InVivoMAb anti-mouse CSF1R (CD115) (Clone: AFS98)

Bauche, D., et al. (2018). „LAG3(+) Regulatory T Cells Restrain Interleukin-23-Producing CX3CR1(+) Gut-Resident Macrophages during Group 3 Innate Lymphoid Cell-Driven Colitis.“ Immunity 49(2): 342-352 e345. PubMed

Interleukin-22 (IL-22)-producing group 3 innate lymphoid cells (ILC3) maintains gut homeostasis but can also promote inflammatory bowel disease (IBD). The regulation of ILC3-dependent colitis remains to be elucidated. Zde ukazujeme, že Foxp3 (+) regulační T buňky (Treg buňky) zabránily kolitidě zprostředkované ILC3 nezávislým způsobem. Treg buňky inhibovaly produkci IL-23 a IL-1beta ze střevních rezidentních makrofágů CX3CR1 (+), ale ne CD103 (+) dendritických buněk. Kromě toho Treg buňky omezily produkci ILC3 IL-22 potlačením produkce makrofágů CX3CR1 (+) IL-23 a IL-1beta. Tato suprese byla závislá na kontaktu a byla zprostředkována latentní aktivační Gen-3 (LAG-3)-receptor imunitního kontrolního bodu-exprimovaný na Treg buňkách. Zapojení LAG-3 do MHC třídy II vedlo k hluboké imunosupresi CX3CR1 (+) makrofágů rezidentních v tkáních. Naše studie ukazuje, že zdraví střevní sliznice je udržována v ose poháněné Treg buněk komunikace s rezidentní makrofágy, které zadržovat zánětlivé podněty potřebné pro ILC3 funkce.

Gordon, S. R., et al. (2017). „Exprese PD-1 makrofágy spojenými s nádorem inhibuje fagocytózu a imunitu nádoru.“Příroda 545 (7655): 495-499. PubMed

programované buněčné smrti protein 1 (PD-1) je imunitní checkpoint receptor, který je upregulován na aktivovaných T buněk k indukci imunitní tolerance. Nádorové buňky často nadměrně exprimují ligand pro PD-1, programovaný ligand buněčné smrti 1 (PD-L1), což usnadňuje jejich únik z imunitního systému. Monoklonální protilátky, které blokují interakci mezi PD-1 a PD-L1, vazbou na ligand nebo receptor, ukázaly, pozoruhodné klinické účinnosti u pacientů s různými druhy rakoviny, včetně melanomu, kolorektálního karcinomu, nemalobuněčného karcinomu plic a Hodgkinova lymfomu. I když je dobře prokázáno, že blokáda PD-1-PD-L1 aktivuje T buňky, je málo známo o úloze, kterou tato cesta může mít u makrofágů spojených s nádorem (tam). Zde ukazujeme, že myši i lidské TAMs vyjadřují PD-1. Exprese tam PD-1 se v průběhu času zvyšuje u myších modelů rakoviny a se zvyšujícím se stádiem onemocnění u primárních lidských rakovin. TAM PD-1 exprese koreluje negativně s fagocytární účinnost proti nádorovým buňkám, a blokáda PD-1-PD-L1 in vivo zvyšuje fagocytózy makrofágů, snižuje růst nádoru a prodlužuje přežití myší v myších modelech rakoviny u makrofágů závislé na módě. To naznačuje, že terapie PD-1-PD-L1 mohou také fungovat přímým účinkem na makrofágy, s podstatnými důsledky pro léčbu rakoviny těmito látkami.

Moynihan, K. D., et al. (2016). „Eradikace velkých zavedených nádorů u myší kombinovanou imunoterapií, která zabírá vrozené a adaptivní imunitní odpovědi.“Nat Med. doi: 10.1038 / nm.4200. PubMed

