TEXT

Chlamydia trachomatis a Neisseria gonorrhoeae jsou nejrozšířenější bakteriální sexuálně přenosné infekce (STI) ve světě (1). Průběh těchto infekcí je nepředvídatelný a různorodý (2-7). Většina infekcí u žen je asymptomatická a často zůstává nerozpoznaná, což zvyšuje riziko komplikací reprodukčního traktu (6, 8-10). Vhled do mechanismů, které řídí zátěž těchto infekcí, je nezbytný pro kontrolu nemocí. Kromě věku, HIV infekce, a behaviorální faktory, mikrobiologické vlastnosti, včetně bakterií, může hrát důležitou roli v riziku přenosu, klinického obrazu a průběhu infekce (6, 11-14). Chlamydiové zátěže byla spojena s klinickou prezentaci, závažnosti infekce, a přenosnost u zvířecích modelů a u pacientů s oční C. trachomatis infekce (15-17). Bylo prokázáno, že gonorrheální zatížení se liší mezi anatomickými místy a souvisejícími klinickými projevy u mužů (18). I když real-time PCR a kvantifikaci DNA zatížení mají potenciál odhalit nové pohledy na charakteristiky infekce, existuje pouze omezená literatura o významu bakterií a frekvence souběžných STI u žen (19, 20). Znalosti o mikrobiologických charakteristikách infekce by mohly pomoci zlepšit pochopení rozdílů v prevalenci STI na populační úrovni. Cílem této studie bylo vyhodnotit souběh a bakteriální zatížení genitálních a anorektálních infekcí C. trachomatis a N. gonorrhoeae u jihoafrických žen z prostředí vysoké prevalence HIV.

tato studie byla subanalýzou dříve popsané průřezové studie 604 žen ve venkovském okrese Mopani v Jižní Africe (21). Stručně řečeno, souhlasné ženy ve věku 18 až 49 let, které hlásily sexuální aktivitu během předchozího 6 měsíce byly způsobilé. Dotazníky byly dokončeny a vaginální, anorektální a faryngální stěry (Copan Diagnostika, Brescia, Itálie) byly získány zdravotnických pracovníků a skladovány při -20°C. Menses v den náboru a odmítnutí mít všechny tři anatomické stránky byly testovány kritéria pro vyloučení. Symptomatické ženy byly léčeny ve stejný den podle místních léčebných protokolů, které zahrnují oznamovací lístek pro partnera. Asymptomatické ženy se STI prokázanou molekulární detekcí byly vyzvány, aby se vrátily na kliniku ke specifické léčbě. Pro hodnocení uvedené v tomto článku, vybrali jsme všechny ženy (n = 263) vaginálně a/nebo anorectally napaden alespoň jedním z následujících patogenů: C. trachomatis (n = 107), N. gonorrhoeae (n = 66), Mycoplasma genitalium (n = 66), a Trichomonas vaginalis (n = 116). Protože jsme pozorovali pouze jednu ženu s orofaryngeální infekcí, vyloučili jsme toto anatomické umístění z dalších analýz. Výbor pro výzkum lidské etiky na University of Witwatersrand v Jižní Africe studii schválil (referenční číslo). M110726), včetně testování m.genitalium a T. vaginalis.

Suché tampony byly transportovány na suchém ledu za účelem provedení laboratorních vyšetření v Laboratoři pro Imunogenetiku, VU University Medical Center, Amsterdam, Nizozemsko. Bakteriální DNA byla extrahována pomocí vysoce čisté sady pro přípravu šablony PCR (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN) následované detekcí PCR v reálném čase C. trachomatis, N. gonorrhoeae a T. vaginalis pomocí testu PrestoPluS CT-NG-TV (Microbiome Ltd. Amsterdam, Nizozemsko) a LightMix real-time PCR kit (TIB Molbiol, Berlin, Německo), M. genitalium, jak je popsáno jinde (21, 22) (D. J. de Waaij, J. H. Dubbink, R. P. H. Peters, S. Ouburg, a. S. a. Morré, nepublikované údaje). Zatížení bakteriální DNA C. trachomatis a N. gonorrhoeae bylo vypočteno následovně. Hodnota CP (crossing-point), tj. počet amplifikačních cyklů před dosažením standardizovaného prahu, souvisela s kalibrační křivkou známého množství DNA C. trachomatis a N. množství DNA gonorrhoeae k určení množství bakteriální DNA. V naší analýze, bakteriální zatížení je k dispozici jako logaritmus počtu zařazení-tvořící jednotky (IFU) za nanolitrových pro C. trachomatis a jako logaritmus počtu kopií na mikrolitr pro N. gonorrhoeae. Statistické analýzy byly provedeny pomocí chí-kvadrátového testu nebo Fisherova přesného testu a Mann-Whitneyho u testu k porovnání dichotomických a spojitých proměnných mezi skupinami. Hodnota P menší než 0,05 byla považována za statisticky významnou pro všechny testy.

z 263 žen s genitální a/nebo anorektální STI mělo 247 (94%) genitální STI a 73 (27%) anorektální STI. Medián věku všech žen (n = 263) byl 29 (rozmezí 18 až 49) let a infekce HIV byla hlášena 33%, zatímco 44% uvedlo testování HIV negativní v posledních 6 měsících a 24% neznalo jejich stav. Fellatio bylo hlášeno 13% žen a receptivní anální styk (RAI) o 5,5%.

