Diskussion
i den aktuelle undersøgelse forsøgte vi at vurdere, om CD af mus kan bære en fejlrate, der oversættes til et dyrevelfærdsproblem. Vi brugte tid til åndedrætsstop som vores surrogatmarkør for AVMA-kriteriet om “tid, der kræves for at fremkalde bevidsthedstab.”1 vi erkendte, at ren afbrydelse af den høje cervikale rygsøjle over C2 kunne fremkalde åndedrætsstop uden bevidstløshed, men det grove traume ved de forskellige CD-metoder syntes usandsynligt at resultere i dette resultat.
Vi sætter tid til åndedrætsstop svarende til 0 s som vores cutoff for at definere vellykket eutanasi. Vi mener, at enhver eutanasi-metode, hvorefter mus kan fortsætte med at trække vejret (uanset hvor længe) kræver forsigtighed. Hvis den udføres på ikke-bedøvede mus, efterlader ufuldstændig eutanasi en potentielt bevidst mus, der oplever en alvorlig traumatisk skade, indtil en operatør kan gentage proceduren eller skifte til en anden eutanasi-metode. Komplet midthoracic CNS-afbrydelse kan efterlade den kaudale krop smertestillende, men skadet væv omkring og kranial til læsionen kan stadig være smertefuldt.17,25 dyr, der har tilstrækkelig motorisk innervering til at fortsætte respirationen, vil sandsynligvis have tilstrækkelig afferent innervering til, at smerter kan forekomme.
i vores pilotarbejde fortsatte nogle mus med at trække vejret så længe som 15 minutter, før vi euthaniserede dem med natriumpentobarbital; disse mus kunne sandsynligvis have fortsat vejrtrækning endnu længere. Havde de været fjernet fra anæstesi og genvundet bevidsthed med flere rygmarvsskader, kunne deres lidelse have været alvorlig. Selv som et supplement til inhalations-eller injicerbare eutanasi-midler, var en mus til at komme sig (muligvis inde i en slagtekroppe fryser) fra en dårligt udført dislokationsteknik, ville potentialet for smerte eller nød blive forværret. Det er vigtigt, at enhver CD-metode opfylder kravet om, at i det væsentlige 100% af dyrene permanent ophører med at trække vejret straks.
vores 21% mislykkede procent for CD-metoder, baseret på tid til åndedrætsstop, svarede til den mislykkede procent i rapporter om mus, der gennemgik CD, men manglede radiografisk tydelige cervikale rygmarvslæsioner.7,14 forfatterne af disse tidligere undersøgelser7,14 beskriver ikke deres radiografiske metoder. Fordi der ikke blev rapporteret om hændelser med mislykket eutanasi,7,14 forfatterne kan have forkert læst mus, der havde cervikale og thorakale læsioner, men utilstrækkelig distraktion under radiografi som kun thorakale læsioner.
i lyset af tidligere fund,7,14 Vi postulerede, at tilstrækkelig kraftig spænding anvendt overalt langs rygmarven kunne inducere bevidstløshed og åndedrætsstop, selv når skelettraumaet var kaudalt til den anbefalede høj-cervikale region. Vores 100% mislykkede sats for thoracic dislokationsgruppen understøtter ikke denne hypotese. Vi brugte thoracic dislokation i bedøvede mus til at modellere den forkerte teknik, som en dårligt uddannet operatør kan udføre, og vi har verificeret, at korrekt teknik er nødvendig for vellykket eutanasi af mus.
AVMA retningslinjer har behandlet CD generelt uden specifik beskrivelse af proceduren, hvilket afspejler mangel på sammenlignende vurderinger af forskellige CD-teknikker. Forskellige publikationer beskriver forskellige teknikker til udførelse af cervikal dislokation.8,13,14,16,22 andre, inklusive AVMA-Panelrapporterne, skelner ikke mellem forskellige CD-teknikker.3,10,12,24 ud over de 3 metoder, vi valgte, har forfatterne specificeret, at MCD skal udføres ved at trække op i en 30-liters vinkel i håb om, at odontoidprocessen i C2-hvirvlen vil skade rygmarven og derved øge effektiviteten af teknikken.7 brud på denne lille knogleproces i en mus er sandsynligvis ikke synlig radiografisk. Desuden beskriver nogle operatører at trække, indtil kraniet føles at være helt uden tilknytning til rygsøjlen, og det er den metode, vi underviser på vores institution. Denne praksis er rimelig, når CD bruges efter andre eutanasi-teknikker (for eksempel bedøvelsesdosering), men denne længere, langsommere procedure kan forårsage yderligere smerter hos et endnu ikke bevidstløs dyr.postmortem radiografi kunne spille en rolle i vurderingen af succesen med eutanasi efter begivenheden, men denne teknik er arbejdskrævende og skal fortolkes forsigtigt. Vi var bekymrede for, at intakte ledbånd uden tilstrækkelig distraktion kunne holde kraniet tæt nok på rygsøjlen til at maskere vellykket luksus i nogle tilfælde. Vi fandt røntgenbillederne efter døden nemmest at fortolke, når der blev anvendt spænding for at strække slagtekroppen, men det skabte derefter et mistænkeligt mellemrum mellem C2-og C3-hvirvellegemerne, der krævede omhyggelig vurdering. Negative CO2-kun kontroller (figur 2) var nyttige til at skelne læsioner fra normale. Når vi satte tid til åndedrætsstop som vores ‘guldstandard’, bar cervikal radiografi en positiv forudsigelsesværdi på kun 71%. Derfor, når radiografi bruges som et kvalitetskontrol-eller færdighedsvurderingsværktøj, vil nogle tilfælde af mislykket eutanasi blive savnet.
