InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). “LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.” Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Her viser vi, at Rævp3(+) regulerende T-celler (Treg-celler) forhindrede ILC3-medieret colitis på en IL-10-uafhængig måde. Treg-celler hæmmede IL – 23-og IL-1beta-produktionen fra intestinale residente CKS3CR1(+) makrofager, men ikke CD103(+) dendritiske celler. Desuden begrænsede treg-celler ILC3-produktionen af IL – 22 gennem undertrykkelse af CKS3CR1(+) makrofagproduktion af IL-23 og IL-1beta. Denne undertrykkelse var kontaktafhængig og blev medieret af latent aktiveringsgen-3 (LAG-3)-en immun checkpoint-receptor-udtrykt på Treg-celler. Engagement af LAG – 3 på MHC klasse II kørte dyb immunsuppression af CKS3CR1(+) vævsbestandige makrofager. Vores undersøgelse afslører, at sundheden i tarmslimhinden opretholdes af en akse drevet af treg-celler kommunikation med residente makrofager, der tilbageholder inflammatoriske stimuli, der kræves til ILC3-funktion.Gordon, S. R., et al. (2017). “PD-1-ekspression ved tumorassocierede makrofager hæmmer fagocytose og tumorimmunitet.”Natur 545 (7655): 495-499. PubMed

programmeret celledødsprotein 1 (PD-1) er en immunkontrolreceptor, der opreguleres på aktiverede T-celler til induktion af immuntolerance. Tumorceller overudtrykker ofte liganden for PD-1, programmeret celledød ligand 1 (PD-L1), hvilket letter deres flugt fra immunsystemet. Monoklonale antistoffer, der blokerer interaktionen mellem PD-1 og PD-L1 ved binding til enten liganden eller receptoren, har vist bemærkelsesværdig klinisk effekt hos patienter med en række kræftformer, herunder melanom, kolorektal cancer, ikke-småcellet lungekræft og Hodgkins lymfom. Selvom det er veletableret, at PD-1-PD-L1-blokade aktiverer T-celler, vides der kun lidt om den rolle, som denne vej kan have i tumorassocierede makrofager (TAMs). Her viser vi, at både mus og menneskelige TAMs udtrykker PD-1. TAM PD-1 ekspression stiger over tid i musemodeller af kræft og med stigende sygdomsfase i primære humane kræftformer. TAM PD-1-ekspression korrelerer negativt med fagocytisk styrke mod tumorceller, og blokade af PD-1-PD-L1 in vivo øger makrofagfagocytose, reducerer tumorvækst og forlænger overlevelsen af mus i musemodeller af kræft på en makrofagafhængig måde. Dette antyder, at PD-1-PD-L1-terapier også kan fungere gennem en direkte effekt på makrofager med væsentlige implikationer for behandling af kræft med disse midler.

Moynihan, K. D., et al. (2016). “Udryddelse af store etablerede tumorer hos mus ved kombinationsimmunterapi, der engagerer medfødte og adaptive immunresponser.”Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

Kontrolpunktblokade med antistoffer, der er specifikke for cytotoksisk t-lymfocytassocieret protein (CTLA)-4 eller programmeret celledød 1 (PDCD1; også kendt som PD-1) fremkalder holdbar tumorregression i metastatisk kræft, men disse dramatiske reaktioner er begrænset til et mindretal af patienterne. Dette suboptimale resultat skyldes sandsynligvis delvis det komplekse netværk af immunsuppressive veje, der er til stede i avancerede tumorer, som sandsynligvis ikke vil blive overvundet ved intervention ved et enkelt signalkontrolpunkt. Her beskriver vi en kombinationsimmunterapi, der rekrutterer en række medfødte og adaptive immunceller for at eliminere store tumorbyrder i syngeneiske tumormodeller og en genetisk konstrueret musemodel af melanom; så vidt vi ved, har tumorer af denne størrelse ikke tidligere været hærdelige ved behandlinger, der er afhængige af endogen immunitet. Maksimal antitumor effekt krævede fire komponenter: et tumor-antigen-målrettet antistof, et rekombinant interleukin-2 med en forlænget halveringstid, anti-PD-1 og en kraftig t-cellevaccine. Udtømningseksperimenter afslørede, at CD8+ T-celler, krydspræsenterende dendritiske celler og flere andre medfødte immuncelleundersæt var nødvendige for tumorregression. Effektiv behandling induceret infiltration af immunceller og produktion af inflammatoriske cytokiner i tumoren, forbedret antistofmedieret tumorantigenoptagelse og fremmet antigenspredning. Disse resultater viser kapaciteten af et fremkaldt endogent immunrespons til at ødelægge store, etablerede tumorer og belyse væsentlige egenskaber ved kombinationsimmunterapier, der er i stand til at helbrede et flertal af tumorer i eksperimentelle indstillinger, der typisk betragtes som uhåndterlige.Arnold, I. C., Et Al. (2015). “CD11c monocyt / makrofager fremmer kronisk Helicobacter hepaticus-induceret tarmbetændelse gennem produktion af IL-23.”Mucosal Immunol. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

