Korelace IFNy, CD107 a CD137 na úrovni jedné buňky může být použita ke sledování odpovědí T buněk u pacientů po imunoterapii.

Jako imunoterapie stále důležitější v léčbě různých druhů rakoviny, sledování imunitní odpovědi tak, aby odrážely účinnost terapie se také stává stále důležitější. Dříve, nádor antigen-specifické humorální odpovědi u pacientů léčených vakcínami pro low-grade folikulární lymfom (FL) v korelaci s klinickými výsledky, včetně regrese nádoru, molekulární remise, v přežití bez progrese (PFS) a celkové přežití (OS). Naproti tomu imunitní odpovědi T buněk bylo obtížné ověřit. Testy proliferace T buněk většinou měří odpovědi CD4 T buněk; zatímco CD8 T buňky mohou být důležitými efektory generovanými imunoterapií. Avšak testy určené k měření CD8 T buněk, tj. testy CTL s uvolňováním chromu a testy IFN-γ ELISPOT a intracelulární průtokové cytometrie jsou obtížně reprodukovatelné. K řešení tohoto problému, PBL byly získány z FL pacientů, zmrazenými, a rozmrazí, poté použity pro návrh standardizované metody pro detekci intracelulárních IFN-γ pomocí průtokové cytometrie. Kombinovaný stimul rozpustných anti-CD3 a anti-CD28 protilátek poskytuje robustní stimulaci, typicky asi 5% normálních PBL CD8+ T buněk reaguje. Použitím panelu ozářených buněčných linií lymfomu B buněk jako stimulátorů jsme prokázali, že v průměru 1-2% těchto T buněk bylo schopno v tomto testu dosáhnout odpovědi. Překvapivě byly CD8+ PBL T buňky od několika pacientů s FL citlivější na kombinovanou stimulaci anti-CD3 a anti-CD28, stejně jako na alo-stimulaci, 15-22% a 2 – 6%. Tato reakce byla doprovázena povrchu výraz CD107, náhradní marker pro CTL degranulace, ve stejné populace buněk, jak bylo prokázáno pomocí vícebarevné průtokové cytometrie. Jak IFN-γ, tak CD107 odpovědi byly inhibovány protilátkou třídy I, W6 / 32, což naznačuje, že odpověď zprostředkovaná receptorem T buněk třídy I byla omezená. Dále, v pozdějších časových bodech, tyto T buňky také up-regulované CD137 na jejich povrchu. Tato aktivační molekula je upregulována na CD8 T buňkách v reakci na specifické rozpoznávání antigenu a poskytuje buňkám antiapoptotický signál. Závěrem lze říci, že imunitní kompetence CD8 T buněk izolovaných od pacientů s FL může být hodnocena pomocí alo-stimulace panelem buněčných linií lymfomu B buněk. Ještě důležitější je, korelace pomocí průtokové cytometrie 3 nezávislé ukazatele odpovědi (IFN-γ, CD107 a CD137) v rámci jedné populace buněk, aby oba allo-stimulace a konkrétní cíle, může vést k lepšímu pochopení role T buněk v imunitní odpovědi. Nakonec bude nutné tyto odpovědi validovat s výsledky pacientů v klinických studiích vakcín u lymfomu.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.