mens alle mislykkede eutanasier havde bryst-eller lændelæsioner (eller begge dele), gjorde det også 50 af de 64 vellykkede eutanasier. Vi konkluderer, at tilstedeværelsen af thoracale eller lumbale læsioner ikke er diagnostisk for dårlig teknik. Derudover havde ingen af de 11 CD-dyr, der gik til 180-s-slutpunktet, observerbare cervikale læsioner. I modsætning hertil gjorde 63 af 64 vellykkede CD-tilfælde det, og musen, der manglede en observerbar cervikal læsion (figur 3), kunne afspejle fejldiagnose af en subtil læsion eller tjene som bevis for, at tilstrækkeligt alvorligt distalt rygmarvstraume kan forårsage åndedrætsstop; faktisk opnåede 2 mus i thoracic dislokationsgruppen i sidste ende åndedrætsstop, før en anden teknik kunne anvendes. Derudover gennemgik 6 CD-mus mislykket eutanasi, men døde før 180-s-slutpunktet, selvom radiografi afslørede cervikale læsioner hos 5 af disse mus. Radiografisk fejldiagnose er mulig, ligesom muligheden for, at mellemskader, skønt radiografisk tydelige, i sidste ende kan være dødelige, men er for langvarige til at kvalificere resultatet som en ‘god død.’
Vi anerkender nogle begrænsninger for vores undersøgelse. Vi udførte ikke alle beskrevne eller mulige variationer af CD i mus. Vi forsøgte ikke at bruge hjernebølger eller andre målinger til at analysere intakt hjernefunktion efter dislokation. Vi fjernede ikke åndedrætsdyr fra anæstesimasken for at vurdere potentialet for tilbagevenden til bevidsthed. Tilstedeværelsen af en tid til åndedrætsstop, der overstiger 0 s, antyder i det mindste minimal intakt hjernefunktion, en tilstand, der synes uforenelig med en ‘god død;’ Vi præsenterer ingen data om dødskvaliteten, når tiden til åndedrætsstop er 0 s.
operatøreffekten, som vi bemærkede, kræver yderligere udforskning. Med kun 2 operatører kunne effekten ikke tilskrives forskelle i operatørens alder, træning, styrke eller nogen anden faktor. Sandsynligvis vil andre operatører afvige i deres succesrate. Opfølgningsundersøgelse for mere fuldstændigt at undersøge operatøreffekten skal tage højde for forskellige operatørers viden om, at de blev scoret, og hvilken effekt denne viden kan have på deres præstationer. At den mere succesrige operatør stadig ikke lykkedes i 8, 1% af tilfældene giver anledning til bekymring.
derudover kan radiografisk diagnose være underlagt en tolkeffekt. Uden en’ guldstandard ‘ til korrekt radiografisk diagnose (for eksempel fravær af en synlig læsion i en vellykket dødshjælp kan enten betyde, at rygmarvsbrud eller luksus på det sted ikke er nødvendigt for hurtig død, eller at radiografen savnede læsionen), kunne vi ikke undersøge muligheden for en tolkeffekt. Pilotarbejde med røntgenbilleder af almindelig film afslørede beskeden uenighed i diagnosen blandt flere dyrlæger, der læste røntgenbillederne.
endelig blev alle mus forskudt under isoflurananæstesi af humane grunde, fordi vi vidste, at vi ville holde mislykkede tilfælde i LIVE og trække vejret i flere minutter i stedet for at gentage proceduren med det samme. Fordi bedøvelsesmidlet afskaffede muskeltonen, kan denne metode modellere postmortem CD bedre end den modellerer CD som den eneste metode til eutanasi. Fordi det er et respiratorisk depressivt middel, kan isofluran have fremskyndet åndedrætsstop i nogle mellemliggende tilfælde. Som et neurobeskyttende middel kan isofluran have forsinket døden. Uanset hvad forhindrede brugen af isofluran os i at vurdere potentiel bevidsthed i de stadig vejrtrækende mislykkede tilfælde, fordi vi aldrig afvænnede dem fra bedøvelsesmidlet for at foretage denne vurdering.
vi konkluderer, at 3 metoder til CD kan resultere i mislykket eutanasi, hvor mus fortsætter med at trække vejret efter forsøget på dislokation. Vi kan ikke sige, om bevidsthed eller smerteopfattelse ledsager dette resultat. Øvelse på bedøvede mus kan være en nyttig træningsmetode, med tid til åndedrætsstop indstillet som mål for praktikantens succes. Radiografi er et arbejdskrævende værktøj til vurdering af færdigheder, der ikke synes at være mere informativt end observation af praksis på bedøvede mus. Hvis yderligere undersøgelser replikerer vores resultater, skal anbefalet praksis ændres, om man skal forbyde CD af ubesvarede mus, identificere en CD-metode med en højere succesrate eller understrege, at mus skal overvåges nøje efter CD, og hvis det stadig trækker vejret (hvilket kan være svært at fastslå i betragtning af motorudladningen, der ofte følger CD), behandles straks gennem den samme eller en alternativ metode til eutanasi.