baggrund& mål: cøliaki kunne behandles og potentielt helbredes ved at gendanne t-celletolerance over for gliadin. Vi undersøgte sikkerheden og effekten af negativt ladede 500 nm poly(lactid-co-glycolid) nanopartikler, der indkapsler gliadinprotein (TIMP-GLIA) i 3 musemodeller af cøliaki. Optagelse af disse nanopartikler af antigenpræsenterende celler viste sig at inducere immuntolerance i andre dyremodeller for autoimmun sygdom.
metoder: vi udførte undersøgelser med C57BL/ 6; RAG1 -/ – (C57BL / 6); og HLA-DK8, huCD4 transgene AB0 NOD mus. Mus fik 1 eller 2 haleveinjektioner af TIMP-GLIA eller kontrol nanopartikler. Nogle mus fik intradermale injektioner af gliadin i komplet Freunds adjuvans (immunisering) eller af opløselig gliadin eller ovalbumin (øreudfordring). RAG – / – mus fik intraperitoneale injektioner af CD4 + CD62L-CD44hi T-celler fra gliadin-immuniserede C57BL/6-mus og blev fodret med en Ain-76a-baseret diæt indeholdende hvedegluten (oral udfordring) eller uden gluten. Milt-eller lymfeknudeceller blev analyseret i proliferations-og cytokinsekretionsassays eller ved strømningscytometri, RNA-sekventering eller kvantitativ polymerasekædereaktion i realtid. Serumprøver blev analyseret ved hjælp af gliadin-antistofbundet immunosorbentassay, og tarmvæv blev analyseret ved histologi. Humane perifere blodmononukleære celler eller umodne dendritiske celler afledt af humane perifere blodmononukleære celler blev dyrket i medium indeholdende TIMP-GLIA, anti-CD3-antistof eller lipopolysaccharid (kontroller) og analyseret i proliferations-og cytokinsekretionsassays eller ved strømningscytometri. Fuldblod eller plasma fra raske frivillige blev inkuberet med TIMP-GLIA, og hæmolyse, blodpladeaktivering og aggregering og komplementaktivering eller koagulation blev analyseret.
resultater: TIMP-GLIA øgede ikke markører for modning på dyrkede humane dendritiske celler eller inducerede aktivering af T-celler fra patienter med aktiv eller behandlet cøliaki. I den forsinkede type overfølsomhed (model 1), den transgene HLA-DK8 (model 2) og gliadinhukommelsen T-celle enteropati (model 3) modeller af cøliaki, intravenøse injektioner af TIMP-GLIA reducerede signifikant gliadin-specifik T-celleproliferation (i model 1 og 2), inflammatorisk cytokinsekretion (i model 1, 2 og 3), cirkulerende gliadin-specifik IgG/IgG2c (i model 1 og 2), øre hævelse (i model 1), glutenafhængig enteropati (i model 1) i Model 3) og vægttab (i Model 3). I model 1 blev virkningerne vist at være dosisafhængige. Splenocytter fra HLA-DK8 transgene mus givet TIMP-GLIA nanopartikler, men ikke kontrol nanopartikler, havde øgede niveauer af RÆVP3 og genekspressionssignaturer forbundet med toleranceinduktion.
konklusioner: hos mus med gliadinfølsomhed inducerede injektion af TIMP-GLIA nanopartikler manglende respons på gliadin og reducerede markører for inflammation og enteropati. Denne strategi kan udvikles til behandling af cøliaki.