Checkpoint blokáda s protilátkami specifickými pro cytotoxické T lymfocyty asociovaný protein (CTLA)-4 nebo programované buněčné smrti 1 (PDCD1; také známý jako PD-1) vyvolává odolné regrese nádoru u metastatického karcinomu prsu, ale tyto dramatické reakce jsou omezeny pouze u menšiny pacientů. Tento suboptimální výsledek je pravděpodobně částečně způsoben komplexní sítí imunosupresivních drah přítomných v pokročilých nádorech,které je nepravděpodobné, že by byly překonány intervencí na jediném signalizačním kontrolním bodě. Zde popíšeme kombinace imunoterapie, že rekruti různé vrozené a adaptivní imunitní buňky k odstranění velkého nádoru zátěže v syngenních nádorových modelů a geneticky modifikované myši model melanomu; naše znalosti nádory této velikosti nebyly dříve léčitelná tím, že procedury se spoléhat na endogenní imunitu. Maximální protinádorová účinnost vyžaduje čtyři složky: protilátka zaměřená na tumor-antigen, rekombinantní interleukin-2 s prodlouženým poločasem, anti-PD-1 a silná vakcína proti T buňkám. Experimenty s deplecí odhalily, že pro regresi nádoru byly vyžadovány CD8+ T buňky, zkřížené dendritické buňky a několik dalších vrozených podmnožin imunitních buněk. Účinná léčba indukované infiltraci imunitních buněk a produkci zánětlivých cytokinů v nádoru, lepší protilátkami zprostředkovaná nádor antigen příjmu a povýšen antigen šíření. Tyto výsledky ukazují na způsobilost vyvolaná endogenní imunitní odpověď zničit velké, zavedené nádorů a objasnit základní vlastnosti kombinace imunoterapie, že jsou schopni vyléčit většinu nádorů v experimentální nastavení obvykle vnímána jako neřešitelné.

Arnold, I. C., et al. (2015). „Monocyty/makrofágy CD11c podporují chronický střevní zánět vyvolaný Helicobacter hepaticus produkcí IL-23.“Mucosal Immunol. doi: 10.1038 / mi.2015.65. PubMed

u zánětlivých střevních onemocnění doprovází rozpad mikrobiálních interakcí hostitele trvalou aktivaci imunitních buněk ve střevě. Funkční studie naznačují klíčovou roli interleukinu-23 (IL-23) při orchestraci střevního zánětu. IL-23 může být produkován různými mononukleární fagocyty (MNPs) po akutní mikrobiální stimulace, ale málo je známo o klíč mobilní zdroje IL-23, které pohánějí chronické střevní záněty. Zde jsme se zabývali touto otázkou pomocí fyziologického modelu kolitidy řízené bakteriemi. Tím, že kombinuje podmíněné genem ablace a profilování genové exprese, zjistili jsme, že IL-23 produkce CD11c+ MNPs bylo nutné vyvolat střevní immunopathology a identifikovány MHCII+ monocyty a makrofágy jako hlavní zdroj IL-23. Exprese IL-23 monocyty byly získány v průběhu jejich diferenciace ve střevě a koreluje s vyjádřením hlavní histokompatibilní komplex II. třídy (MHCII) a CD64. Naproti tomu Cd103+ CD11b-dendritické buňky závislé na Batf3 byly v tomto modelu postradatelné pro kolitidu vyvolanou bakteriemi. Tyto studie posilují patogenní roli monocytů v dysregulovaných reakcích na střevní bakterie a identifikují produkci IL-23 jako klíčovou složku této odpovědi. Další pochopení funkčních zdrojů IL-23 v různých formách střevního zánětu může vést k novým terapeutickým strategiím zaměřeným na přerušení imunitní patologie řízené IL-23.Mucosal Immunology advance online publikace 5 srpen 2015. doi: 10.1038 / mi.2015.65.

Conde, P., et al. (2015). „DC-SIGN (+) makrofágy řídí indukci transplantační Tolerance.“Imunita 42 (6): 1143-1158. PubMed

tkáňové efektorové buňky linie monocytů se mohou diferencovat na různé typy buněk se specifickou buněčnou funkcí v závislosti na jejich prostředí. Fenotyp, vývojové požadavky a funkční mechanismy imunitních ochranných makrofágů, které zprostředkovávají indukci transplantační tolerance, zůstávají nepolapitelné. Zde jsme prokázat, že kostimulační blokáda přednost hromadění DC-SIGN-vyjádření makrofágy, že inhibuje CD8(+) T buněčné imunity a povýšen CD4(+)Foxp3(+) a Treg buněk rozšíření v číslech. Mechanicky, že simultánní DC-SIGN zapojení fucosylated ligandy a TLR4 signální bylo zapotřebí pro výrobu imunitní regulační IL-10 spojena s dlouhodobé přežití štěpu. Delece DC-SIGN-exprimujících makrofágů in vivo, interferující s jejich vývojem závislým na CSF1, nebo zabránění signální dráze DC-SIGN zrušené tolerance. Společně, výsledky poskytují nové pohledy na tolerogenic účinky kostimulační blokáda a identifikovat DC-SIGN(+) supresivní makrofágy jako klíčové mediátory imunologické tolerance při současné terapeutické důsledky na klinice.