ved inflammatoriske tarmsygdomme ledsager en nedbrydning i værtsmikrobielle interaktioner vedvarende aktivering af immunceller i tarmen. Funktionelle undersøgelser antyder en nøglerolle for interleukin-23 (IL-23) i orkestrering af tarmbetændelse. IL – 23 kan produceres af forskellige mononukleære fagocytter (MNP ‘ er) efter akut mikrobiel stimulering, men der vides kun lidt om de vigtigste cellulære kilder til IL-23, der driver kronisk tarmbetændelse. Her har vi behandlet dette spørgsmål ved hjælp af en fysiologisk model af bakteriedrevet colitis. Ved at kombinere betinget genablation og genekspressionsprofilering fandt vi, at IL-23-produktion ved CD11c+ MNP ‘ er var afgørende for at udløse intestinal immunopatologi og identificerede mhcii+ monocytter og makrofager som den største kilde til IL-23. Ekspression af IL – 23 af monocytter blev erhvervet under deres differentiering i tarmen og korreleret med ekspressionen af større histokompatibilitetskompleks klasse II (MHCII) og CD64. I modsætning hertil var Batf3-afhængige CD103+ CD11b – dendritiske celler dispensable for bakterieinduceret colitis i denne model. Disse undersøgelser forstærker monocytternes patogene rolle i dysregulerede reaktioner på tarmbakterier og identificerer produktion af IL-23 som en nøglekomponent i dette respons. Yderligere forståelse af de funktionelle kilder til IL-23 i forskellige former for tarmbetændelse kan føre til nye terapeutiske strategier, der sigter mod at afbryde IL-23-drevet immunpatologi.Mucosal Immunology advance online publikation 5 August 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., et al. (2015). “DC-SIGN (+) makrofager styrer induktionen af Transplantationstolerance.”Immunitet 42 (6): 1143-1158. PubMed

vævseffektorceller i monocytlinjen kan differentieres til forskellige celletyper med specifik cellefunktion afhængigt af deres miljø. Fænotypen, udviklingsmæssige krav og funktionelle mekanismer for immunbeskyttende makrofager, der formidler induktionen af transplantationstolerance, forbliver undvigende. Her demonstrerer vi, at costimulerende blokade favoriserede akkumulering af DC-tegnudtrykkende makrofager, der hæmmede CD8(+) T-celleimmunitet og fremmede CD4(+)Rævp3(+) treg-celleudvidelse i antal. Mekanisk var det samtidige DC-TEGNINDGREB af fucosylerede ligander og TLR4-signalering påkrævet til produktion af immunregulerende IL-10 forbundet med langvarig allotransplantatoverlevelse. Sletning af DC-tegnudtrykkende makrofager in vivo, der forstyrrer deres CSF1-afhængige udvikling eller forhindrer DC-tegn signalvejen ophævet tolerance. Sammen giver resultaterne ny indsigt i de tolerogene virkninger af costimulerende blokade og identificerer DC-SIGN(+) undertrykkende makrofager som afgørende mediatorer af immunologisk tolerance med de samtidige terapeutiske implikationer i klinikken.Kaminsky, L. V., et al. (2015). “Redundant funktion af Plasmacytoid og konventionelle dendritiske celler er nødvendig for at overleve en naturlig virusinfektion.”J Virol 89 (19): 9974-9985. PubMed

