Abstrakt

rozvoj kontinuální dvoustupňové odstřeďování pro odstranění buněk hybridomu a zbytků buněk z kultury vývar je hlášena. Cílem bylo vytvořit supernatant, který lze přímo použít pro ultrafiltraci nebo chromatografii bez jakýchkoli filtračních kroků.

první centrifugační krok pro odstranění hybridomových buněk z opakované dávkové fermentace v měřítku 100 L byl proveden vylepšeným separátorem zásobníku disků. Odstředivka byla vybavena hydrohermetickým podávacím systémem, který umožňoval bez poškození oddělení buněk mírnou odstředivou silou.

objasnění savčích buněk v tomto kroku bylo v rozmezí 99 až 99,9 %. Množství subcelulárních částic v vyčištěné kapalné fázi bylo sníženo až na 50 % obsahu částic v přívodním proudu.

ve druhém kroku centrifugace bylo provedeno odstranění zbývajícího množství buněčného odpadu a dalších malých částic. Bylo provedeno odstředivými silami až do 18000 • g ve vysokorychlostní odstředivce vybavené systémem kontinuálního proudění.

monoklonální protilátky ve výsledném supernatantu byly přímo koncentrovány ultrafiltračními a chromatografickými metodami. Při tomto procesu nebylo pozorováno znečištění UF membrán nebo chromatografických membrán.

náklady na výměnu membrány lze drasticky snížit použitím dvoustupňového odstředivého procesu.