino en respuesta al LCR-1. Inesperadamente, una vía paralela regulada por el LCR-1, pero independiente del CCR2, influyó en las densidades de tejido de CC uterino al controlar las tasas locales de extravasación pre-CC. En conjunto, estos datos proporcionan información celular y molecular sobre la regulación de las densidades de tejido de Mphi en condiciones no inflamatorias y revelan un papel central para el LCR-1 en la coordinación de la homeostasis de Mphi y DC.

Lim, A. K., et al. (2009). «El bloqueo de anticuerpos de c-fms suprime la progresión de la inflamación y la lesión en la nefropatía diabética temprana en ratones obesos db/db.»Diabetologia 52(8): 1669-1679. PubMed

OBJETIVOS / HIPÓTESIS: La lesión renal mediada por macrófagos juega un papel importante en el desarrollo de nefropatía diabética. El factor estimulante de colonias (LCR)-1 es una citocina que se produce en los riñones diabéticos y promueve la acumulación, activación y supervivencia de macrófagos. CSF-1 actúa exclusivamente a través del receptor c-fms, que solo se expresa en células del linaje monocito-macrófago. Por lo tanto, utilizamos el bloqueo c-fms como estrategia para atacar selectivamente la lesión mediada por macrófagos durante la progresión de la nefropatía diabética. MÉTODO: Ratones obesos, diabéticos de tipo 2 db/db BL/KS con albuminuria establecida fueron tratados con un anticuerpo monoclonal neutralizante anti-c-fms (AFS98) o IgG de control compatible con isotipo de 12 a 18 semanas de edad y examinados para detectar lesión renal. RESULTADOS: El tratamiento con AFS98 no afectó a la obesidad, la hiperglucemia, los niveles de monocitos circulantes ni la albuminuria establecida en ratones db/db. Sin embargo, AFS98 previno la hiperfiltración glomerular y las variables suprimidas de inflamación en el riñón diabético, incluidos los macrófagos renales (acumulación, activación y proliferación), los niveles de ligando 2 de motivo de quimiocina CC (ARNm y proteína de orina), la activación renal de las vías proinflamatorias (cinasa amino-terminal c-Jun y factor de transcripción activador 2) y los niveles de ARNm Tnf-alfa (también conocido como Tnf). Además, AFS98 disminuyó el daño tisular causado por los macrófagos, incluida la lesión tubular (apoptosis e hipertrofia), el daño intersticial (proliferación celular y acumulación de miofibroblastos) y la fibrosis renal (ARNm Tgf-beta1 y Col4a1). CONCLUSIONES / INTERPRETACIÓN: El bloqueo de c-fms puede suprimir la progresión de la nefropatía diabética establecida en ratones db/db al atacar la lesión mediada por macrófagos.