vira, der spredes systemisk fra et perifert infektionssted, forårsager sygelighed og dødelighed i den menneskelige befolkning. Medfødte myeloide celler, herunder monocytter, makrofager, monocytafledte dendritiske celler (mo-DC) og dendritiske celler (DC), reagerer tidligt under virusinfektion for at kontrollere viral replikation, hvilket reducerer virusspredning fra det perifere sted. Ectromelia virus (ECTV), et orthopoksvirus, der naturligt inficerer musen, spredes systemisk fra det perifere infektionssted og resulterer i død af modtagelige mus. Mens fagocytiske celler har en nødvendig rolle i responsen på ECTV, er kravet til individuelle myeloide cellepopulationer under akutte immunresponser på perifer virusinfektion uklart. I denne undersøgelse blev en række myeloid-specifikke udtømningsmetoder anvendt til at dissekere rollerne for individuelle myeloide celleundersæt i overlevelsen af ECTV-infektion. Vi viste, at DC er de primære producenter af type i interferoner (T1-IFN), nødvendige cytokiner til overlevelse efter ECTV-infektion. DC, men ikke makrofager, monocytter eller granulocytter, var nødvendige for kontrol af virus og overlevelse af mus efter ECTV-infektion. Depletion af enten plasmacytoid DC (pDC) alene eller den lymfoide residente DC-delmængde (CD8alpha(+) DC) alene gav ikke dødelig modtagelighed for ECTV. Funktionen af mindst en af PDC-eller CD8alpha(+) DC-undergrupper er imidlertid nødvendig for overlevelse af ECTV-infektion, da mus udtømt af begge populationer var modtagelige for ECTV-udfordring. Tilstedeværelsen af mindst en af disse DC-undergrupper er tilstrækkelig til cytokinproduktion, der reducerer ECTV-replikation og virusspredning, hvilket letter overlevelse efter infektion. Betydning: før udryddelsen af variola virus, orthopoksvirus, der forårsager kopper, en tredjedel af inficerede mennesker bukket under for sygdommen. Efter vellykket udryddelse af kopper er vaccinationsraterne med koppevaccinen faldet markant. Der er nu en stigende forekomst af orthopoksvirusinfektioner, for hvilke der ikke er nogen effektive behandlinger. Desuden er sikkerheden ved koppevaccinen af stor bekymring, da der kan opstå komplikationer, hvilket resulterer i sygelighed. Ligesom mange vira, der forårsager betydelige menneskelige sygdomme, ortopædivira spredes fra et perifert infektionssted for at blive systemisk. Denne undersøgelse belyser det tidlige krav til medfødte immunceller til kontrol af en perifer infektion med ECTV, det forårsagende middel til musekopper. Vi rapporterer, at der er redundans i funktionen af to medfødte immuncelleundersæt til at kontrollere virusspredning tidligt under infektion. Den virale kontrol medieret af disse celleundersæt udgør et potentielt mål for terapier og rationelt vaccinedesign.

Naik, S., et al. (2015). “Commensal-dendritisk-celle interaktion specificerer en unik beskyttende hud immun signatur.”Natur 520 (7545): 104-108. PubMed

huden repræsenterer den primære grænseflade mellem værten og miljøet. Dette organ er også hjemsted for billioner af mikroorganismer, der spiller en vigtig rolle i vævshomeostase og lokal immunitet. Hudmikrobielle samfund er meget forskellige og kan ombygges over tid eller som reaktion på miljømæssige udfordringer. Hvordan, i forbindelse med denne kompleksitet, individuelle kommensale mikroorganismer kan differentielt modulere hudimmunitet, og konsekvenserne af disse reaktioner for vævsfysiologi forbliver uklare. Her viser vi, at definerede kommensaler dominerende påvirker hudimmuniteten og identificerer de cellulære mediatorer, der er involveret i denne specifikation. Især inducerer kolonisering med Staphylococcus epidermidis IL-17A(+) CD8(+) T-celler, der er hjemsted for epidermis, forbedrer medfødt barriereimmunitet og begrænser patogeninvasion. Commensal-specifikke T-celleresponser skyldes den koordinerede virkning af hud-residente dendritiske celleundersæt og er ikke forbundet med betændelse, afslører, at vævsbestandige celler er klar til at fornemme og reagere på ændringer i mikrobielle samfund. Denne interaktion kan repræsentere et evolutionært middel, hvormed hudimmunsystemet bruger svingende kommensale signaler til at kalibrere barriereimmunitet og give heterolog beskyttelse mod invasive patogener. Disse fund afslører, at hudimmunlandskabet er et meget dynamisk miljø, der hurtigt og specifikt kan ombygges ved møder med definerede kommensaler, fund, der har dybe konsekvenser for vores forståelse af vævsspecifik immunitet og patologier.

