Korrelation af IFNy, CD107 og CD137 på Enkeltcelleniveau kan bruges til at overvåge t-Celleresponser hos patienter efter immunterapi.

da immunterapier bliver stadig vigtigere i behandlingen af forskellige kræftformer, bliver overvågning af immunresponset for at afspejle terapiens effektivitet også stadig vigtigere. Tidligere var tumorantigen-specifikke humorale reaktioner hos patienter, der fik vacciner mod follikulært lymfom med lav kvalitet (FL) korreleret med kliniske resultater, herunder tumorregression, molekylær remission, progressionsfri overlevelse (PFS) og samlet overlevelse (OS). I modsætning hertil har T-celleimmunresponser været vanskelige at validere. T-celleproliferationsanalyser måler for det meste CD4 T-celleresponser; der henviser til, CD8 T-celler kan være de vigtige effektorer genereret af immunterapier. Analyser designet til at måle CD8 T-celler, dvs. chrom release CTL assays, og IFN-release ELISPOT og intracellulære strømningscytometri assays, er vanskelige at gøre reproducerbare. For at løse dette problem, PBL blev opnået fra FL-patienter, kryokonserveret, og optøet, derefter brugt til at designe en standardiseret metode til påvisning af intracellulær IFN-Larris ved strømningscytometri. Den kombinerede stimulus af opløselige anti-CD3-og anti-CD28-antistoffer giver en robust stimulering, typisk omkring 5% af normale PBL CD8+ T-celler reagerer. Ved at bruge et panel af bestrålede B-celle lymfomcellelinjer som stimulatorer viste vi, at i gennemsnit 1-2% af disse T – celler var i stand til at montere et svar i dette assay. Overraskende nok var CD8 + PBL T-celler fra flere patienter med FL mere lydhøre over for kombineret anti-CD3 og anti-CD28 stimulering såvel som til allo-stimulering, henholdsvis 15 – 22% og 2 – 6%. Dette respons blev ledsaget af overfladeekspression af CD107, en surrogatmarkør for CTL-degranulering, i den samme population af celler som demonstreret ved flerfarvet strømningscytometri. Både IFN-og cd107-responserne blev hæmmet af et anti-klasse i-antistof, V6/32, hvilket antyder en klasse i-begrænset t-cellereceptormedieret respons. Desuden opregulerede disse T-celler på senere tidspunkter CD137 på deres overflade. Dette aktiveringsmolekyle opreguleres på CD8 T-celler som reaktion på specifik antigengenkendelse og tilvejebringer et anti-apoptotisk signal til cellerne. Afslutningsvis kan immunkompetence af CD8 T-celler isoleret fra FL-patienter vurderes gennem allo-stimulering af et panel af B-celle lymfomcellelinjer. Endnu vigtigere er korrelation ved strømningscytometri af 3 uafhængige responsindikatorer (IFN-Krist, CD107 og CD137) inden for enkeltpopulationer af celler til både allo-stimulering og til det specifikke mål, kan føre til bedre forståelse af T-cellernes rolle i immunresponset. I sidste ende skal disse svar valideres med patientresultater i kliniske forsøg med vacciner i lymfom.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.