Clonación de ADNc
La transcripción inversa de ARN a ADN complementario (ADNc) es el primer paso en muchos flujos de trabajo de biología molecular, incluidos los estudios de expresión génica utilizando PCR en tiempo real, clonación génica y en la creación de bibliotecas de ADNc.
Una biblioteca de ADNc es una colección de secuencias de ADN clonadas que son complementarias al ARNm que se extrajo de una célula o tejido dado. La biblioteca representa solo las secuencias transcritas dentro de una muestra específica y puede proporcionar una gran cantidad de información sobre la identidad y la funcionalidad de genes específicos. Las bibliotecas de ADNc también proporcionan información sobre la abundancia de ARN producido en una muestra porque cuanto más se exprese un ARNm, más ADNc se producirá.
Al construir bibliotecas de ADNc, es esencial que los clones de ADNc sean representativos de la población original de ARN, tanto en términos de su longitud total como de su abundancia relativa. Esto significa que la elección de la transcriptasa inversa utilizada en este paso es de importancia crítica. Al clonar cDNAs y crear bibliotecas de cDNA, recomendamos nuestra gama de productos UltraScript y UltraScript 2.0. Estas enzimas altamente activas y termoestables son capaces de sintetizar un producto de ADNc de mayor longitud, incluso con cantidades limitadas de ARN, ARN expresado en niveles bajos o que contiene un alto grado de estructura secundaria.