Sheng, K. C., Et Al. (2014). “IL – 3 og CSF-1 interagerer for at fremme generering af CD11c+ IL-10-producerende makrofager.”PLoS en 9 (4): e95208. PubMed

Unraveling af mekanismerne for hæmatopoiesis reguleret af flere cytokiner forbliver en udfordring i hæmatologi. IL-3 er et allergisk cytokin med multilineage-potentialet, mens CSF-1 produceres i steady state med begrænset afstamningsdækning. Her afdækkede vi en lærerig rolle af CSF-1 i IL-3-medieret hæmatopoiesis. CSF – 1 fremmede signifikant IL-3-drevet CD11c+ celleudvidelse og dæmpet basofil-og mastcellegenerering fra C57BL/6 knoglemarv. Yderligere undersøgelser viste, at CSF-1 / CSF-1R-aksen bidrog væsentligt til IL-3-induceret CD11c+ cellegenerering gennem forbedring af c-Fos-associeret monopoiesis. CD11c + celler induceret af IL – 3 eller IL-3/CSF-1 var kompetente i cellulær modning og endocytose. Både IL-3 og IL-3/CSF-1 celler manglede klassisk dendritisk celleudseende og lignede makrofager i morfologi. Begge populationer producerede et højt niveau af IL-10 ud over IL-1, IL-6 og TNFalpha som reaktion på LP ‘ er og var relativt dårlige t-cellestimulatorer. Samlet set afslører disse fund en rolle for CSF-1 i formidling af IL-3 hæmatopoietisk vej gennem monopoiesis, som regulerer udvidelse af CD11c+ makrofager.

Greter, M., et al. (2012). “GM-CSF kontrollerer ikke-lymfevæv dendritisk cellehomeostase, men kan dispenseres til differentiering af inflammatoriske dendritiske celler.”Immunitet 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) er et kritisk cytokin til in vitro-generering af dendritiske celler (DCs) og menes at kontrollere udviklingen af inflammatorisk DCs og resident CD103(+) DCs i nogle væv. Her viste vi, at I modsætning til den nuværende forståelse virker Csf-2-receptor i steady state for at fremme overlevelse og homeostase af ikke-lymphoid væv-resident CD103(+) og CD11b(+) DCs. Fravær af Csf-2-receptor på lunge-DCs ophævede induktionen af CD8(+) T-celleimmunitet efter immunisering med partikelantigener. I modsætning hertil var Csf-2-receptor dispensabel for differentiering og medfødt funktion af inflammatorisk DC ‘ er under akutte skader. I stedet krævede inflammatoriske DCs CSF-1-receptor til deres udvikling. Således er Csf-2 vigtig i vaccineinduceret CD8(+) T-celleimmunitet gennem regulering af ikke-lymphoid væv DC homeostase snarere end kontrol af inflammatorisk DCs in vivo.

Li, et al. (2012). “Intravital 2-foton billeddannelse af leukocyt handel med bankende hjerte.”J Clin Investere 122 (7): 2499-2508. PubMed

to-foton intravital mikroskopi har væsentligt udvidet vores forståelse af vævs – og organspecifikke forskelle i reguleringen af inflammatoriske reaktioner. Imidlertid vides der lidt om den dynamiske regulering af leukocytrekruttering i betændt hjertevæv, hovedsageligt på grund af tekniske vanskeligheder forbundet med billeddannelse af bevægeligt væv. Her, vi rapporterer en metode til billeddannelse, der slår murine hjerter ved hjælp af intravital 2-fotonmikroskopi. Ved hjælp af denne metode visualiserede vi neutrofilhandel ved baseline og under betændelse. Iskæmi reperfusionsskade induceret ved transplantation eller forbigående koronararterie ligering førte til rekruttering af neutrofiler til hjertet, deres ekstravasation fra koronarårer og infiltration af myokardiet, hvor de dannede store klynger. Podning af hjerter indeholdende mutant ICAM-1, en ligand, der er vigtig for neutrofil rekruttering, reducerede krybningshastighederne for neutrofiler i kar og hæmmede markant deres ekstravasation. Tilsvarende svækkelse blev set ved inhiberingen af Mac-1, en receptor for ICAM-1. Blokade af LFA-1, en anden ICAM-1-receptor, forhindrede neutrofil adhærens til endotel og ekstravasation i hjertetransplantater. Da inflammatoriske reaktioner i hjertet er af stor relevans for folkesundheden, giver denne billeddannelsesmetode løfte om at studere hjerte-specifikke mekanismer til leukocytrekruttering og identificere nye terapeutiske mål til behandling af hjertesygdomme.Tagliani, E., Et Al. (2011). “Koordinere regulering af væv makrofag og dendritisk cellepopulation dynamik ved CSF-1.”J Eksp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