Kaminsky, L. W., et al. (2015). „Redundantní funkce Plazmocytoidních a konvenčních dendritických buněk je nutná k přežití přirozené virové infekce.“J Virol 89 (19): 9974-9985. PubMed

viry, které se systémově šíří z periferního místa infekce, způsobují morbiditu a mortalitu v lidské populaci. Vrozené myeloidní buňky, včetně monocytů, makrofágů, dendritických buněk odvozených od monocytů (mo-DC) a dendritických buněk (DC), reagují brzy během virové infekce na kontrolu replikace viru, což snižuje šíření viru z periferního místa. Ectromelia virus (ECTV), ortopoxvirus, který přirozeně infikuje myš, se šíří systémově z periferního místa infekce a vede k úmrtí vnímavých myší. Zatímco fagocytární buňky mají nezbytnou roli v odpovědi na ECTV, požadavek na jednotlivé populace myeloidních buněk během akutní imunitní odpovědi na periferní virovou infekci je nejasný. V této studii, různé myeloidní specifické vyčerpání metody byly použity k pitvat role jednotlivých myeloidní buňky podskupin v přežití ECTV infekce. Ukázali jsme, že DC jsou primárními producenty interferonů typu I (T1-IFN), nezbytných cytokinů pro přežití po infekci ECTV. DC, ale ne makrofágy, monocyty nebo granulocyty, byly vyžadovány pro kontrolu viru a přežití myší po infekci ECTV. Deplece plazmocytoidního DC (pDC) samotného nebo lymfoidní rezidentní DC podskupiny (Cd8alfa(+) DC) samotné nezpůsobila letální citlivost na ECTV. Pro přežití infekce ECTV je však nutná funkce alespoň jedné z podskupin pDC nebo CD8alpha(+) DC, protože myši vyčerpané z obou populací byly citlivé na výzvu ECTV. Přítomnost alespoň jedné z těchto podmnožin DC je dostatečná pro produkci cytokinů, která snižuje replikaci ECTV a šíření viru, což usnadňuje přežití po infekci. DŮLEŽITÉ: Před vymýcení viru varioly, orthopoxvirus, který způsobuje neštovice, jedna třetina nakažených lidí, podlehl nemoci. Po úspěšné eradikaci neštovic se míra očkování vakcínou proti neštovicím významně snížila. Nyní se zvyšuje výskyt zoonotických ortopoxvirových infekcí, u nichž neexistuje účinná léčba. Kromě toho je bezpečnost vakcíny proti neštovicím velmi znepokojivá, protože mohou vzniknout komplikace, které vedou k morbiditě. Stejně jako mnoho virů, které způsobují významná lidská onemocnění, se ortopoxviry šíří z periferního místa infekce, aby se staly systémovými. Tato studie objasňuje časný požadavek na vrozené imunitní buňky při kontrole periferní infekce ECTV, původce mousepoxu. Uvádíme, že existuje redundance ve funkci dvou vrozených podmnožin imunitních buněk při kontrole šíření viru brzy během infekce. Virová kontrola zprostředkovaná těmito podskupinami buněk představuje potenciální cíl pro terapie a racionální návrh vakcíny.

Naik, S., et al. (2015). „Interakce komenzal-dendritické buňky specifikuje jedinečný ochranný imunitní podpis kůže.“Příroda 520 (7545): 104-108. PubMed

kůže představuje primární rozhraní mezi hostitelem a prostředím. Tento orgán je také domovem bilionů mikroorganismů, které hrají důležitou roli v tkáňové homeostáze a lokální imunitě. Kožní mikrobiální komunity jsou velmi rozmanité a mohou být přestavovány v průběhu času nebo v reakci na výzvy v oblasti životního prostředí. Jak v souvislosti s touto složitostí mohou jednotlivé komenzální mikroorganismy odlišně modulovat imunitu kůže a důsledky těchto reakcí na fyziologii tkání zůstávají nejasné. Zde ukazujeme, že definované komenzály dominantně ovlivňují imunitu kůže a identifikují buněčné mediátory zapojené do této SPECIFIKACE. Zejména kolonizace Staphylococcus epidermidis indukuje IL-17A (+) CD8 (+) T buňky, které jsou domovem epidermis, zvyšují vrozenou bariérovou imunitu a omezují invazi patogenů. Komenzální-specifické T-buněčné odpovědi jsou výsledkem koordinované činnosti kůže-resident dendritické buňky, podskupiny a nejsou spojeny se zánětem, odhalující, že tkáně-rezidentní buňky jsou připraveny vnímat a reagovat na změny v mikrobiálních společenství. Tato interakce může představovat evoluční prostředky, které kůži imunitní systém používá kolísavé komenzální signály pro kalibraci bariéru imunitu a poskytují heterologní ochrana proti invazivní patogeny. Tyto nálezy ukazují, že kůže imunitní krajina je velmi dynamické prostředí, které lze rychle a konkrétně remodelled setkání s definovanými commensals, zjištění, že mít dalekosáhlé důsledky pro naše porozumění tkáňově specifické imunity a patologických stavů.

