abstrakt

udviklingen af en kontinuerlig to-trins centrifugeringsproces til fjernelse af hybridomaceller og celleaffald fra kultur bouillon rapporteres. Målet var at generere supernatant, som direkte kan bruges til ultrafiltrering eller kromatografi uden nogen filtreringstrin.

det første centrifugeringstrin til fjernelse af hybridomaceller fra gentagen batchfermentering i 100 L skala blev udført af en forbedret skivestakseparator. Centrifugen var udstyret med et hydrohermetisk fødesystem, som tillod en skadefri adskillelse af cellerne ved moderat centrifugalkraft.

afklaringen for pattedyrceller i dette trin lå i intervallet 99 til 99,9 %. Mængden af subcellulære partikler i den afklarede væskefase blev reduceret op til 50% af partikelindholdet i fødestrømmen.

i et andet centrifugeringstrin blev fjernelsen af den resterende mængde celleaffald og andre små partikler udført. Det blev udført med centrifugalkræfter op til 18000 * g i en højhastighedscentrifuge udstyret med et kontinuerligt strømningssystem.

de monoklonale antistoffer i den resulterende supernatant blev direkte koncentreret ved ultrafiltrering og kromatografiske metoder. I denne proces blev der ikke observeret nogen begroning af UF-membranerne eller kromatografiske membraner.

omkostninger til membranudskiftning kan reduceres drastisk ved at anvende to-trins centrifugeringsprocessen.