vævsmakrofager (mph ‘ er) og dendritiske celler (DCs) spiller vigtige roller i vævshomeostase og immunitet. Hvordan disse celler opretholdes ved deres karakteristiske tætheder i forskellige væv er forblevet uklart. Hjulpet af en ny strømningscytometrisk teknik til vurdering af relative hastigheder af blodbåren precursorrekruttering, vi undersøgte mphi-og DC-befolkningsdynamik i den gravide musens livmoder, hvor hurtig vævsvækst lettede en dissektion af underliggende reguleringsmekanismer. Vi demonstrerer, hvordan mphi-dynamik, og dermed mphi-vævstætheder, styres lokalt af CSF-1, en pleiotropisk vækstfaktor, hvis In situ-aktivitetsniveau varierede meget mellem livmodervævslag. CSF – 1 handlede dels ved at inducere mphi-proliferation og dels ved at stimulere ekstravasationen af Ly6C(hi) monocytter (Mos), der fungerede som mphi-forløbere. Mo-rekruttering var afhængig af produktionen af CCR2-kemokinreceptorligander af uterine mph ‘ er som respons på CSF-1. Uventet påvirkede en parallel CSF-1-reguleret, men CCR2-uafhængig vej uterin DC-vævstætheder ved at kontrollere lokale ekstravasationshastigheder før DC. Tilsammen giver disse data cellulær og molekylær indsigt i reguleringen af mphi-vævstætheder under ikke-inflammatoriske forhold og afslører en central rolle for CSF-1 i koordineringen af mphi og DC homeostase.

Lim, A. K., Et Al. (2009). “Antistofblokade af c-fms undertrykker progressionen af betændelse og skade i tidlig diabetisk nefropati hos overvægtige db/db-mus.”Diabetologia 52 (8): 1669-1679. PubMed

mål / hypotese: Makrofagmedieret nyreskade spiller en vigtig rolle i udviklingen af diabetisk nefropati. Kolonistimulerende faktor (CSF) -1 er et cytokin, der produceres i diabetiske nyrer og fremmer makrofagakkumulering, aktivering og overlevelse. CSF-1 virker udelukkende gennem c-fms-receptoren, som kun udtrykkes på celler af monocyt-makrofaglinjen. Derfor brugte vi C-fms-blokade som en strategi til selektivt at målrette makrofagmedieret skade under progressionen af diabetisk nefropati. METODE: Overvægtige, type 2 diabetiske db/db BL / KS-mus med etableret albuminuri blev behandlet med et neutraliserende anti-C-FMS monoklonalt antistof (AFS98) eller isotype-matchet kontrol-IgG fra 12 til 18 uger og undersøgt for nyreskade. Resultater: behandling med AFS98 påvirkede ikke fedme, hyperglykæmi, cirkulerende monocytniveauer eller etableret albuminuri hos db/db-mus. AFS98 forhindrede imidlertid glomerulær hyperfiltrering og undertrykte variabler af inflammation i den diabetiske nyre, herunder nyremakrofager (akkumulering, aktivering og proliferation), chemokin CC motiv ligand 2 niveauer (mRNA og urinprotein), nyreaktivering af proinflammatoriske veje (C-Jun amino-terminal kinase og aktiverende transkriptionsfaktor 2) og TNF-alfa (også kendt som Tnf) mRNA niveauer. Desuden mindskede AFS98 vævsskade forårsaget af makrofager, herunder tubulær skade (apoptose og hypertrofi), interstitiel skade (celleproliferation og myofibroblast-periodisering) og renal fibrose (TGF-beta1 og Col4a1 mRNA). Konklusioner/fortolkning: blokade af c-fms kan undertrykke progressionen af etableret diabetisk nefropati hos db / db-mus ved at målrette mod makrofagmedieret skade.