distribuce genitálních mikroorganismů je znázorněna na obr. 1. Anorektální infekce byla způsobena u 64 (88%)/73 žen jediným mikroorganismem: C. trachomatis v 34/43, N. gonorrhoeae v 9/15, m. genitalium v 16/17 a T. vaginalis v 5/7. Jednotlivé infekce byly významně častější v anorektálním místě než v genitálním místě (88% oproti 74%, P = 0, 013). Mezi 107 ženami s infekcí C. trachomatis mělo 32 (30%) žen dvojitou infekci (kombinovaná genitální a rektální infekce). Mezi 66 ženami s infekcí n. gonorrhoeae mělo 9 (14%) žen dvojitou infekci. U 66 a 116 žen s infekcí m. genitalium a infekcí T. vaginalis měly 3 (4, 5%) a 4 (3, 4%) ženy dvojitou infekci.

medián zátěže genitálního C. trachomatis byl 2,7 log10 IFU / nl (rozmezí 0,36 až 4,5) a zatížení anorektálního C. trachomatis 2,5 log10 IFU/nl (rozmezí 0,58 až 3,6). Pro N. gonorrhoeae, střední zatížení genitální infekce byla 2,7 log10 kopií/µl (rozmezí 1,6 až 8.0) a rektální infekce byl 4,4 log10 kopií/µl (rozmezí 2.2 až 6.3). Charakteristiky a asociace genitální a rektální bakteriální zátěže jsou uvedeny v tabulce 1. V multivariační analýzy, věku ≤24 let (P = 0.009) a těhotenství (P = 0, 023) byly nezávisle spojeny s vyšší C. trachomatis zatížení a stejné věkové skupině (P < 0.0001) a měla více než 1 sexuální partner v posledních 6 měsících (P = 0.029) s vyšším N. gonorrhoeae zatížení. Asociace souběžného vztahu v posledním roce se zátěží n. gonorrhoeae se již neprojevila v multivariační analýze (P = 0,32).

Tato zpráva popisuje souběh STI a bakteriální DNA zatížení v Jižní Africké ženy s genitální a anorektální infekce Chlamydia trachomatis a Neisseria gonorrhoeae infekce. Bylo zveřejněno pouze několik zpráv o studiích o těchto mikrobiologických charakteristikách infekce a podle našich znalostí je to první zpráva o studii provedené ve venkovském prostředí s vysokou prevalencí HIV. Pozorovali jsme, že téměř polovina žen s genitální C. trachomatis infekce (47%) a N. gonorrhoeae infekce (48%) mělo současně genitální infekce. Ačkoli existují omezené znalosti o významu smíšených infekcí, ty by teoreticky mohly zvýšit náchylnost k dlouhodobým komplikacím a přenosnost pro individuální STI. Smíšené rektální infekce byly významně méně časté u žen než genitální STI, protože 88% těchto infekcí bylo způsobeno jediným mikroorganismem. Možných vysvětlení by bylo méně-časté vystavení infekci, jako RAI nebylo běžné v naší kohortě, a různé náchylnosti anorektální sliznice pro některé mikroorganismy.

ženy s dvojitou infekcí měly významně vyšší genitální zátěž C. trachomatis a N. gonorrhoeae než ženy pouze s genitální infekcí. Pokud je nám známo, nebylo to dříve hlášeno a mohlo by to podpořit hypotézu autoinokulace cervikovaginálními tekutinami z pochvy do konečníku. Tato možná role přelévání by mohla vysvětlit vysokou prevalenci anorektální infekce navzdory nízké frekvenci RAI v naší studii (23, 24).

nepozorovali jsme žádný významný rozdíl mezi bakteriálním zatížením jednotlivých a smíšených infekcí u žádné ze STI. V souladu se dvěma dalšími studiemi založenými na amplifikaci nukleových kyselin (Naat) jsme nepozorovali vztah mezi bakteriální zátěží a genitální symptomatologií (25, 26). Vodstrcil a jeho kolegové pozorovali v nedávném přehledu, že studie založené na kultuře s větší pravděpodobností najdou souvislost se známkami a příznaky než studie založené na NAAT (89% oproti 38%) (27). To by se mohlo projevit tendencí životaschopných organismů být těsněji spojovány s klinickými projevy. Mladší věk a těhotenství byly nezávisle spojeny s vyšší bakteriální zátěží C. trachomatis a mladší věk a měl více než jednoho sexuálního partnera v posledních 6 měsících s vyšším zatížením n. gonorrhoeae. Stejný souvislosti s věkem (pro C. trachomatis) v několika NAAT studií byl popsán před a může být v důsledku změn v oblasti krční epitelu nebo mladší ženy jsou více sexuálně aktivní a vykazují rizikovější chování, nebo možná odrážejí získané imunity u dospělých (28-30). Naše studie měla několik omezení. Nejprve jsme nezohlednili variabilitu vzorkování hlášením zatížení odpovídajících počtu eukaryotických buněk. Nicméně, protože zánětlivé buňky, které jsou přitahovány k místu infekce, by byly zahrnuty mezi vzorkované buňky, zátěž na eukaryotickou buňku by byla snížena (25). Druhým omezením může být použití uskladněných vzorků, ale literatura nevykazuje klinicky významný dopad degradace (31). Poslední omezení mohou být zastoupeny ženy používání antimikrobiálních látek, což je faktor, který by způsobil nám podceňovat naše výsledky do jisté míry, protože to nebylo vyloučení kritéria.

Závěrem lze říci, že tato studie odhalila časté souběžné infekce C. trachomatis a N. gonorrhoeae a rozdíly v bakteriálních zátěžích v prostředí vysoké prevalence HIV. Tyto nové poznatky mohou pomoci vysvětlit rozdíly v prevalenci STI na úrovni populace, kde je zapotřebí zvýšené úsilí ke kontrole zátěže infekcí C.trachomatis a N. gonorrhoeae.