Pozadí & cíle: Celiac nemoc může být léčena, a potenciálně vyléčit, obnovit T-buněk tolerance gliadinu. Zkoumali jsme účinnost a bezpečnost záporně nabitých 500-nm poly(lactide-co-glycolide) nanočástic zapouzdření bílkovin gliadinu (TIMP-GLIÍ) v 3 myší modely celiakie. Bylo prokázáno, že absorpce těchto nanočástic buňkami prezentujícími antigen indukuje imunitní toleranci u jiných zvířecích modelů autoimunitního onemocnění.
metody: provedli jsme studie s C57BL / 6; RAG1 – /- (C57BL/6); A hla-DQ8, hucd4 transgenní AB0 NOD myši. Myším byly podány 1 nebo 2 injekce ocasní žíly TIMP-GLIA nebo kontrolní nanočástice. Některým myším byly podány intradermální injekce gliadinu v kompletním Freundově adjuvans (imunizace) nebo rozpustného gliadinu nebo ovalbuminu (ear challenge). RAG-/- myši byly uvedeny intraperitoneální injekce CD4+CD62L-CD44hi T buňky z gliadinu-očkování C57BL/6 myší a byly krmeny s AIN-76A-založená strava obsahující lepek pšenice (ústní výzva) nebo bez lepku. Buňky sleziny nebo lymfatických uzlin byly analyzovány v testech proliferace a sekrece cytokinů nebo průtokovou cytometrií, sekvenováním RNA nebo kvantitativní polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase. Vzorky séra byly analyzovány pomocí gliadinu protilátka, enzym-linked immunosorbent assay, a střevní tkáně byly analyzovány pomocí histologie. Lidské periferní krevní mononukleární buňky, nebo nezralé dendritické buňky odvozené z lidských mononukleárních buněk periferní krve byly kultivovány v médiu obsahujícím TIMP-GLIA, anti-CD3 protilátky, nebo lipopolysacharid (kontroly) a analyzovány v proliferace a sekrece cytokinů testy nebo pomocí průtokové cytometrie. Plná krev nebo plazma od zdravých dobrovolníků byla inkubována s TIMP-glií a byla analyzována hemolýza, aktivace a agregace krevních destiček a aktivace komplementu nebo koagulace.
výsledky: TIMP-GLIA nezvýšil značky zrání na kultivovaných lidských dendritických buněk nebo navodit aktivaci T buněk od pacientů s aktivní nebo léčit celiakii. V přecitlivělost oddáleného typu (model 1), HLA-DQ8 transgenních (model 2) a gliadinu paměť T-buněk enteropatie (model 3) modely celiakie, intravenózní injekce TIMP-GLIA výrazně snížil gliadin-specifickými T-buněčné proliferace (v modelech 1 a 2), zánětlivé cytokinové sekrece (v modelech 1, 2 a 3), v oběhu gliadin-specifických IgG/IgG2c (v modelech 1 a 2), ušní otok (v modelu 1), lepek-závislé enteropatie (v modelu 3), a ztráta hmotnosti těla (model 3). V modelu 1 se ukázalo, že účinky jsou závislé na dávce. Splenocytes od HLA-DQ8 transgenních myší vzhledem TIMP-GLIA nanočástic, ale ne kontrolu nanočástic, měli zvýšené hladiny FOXP3 a genové exprese podpisů spojená s tolerancí indukce.
Závěry: U myší s gliadinu citlivost, injekce TIMP-GLIA nanočástic vyvolané necitlivosti gliadinu a snížení markerů zánětu a enteropatie. Tato strategie by mohla být vyvinuta pro léčbu celiakie.
