Klonování cDNA

Reverzní transkripci RNA na komplementární DNA (cDNA) je prvním krokem v mnoha molekulární biologie pracovní postupy, včetně studium genové exprese pomocí real-time PCR, gen klonování a ve vytváření cDNA knihoven.

knihovna cDNA je sbírka klonovaných sekvencí DNA, které jsou komplementární k mRNA, která byla extrahována z dané buňky nebo tkáně. Knihovna představuje pouze transkribované sekvence v rámci konkrétního vzorku a může poskytnout množství informací o totožnosti a funkce specifických genů. knihovny cDNA také poskytují vhled do množství RNA produkované ve vzorku, protože čím více je mRNA vyjádřena, tím více cDNA bude produkováno.

při konstrukci knihoven cDNA je nezbytné, aby klony cDNA byly reprezentativní pro původní populaci RNA, a to jak z hlediska jejich celé délky, tak relativní hojnosti. To znamená, že volba reverzní transkriptázy použité v tomto kroku má zásadní význam. Při klonování cDNA a vytváření knihoven cDNA doporučujeme naši řadu produktů UltraScript a UltraScript 2.0. Tyto vysoce aktivní a termostabilní enzymy jsou schopné syntetizovat více plné délky cDNA produktu, a to i s omezeným množství RNA, RNA vyjádřené v nízké úrovni nebo obsahující vysoký stupeň sekundární struktury.