Sheng, K. C., et al. (2014). „IL-3 a CSF-1 interagují na podporu generace makrofágů produkujících CD11c+ IL-10.“PLoS One 9 (4): e95208. PubMed

rozpletení mechanismů krvetvorby regulovaných více cytokiny zůstává výzvou v hematologii. IL-3 je alergický cytokin s multilineagním potenciálem, zatímco CSF-1 je produkován v ustáleném stavu s omezeným pokrytím linie. Zde jsme odhalili poučnou roli CSF-1 v hematopoéze zprostředkované IL-3. CSF-1 významně podporoval expanzi buněk CD11c+ řízenou IL-3 a tlumenou tvorbu bazofilů a žírných buněk z kostní dřeně C57BL/6. Další studie ukázaly, že CSF-1/CSF-1R osa významně přispěl k IL-3-indukované CD11c+ buněk generace prostřednictvím zvýšení c-Fos-spojené monopoiesis. CD11c + buňky indukované IL – 3 nebo IL-3/CSF-1 byly kompetentní v buněčném zrání a endocytóze. Jak IL-3, tak IL-3/CSF-1 buňky postrádaly klasický vzhled dendritických buněk a morfologicky připomínaly makrofágy. Obě populace produkovaly vysokou hladinu IL-10, kromě IL-1, IL-6 a Tnfalfa, v reakci na LPS, a byly relativně špatnými stimulátory T buněk. Souhrnně tato zjištění odhalují roli CSF-1 při zprostředkování hematopoetické dráhy IL-3 monopoézou, která reguluje expanzi CD11c + makrofágů.

Greter, M., et al. (2012). „GM-CSF řídí homeostázu nonlymfoidních tkání dendritických buněk, ale je postradatelný pro diferenciaci zánětlivých dendritických buněk.“Imunita 36 (6): 1031-1046. PubMed

GM-CSF (Csf-2) je kritická cytokinů pro in vitro generace dendritických buněk (DCs) a je myšlenka k řízení rozvoje zánětlivých DCs a bydliště CD103(+) Dc v některých tkáních. Zde jsme ukázali, že na rozdíl od současného chápání, Csf-2 receptor působí v ustáleném stavu k podpoře přežití a homeostázy nonlymphoid tkáně-resident CD103(+) a CD11b(+) Dc. Absence receptoru Csf-2 na plicních DCs zrušila indukci imunity CD8 (+) T buněk po imunizaci antigeny částic. Naproti tomu receptor Csf-2 byl postradatelný pro diferenciaci a vrozenou funkci zánětlivých DCs během akutních poranění. Místo toho zánětlivé DC vyžadovaly pro svůj vývoj receptor Csf-1. Csf-2 je tedy důležitý v imunitě CD8(+) T buněk vyvolané vakcínou prostřednictvím regulace homeostázy DC nonlymfoidní tkáně spíše než kontroly zánětlivých DC in vivo.

Li, W., et al. (2012). „Intravitální 2-fotonové zobrazování obchodování s leukocyty v tlukotu srdce.“J Clin Invest 122 (7): 2499-2508. PubMed

Dvoufotonová intravitální mikroskopie podstatně rozšířila naše chápání rozdílů specifických pro tkáně a orgány v regulaci zánětlivých odpovědí. O dynamické regulaci náboru leukocytů do zanícené srdeční tkáně je však známo jen málo, a to z velké části kvůli technickým obtížím spojeným se zobrazováním pohyblivé tkáně. Tady, hlásíme metodu zobrazování bití myších srdcí pomocí intravitální 2-fotonové mikroskopie. Pomocí této metody jsme vizualizovali obchodování s neutrofily na začátku a během zánětu. Reperfuzní poranění ischémie vyvolané transplantací nebo přechodnou ligací koronární arterie vedlo k náboru neutrofilů do srdce, jejich extravazaci z koronárních žil a infiltraci myokardu, kde tvořily velké klastry. Roubování srdcí obsahujících mutant ICAM-1, ligand důležitý pro nábor neutrofilů, snížilo rychlost procházení neutrofilů v cévách a výrazně inhibovalo jejich extravazaci. Podobné poškození bylo pozorováno u inhibice Mac-1, receptoru pro ICAM-1. Blokáda LFA-1, dalšího receptoru ICAM-1, zabránila adherenci neutrofilů k endotelu a extravazaci v srdečních štěpech. Jako zánětlivé reakce v centru mají velký význam pro veřejné zdraví, tato zobrazovací přístup je příslibem pro studium srdeční-specifické mechanismy leukocytů nábor a identifikace nových terapeutických cílů pro léčbu onemocnění srdce.

