Měření Kmenových Buněk v Pupečníkové Krvi: Hodnota CFU Assay

leden 2013

Stephen J. Szilvassy, PhD

Stephen J. Szilvassy, PhD,
náměstek Ředitele Krvetvorných
Produkty Výzkumu & Rozvoj
STEMCELL Technologies Inc.
Vancouver, Kanada

Představte si tento scénář. Mám uzavřenou krabici. Obsahuje něco velmi vzácného! To se může změnit-stávka, že-to může zachránit život vašeho dítěte! Postarám se o krabici tak dlouho, jak budete chtít, za poplatek. Řekni mi to, až to budeš potřebovat. Pokud se později rozhodnete, že už nechcete, abych tu krabici ukládal, můžete kdykoli odejít. Možná si myslíte: „Zní to docela skvěle! Ale jak mám opravdu vědět, že to, za co platím, udělá to, co říkáte? Určitě by bylo lepší, kdybych měl něco, co by mi dalo větší důvěru“. Pro všechny jeho nádherné vyhlídky a prokázal schopnost zachránit životy lidí s krevní rakoviny a jiných onemocnění kostní dřeně, to je v podstatě hlavolam z vlastní pupečníkové krve (CB) bankovnictví.

mnoho rodičů se rozhodne nechat zmrazit a uložit pupeční CB svého dítěte jako budoucí zdroj kmenových buněk. Tyto vzácné, ale vysoce účinný buněk může být dána k dítěti přišli z nebo do blízkého člena rodiny, jako léčba některých druhů rakoviny, onemocnění krve, a vývojové poruchy. Rodiče toto rozhodnutí ve většině případů provádějí, aniž by skutečně věděli, zda jsou buňky CB zdravé a mají schopnost dělat to, co doufají, že udělají, až přijde čas. Existuje však několik jednoduchých testů, které mohou měřit počet a životaschopnost kmenových buněk v jednotce CB, když je nakloněna. Pokud tyto testy ukazují, že v jednotce CB jejich dítěte je dostatečný počet kmenových buněk a tyto buňky jsou zdravé, měli by mít rodiče větší důvěru v kvalitu CB jejich dítěte a spolehlivost jejich investic.

mnoho bank CB provádí test nazvaný „test CD34“. CD34 je protein, který je exprimován na povrchu většiny kmenových buněk. Protein CD34 tak může sloužit jako „marker“ pro počítání kmenových buněk ve vzorku CB. Čím více buněk exprimuje CD34, tím více kmenových buněk je pravděpodobně přítomno. Pravděpodobně. Zatímco exprese CD34 je užitečným nepřímým ukazatelem počtu kmenových buněk, pouze asi 10-20% pozitivních buněk CD34 může skutečně proliferovat a produkovat nové krevní buňky. To znamená, že samotné měření buněk CD34 může nadměrně odhadnout skutečný počet kmenových buněk ve vzorku. Kromě toho analýza samotné exprese CD34 nemusí nutně znamenat, že buňky pozitivní na CD34 jsou zdravé. Kmenové buňky mohou být poškozeny postupy používanými při sběru a zpracování jednotky CB.

test „jednotky tvořící kolonie „nebo“ CFU “ je dalším testem, který lze použít k měření nejen počtu, ale také kvality kmenových buněk v CB. V tomto testu se velmi malý vzorek CB buněk pěstuje v kultivační misce obsahující růstové faktory. V těchto kulturách se primitivní kmenové buňky dělí. Jeden kmenové buňky dvě dceřiné buňky, které se pak čtyři, osm, šestnáct a tak dále až 1-2 týdny později pokrm obsahuje mnoho kolonií skládá ze stovek nebo tisíců buněk, každý odvozeny z kmenových buněk, která byla přítomna v původním vzorku. Tyto kolonie lze spočítat tak, aby udávaly počet CFU nebo kmenových buněk, které byly přítomny v původní jednotce CB. Každá kolonie se rovná jedné kmenové buňce a stejně jako u buněk pozitivních na CD34 je lepší mít více.

můžete se zeptat: „který test je lepší pro měření kvality jednotky CB; test CD34 nebo test CFU?“Odpověď spočívá v tom, co tyto testy měří. Test CD34 počítá buňky podle fyzické vlastnosti, exprese CD34, ale neměří funkci buněk. Primární výhodou testu CD34 je, že je rychlý a dává odpověď během několika hodin. Test CFU trvá 1-2 týdny, ale jeho důležitou výhodou je, že měří buněčnou funkci, schopnost kmenové buňky množit se a produkovat zralé krvinky. Bylo provedeno několik klinických studií s cílem určit, který test lépe předpovídá, zda a jak rychle bude kostní dřeň pacienta doplněna po transplantaci kmenových buněk. Ve srovnání s hlavou k hlavě většina takových studií ukázala, že počet CFU v jednotce CB je jediným nejlepším ukazatelem úspěšného štěpení a celkové přežití po transplantaci CB.

pojďme tedy znovu do pole. Zázraky transplantace kmenových buněk CB obsažené v ní změnily lékařskou praxi. Rodiče a lékaři mohou použít dva běžné testy k určení kvality svých kmenových buněk CB. Když jsou sázky tak vysoké, nechtěli byste použít test, který vám poskytne nejlepší představu o tom, co je uvnitř vaší krabice?

Pro více informací o CFU testu a jak je používá k měření kmenových buněk v pupečníkové krvi, navštivte prosím stemcell.com pro následující zdroje: Testy účinnosti pro měření štěpného potenciálu hematopoetických kmenových a progenitorových buněk a CFC test pro pupečníkovou krev.

Stephen J. Szilvassy, PhD, Associate Director Krvetvorných Produkty Výzkumu & Vývoj v STEMCELL Technologies Inc., přední společnost v oblasti kmenových buněk a regenerativní medicíny se sídlem ve Vancouveru v Kanadě. Vede skupinu výzkumných pracovníků, kteří vyvíjejí nástroje pro vědce a lékaře pracující v oblasti vývoje kmenových buněk kostní dřeně a pupečníkové krve. Dr. Szilvassy má více než 27 let zkušeností v oblasti krvetvorných kmenových buněk biologie, včetně 7 let jako tenured Profesor Medicíny na University of Kentucky Lucille P. Markey Cancer Center. Vedl týmy k vývoji nových léků pro léčbu maligních a nemaligních hematologických poruch a solidních nádorů v několika biotechnologických společnostech. Před nástupem do STEMCELL byl Dr. Szilvassy v letech 2003-2011 hlavním vědcem v Hematologicko-onkologickém výzkumu v Amgen, největší biotechnologické společnosti na světě. Je autorem více než 40 recenzovaných výzkumných a recenzních článků a kapitol knih na téma krevních kmenových buněk. Je dlouholetým členem Americké Society of Hematology, Mezinárodní Společnost Experimentální Hematologie a Mezinárodní Společnosti pro Výzkum Kmenových Buněk, a působil jako člen redakční rady a recenzent vědeckých časopisů vydávaných těmito organizacemi.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.