Durante su envejecimiento in vivo, los glóbulos rojos (GR) aumentan de densidad y se vuelven más pequeños. Las subpoblaciones de glóbulos rojos definidas por edad generalmente se recogen por centrifugación. Se ha propuesto un fraccionamiento de acuerdo con el volumen de glóbulos rojos como una alternativa mejorada a dicha separación por edades. Debido a que algunos datos reportados en la literatura indican algunas discrepancias entre los dos métodos, las muestras de sangre se separaron por centrifugación o por centrifugación de contraflujo, y se estudiaron algunas características de los glóbulos rojos así fraccionados. Las actividades enzimáticas disminuyen cuando la densidad aumenta o cuando el volumen (VCM) disminuye. Sin embargo, la comparación de otros RBC características sugiere fuertemente que estos dos procedimientos no se llevan a la colección de la misma RBC subpoblaciones: por ejemplo, el contenido de la hemoglobina aumenta cuando el MCV se eleva, mientras que permanece constante cualquiera que sea la RBC densidad. Con radiomarcados de las células, se muestra 1) que el más denso de RBC son recuperados en todo el tamaño separados de RBC de las subpoblaciones, aunque tienden a concentrarse en las fracciones con mayor MCV, y 2) que los más pequeños de RBC son casi distribuidos de manera equitativa en todos los RBC subpoblaciones, cualquiera que sea su densidad, mientras que el más grande de RBC son principalmente, pero no exclusivamente, presente en la alta densidad de las fracciones. Por lo tanto, el fraccionamiento según el tamaño no coincide con la separación según la densidad. Junto con los resultados de experimentos in vivo realizados en ratones y con el hecho de que los reticulocitos están presentes en todas las fracciones separadas por tamaño, estos datos sugieren que la centrifugación de contracorriente puede ser un procedimiento muy cuestionable para lograr un fraccionamiento de glóbulos rojos de acuerdo con la edad y, por lo tanto, que el volumen de glóbulos rojos podría no ser un criterio confiable de la edad de los glóbulos rojos.