Tagliani, E., et al. (2011). „Koordinovat regulaci tkáňových makrofágů a dynamiku populace dendritických buněk pomocí CSF-1.“J Exp Med 208 (9): 1901-1916. PubMed

tkáňové makrofágy (Mphis) a dendritické buňky (DCs) hrají zásadní roli v tkáňové homeostáze a imunitě. Jak jsou tyto buňky udržovány v jejich charakteristických hustotách v různých tkáních, zůstává nejasné. Podporovaný román pro průtokovou cytometrii techniku pro hodnocení relativní míry krev-nesené předchůdce náboru, jsme se zabývali Mphi a DC populační dynamiky u březích myší dělohy, kde rychlý růst tkáně usnadnit pitva základní regulační mechanismy. Ukazujeme, jak dynamika Mphi, a tedy hustoty tkání Mphi, jsou lokálně řízeny CSF-1, pleiotropní růstový faktor, jehož úroveň aktivity in situ se mezi vrstvami děložní tkáně značně lišila. CSF-1 působil částečně indukcí proliferace Mphi a částečně stimulací extravazace Ly6C (hi) monocytů (Mos), které sloužily jako prekurzory Mphi. Nábor Mo byl závislý na produkci ligandů chemokinových receptorů CCR2 děložním Mphis v reakci na CSF-1. Neočekávaně, paralelní CSF-1-regulovaná, ale CCR2-nezávislá dráha ovlivnila hustotu DC tkáně dělohy kontrolou lokálních rychlostí extravazace před DC. Spolu, tyto údaje poskytují buněčné a molekulární pohled na regulaci Mphi hustoty tkáně pod nezánětlivá podmínky a odhalit ústřední roli pro CSF-1 v koordinaci Mphi a DC homeostázy.

Lim, a.k., et al. (2009). „Blokáda protilátek c-fms potlačuje progresi zánětu a poranění u časné diabetické nefropatie u obézních db / db myší.“Diabetologia 52 (8): 1669-1679. PubMed

cíle / hypotéza: poškození ledvin zprostředkované makrofágy hraje důležitou roli ve vývoji diabetické nefropatie. Faktor stimulující kolonie (CSF)-1 je cytokin, který se produkuje v diabetických ledvinách a podporuje akumulaci, aktivaci a přežití makrofágů. CSF-1 působí výhradně prostřednictvím receptoru c-fms, který je exprimován pouze na buňkách linie monocytů a makrofágů. Proto jsme použili c-fms blokády jako strategie k selektivně cílit makrofágů-zprostředkované zranění během progrese diabetické nefropatie. METOD: Obezitou, diabetem typu 2 db/db BL/KS myší se zavedenými albuminurie byli léčeni neutralizačních anti-c-fms monoklonální protilátka (AFS98) nebo izotypů uzavřeno control IgG od 12 do 18 týdnů věku a zkoumal pro poškození ledvin. Výsledky: léčba AFS98 neovlivnila obezitu, hyperglykémii, cirkulující hladiny monocytů ani prokázanou albuminurii u myší db / db. Nicméně, AFS98 udělal zabránit glomerulární hyperfiltrace a potlačil proměnné zánětu v diabetické ledvinové, včetně ledvin makrofágy (akumulace, aktivace a proliferace), chemokinový CC motif ligand 2 úrovně (mRNA a proteinu v moči), ledvin, aktivace prozánětlivých drah (c-Jun amino-terminální kinázy a aktivace transkripce faktor 2) a Tnf-alfa (také známý jako Tnf) mRNA. Kromě toho, AFS98 snížil poškození tkání způsobené makrofágy včetně tubulů (apoptóza a hypertrofie), intersticiální poškození (buněčné proliferace a myofibroblast akruální) a renální fibrózy (Tgf-beta1 a Col4a1 mRNA). Závěry / interpretace: blokáda c-fms může potlačit progresi zavedené diabetické nefropatie u myší db / db zaměřením na poškození zprostředkované makrofágy.